萬 聰，鄒燕娣，金 瑚，李敏利，張謙益，包李林，熊巍林

(道道全糧油股份有限公司 國家油菜籽加工技術研發(fā)分中心，湖南 岳陽 414000)

檢測分析

濁度儀法快速測定菜籽油中蠟質含量

萬 聰，鄒燕娣，金 瑚，李敏利，張謙益，包李林，熊巍林

(道道全糧油股份有限公司 國家油菜籽加工技術研發(fā)分中心，湖南 岳陽 414000)

為了適應菜籽油中蠟質含量快速測定的要求，根據植物油中的蠟質在低溫時會結晶析出，引起植物油濁度變化，利用濁度儀建立了菜籽油中蠟質含量的快速測定方法?？疾炝巳軇┓N類、溶劑與油的體積比(溶劑比)、冷卻時間對菜籽油中蠟質含量測定的影響。結果表明：以丙酮為溶劑、溶劑比為1∶1、冷卻時間為30 min，在蠟質含量為0～250 mg/kg時，所建立方法的線性方程 為Y=0.078 7X-0.036 5，相關系數R2=0.999，加標回收率為87.84%～110.42%，相對標準偏差(RSD)為1.13%～2.89%。該方法具有良好的準確度和可行性，數據分析簡單，對操作人員的專業(yè)要求不高，適合工廠蠟質含量的監(jiān)控要求。

菜籽油；濁度儀；蠟質含量；快速檢測

Abstract：In order to meet the requirement of rapid determination of wax content in rapeseed oil,a new method for the determination of wax content in rapeseed oil by turbidity instrument was established,according to the wax in vegetable oil would crystallize and precipitate at low temperature and the turbidity would change.The effects of solvents,volume ratio of solvent to oil and cooling time on wax content in rapeseed oil were investigated.The results showed that the optimal conditions were obtained as follows: with acetone as solvent,volume ratio of solvent to oil 1∶1 and cooling time 30 min.Under the optimal experimental conditions,when the wax content was 0-250 mg/kg,the linear equation of the method wasY=0.078 7X-0.036 5,R2=0.999.The recovery of standard addition was 87.84%-110.42%,andRSDwas 1.13%-2.89%.The method had excellent feasibility and accuracy,and was easy for operators to analyze.It could be used for the routine monitoring of wax content in factory.

Keywords：rapeseed oil; turbidity instrument; wax content; rapid determination

蠟質是植物油中天然存在的成分，主要來源于籽殼和種皮，在提取過程中進入油脂中[1-2]。蠟質屬于一元脂肪酸和一元醇所形成的高分子酯類混合物，具有在油中溶解性差、不能被人體吸收、熔點較高等特點[3-5]。當油脂中含有一定量蠟質時，油脂在貯存過程中，會出現油脂“發(fā)朦”變渾，并伴隨出現油脂的透明度和消化吸收率下降的現象，使得油脂的外觀、氣味和適口性變差，從而影響產品的銷售、食用品質和營養(yǎng)價值[6-7]。

迄今，國內外針對植物油中蠟質含量測定的方法有很多，包括不溶物測定法[8-9]、濁度儀測定法[10]、色譜法[11-13]和光學測定法[14-15]。其中，不溶物測定法一般適用于蠟質含量較高的油脂，方法簡單快速，但不適用于低蠟質含量的油脂檢測。色譜法測定油脂中蠟質含量的精確度高，適合毛油、半成品油及成品油的檢測，但前處理復雜，對儀器設備要求高。光學測定法包括DSC差示掃描量熱法和顯微鏡測定法，這兩種方法都需要特定的儀器且操作復雜，且對于低蠟質含量的油樣無法檢測。濁度儀測定法根據植物油中的蠟質在低溫條件下會出現結晶引起油品的濁度變化的原理，通過利用濁度儀測定其濁度變化，帶入制定的蠟質與濁度標準曲線得到蠟質含量，其具有操作簡單方便、分析快速等特點。目前，一般菜籽油精煉工序包括脫膠、脫酸、脫色、脫臭等，但為了避免菜籽油在銷售過程中出現“發(fā)朦”現象，會在上述工序之后再增加快速脫蠟工序。然而，國內目前只對橄欖油中蠟質含量檢測制定了國標(GB/T 22501—2008)，其他植物油中蠟質檢測缺少統(tǒng)一規(guī)范的檢測方法。本文通過優(yōu)化菜籽油中蠟質含量檢測的部分參數，建立了濁度儀快速測定菜籽油中蠟質含量的方法，為油脂精煉生產中快速測定蠟質含量提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 原料與試劑

一級菜籽油(市售)、脫蠟一級菜籽油、未脫蠟一級菜籽油、菜籽毛油、脫蠟硅藻土餅：道道全糧油股份有限公司；丙酮、丁酮、石油醚均為分析純。

1.1.2 儀器與設備

Hach2100N濁度計；RE-52旋轉蒸發(fā)儀；HH-4 數顯恒溫水浴鍋；TD5A-WS離心機；SHZ-D(III)循環(huán)水式真空泵。

1.2 試驗方法

1.2.1 純蠟和基油的制備

將從脫蠟車間取得的脫蠟硅藻土餅，用石油醚浸泡過夜，然后過濾得到濾液。再將丁酮加入濾液中混勻，放置冰箱冷卻靜置24 h后，繼續(xù)過濾并用丁酮反復洗滌，洗至無色為止，即為純蠟。

取一定量的脫蠟一級菜籽油，在冰箱冷卻放置4 d，趁冷過濾，將得到的油視為不含蠟質的純油，即為配制標準樣品的基油。

1.2.2 標準曲線的繪制

取1.2.1中制備的純蠟1 g溶于1 kg的基油即得到1 000 mg/kg的標準樣品，然后分別稀釋成250、200、150、100、50 mg/kg的標準樣品。用濁度儀分別測其濁度值，以濁度值為縱坐標，蠟質含量為橫坐標繪制標準曲線。

1.2.3 樣品的測定

將樣品在水浴鍋(70～80.℃)中加熱，使油樣澄清，冷卻至室溫。取一定量的油樣注入含有一定量溶劑的比色瓶中，加滿至刻度線(30 mL)，充分混合，避免出現氣泡。然后，將比色瓶擦拭干凈，用Hach2100N濁度儀測其濁度值，計為NTU0。再將比色瓶放置冰水混合物(5.℃以下)中冷卻30 min，用濁度儀測其濁度值，計為NTU1，即其濁度值為NTU1減去NTU0。

1.2.4 數據處理

采用IBM SPSS 19軟件進行數據分析，兩組數據的顯著性差異采用t檢驗，多組數據間的顯著性差異采用SNK檢驗，顯著性水平為P<0.05。采用Excel 2010軟件繪制圖表。

2 結果與分析

2.1 不同因素對蠟質含量測定的影響

2.1.1 不同溶劑對蠟質含量測定的影響

分別以丙酮和丁酮作為溶劑，溶劑與油的體積比(溶劑比)為1∶1，在冰水混合物中冷卻30 min，考察不同溶劑對蠟質含量測定的影響，結果見圖1。

圖1 不同溶劑對蠟質含量測定的影響

由圖1可知，以丙酮作為溶劑所得標準曲線方程的斜率比丁酮作為溶劑所得標準曲線方程的斜率大，則丙酮法的靈敏度高于丁酮法。這是因為油和蠟質的結構不同，對溶劑的親和力也不同，尤其是在低溫條件下，兩者對溶劑親和力的差異更大。兩種溶劑對油和蠟質的溶解性不同，蠟質在丙酮中的溶解度小于在丁酮中的，利于蠟質從油中析出來[16]。同時，溶劑的存在，有助于降低體系的黏度，使蠟質易于結晶析出。從試驗結果來看，可以選擇丙酮作為溶劑。

2.1.2 不同溶劑比對蠟質含量測定的影響

取1.2.2中配制成的50 mg/kg油樣為樣品，以丙酮為溶劑，分別按溶劑比為2∶1、1∶1、1∶2及純油，在冰水混合物中冷卻30 min，考察不同溶劑比對蠟質含量測定的影響，結果見圖2。

由圖2可知，隨著溶劑的增加蠟質檢測結果呈先增大后減小的趨勢，在溶劑比達到1∶1時，所測得結果最接近真實值(50 mg/kg)。出現這一情況的原因是在油中添加丙酮能有效降低該體系的黏度，有利于蠟質的分散，從而加速晶體的生成，縮短試驗所需的時間。但當溶劑比達到2∶1時，出現蠟質含量檢測下降的趨勢，可能是由于丙酮添加量過量，使其溶解能力下降，影響蠟質析出。從試驗結果來看，當溶劑比達到1∶1時，已經能保證該體系中的蠟質完全析出。

注：圖中不同小寫字母表示P=0.05水平具有顯著性差異，下同。

圖2不同溶劑比對蠟質含量測定的影響

2.1.3 不同冷卻時間比對蠟質含量測定的影響

取1.2.2中配制成的50 mg/kg油樣為樣品，以丙酮為溶劑，按溶劑比為1∶1，分別在冰水混合物中冷卻5、10、20、30、40、50 min，考察不同冷卻時間對蠟質含量測定的影響，結果見圖3。

圖3 不同冷卻時間對蠟質含量測定的影響

由圖3可知，隨著冷卻時間的延長，菜籽油中蠟質含量逐漸增大再稍有減小，在30～40 min時所測得結果最接近真實值(50 mg/kg)。這可能是由于蠟質在低溫條件下析出，蠟晶體經過碰撞相互凝聚成較大的晶粒，密度增加而變成懸濁液，使菜籽油的濁度值增大。當晶體長大到一定程度時，隨冷卻時間的繼續(xù)延長，蠟晶體會從懸浮狀態(tài)沉降到底部，使?jié)岫戎迪陆?，因此蠟質含量檢測結果減小。從試驗結果來看，冷卻時間控制在30 min 時，已經能保證該體系中的蠟質完全析出。

2.2 方法評價

2.2.1 標準曲線的繪制

按照上述優(yōu)化的試驗條件，以丙酮為溶劑、溶劑比1∶1、冷卻時間30 min，以濁度值為縱坐標，蠟質含量為橫坐標進行標準曲線的繪制，結果見圖4。由圖4可知，當油樣中蠟質含量在0～250 mg/kg時，其線性關系良好。

圖4 蠟質含量的標準曲線

2.2.2 加標回收率的測定

為了進一步驗證本方法的可靠性，按上述研究所得的優(yōu)化條件和方法，對同一油樣分別添加高、中、低蠟質含量的樣品進行加標回收試驗，所得結果見表1。

表1 樣品加標回收率及RSD(n=3)

由表1可知，本方法的加標回收率為87.84%～110.42%，RSD為1.13%～2.89%，滿足方法學要求，具有較好的準確度和精確度。

2.2.3 實際樣品蠟質含量的檢測

按照本方法分別各取兩批菜籽毛油、未脫蠟一級菜籽油、脫蠟一級菜籽油、一級菜籽油(市售)進行蠟質含量測定，結果見表2。

表2 菜籽油蠟質含量檢測結果 mg/kg

由表2可知，本方法測得的菜籽毛油中蠟質含量偏低，分析可能是由于毛油中磷脂含量高，磷脂是天然抑晶劑，抑制了晶體的形成，使得檢測結果偏低。未脫蠟一級菜籽油1與未脫蠟一級菜籽油2檢測結果相差較大，可能是兩批菜籽油的來源不同導致的，不同地區(qū)和品種的菜籽油中蠟質含量存在差異。

2.2.4 樣品檢測的重現性

為了驗證該檢測方法的穩(wěn)定性，對脫蠟一級菜籽油油樣進行了跟蹤檢測，將油樣在室溫下放置45 d后，隨機抽取其中5個油樣進行重新檢測，與之前的檢測結果進行對比，結果見表3。

表3 不同時間蠟質含量檢測結果 mg/kg

由表3可知，其中兩次檢測結果相差最大的為0.76 mg/kg，表明兩次檢測結果穩(wěn)定，重現性較好，具有可行性。

3 結 論

以丙酮為溶劑、溶劑與油體積比(溶劑比)1∶1、冷卻時間30 min時，油樣中蠟質含量在0～250 mg/kg時，其線性方程為Y=0.078 7X-0.036 5，相關系數R2=0.999，線性關系良好。并通過加標回收試驗對本方法的準確度和可行性進行了驗證，其加標回收率為87.84%～110.42%，RSD為1.13%～2.89%，滿足方法學要求。建立了一種快速測定菜籽油中蠟質含量的方法，為油脂精煉生產中快速測定蠟質含量提供參考。

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Rapiddeterminationofwaxcontentinrapeseedoilbyturbidityinstrument

WAN Cong,ZOU Yandi,JIN Hu,LI Minli,ZHANG Qianyi,BAO Lilin,XIONG Weilin

(National R&D Center for Rapeseed Processing,Daodaoquan Grain & Oil Shares Co.,Ltd.,Yueyang 414000，Hunan，China)

TS225.1;TQ646

A

1003-7969(2017)09-0129-04

2016-12-20；

2017-04-15

國家“十三五”重點研發(fā)計劃(2016YFD0401401)

萬 聰(1991)，男，助理工程師，碩士，主要從事植物油脂加工技術和檢測研究工作(E-mail)wancong0202@163.com。

熊巍林，工程師(E-mail)2621127917@qq.com。