葉張章，吳敏，梁毓源

原發(fā)性高血壓患者膽紅素及氧化應(yīng)激水平與頸動脈粥樣硬化的關(guān)系

葉張章1，吳敏1，梁毓源1

目的探討原發(fā)性高血壓（EH）患者膽紅素及氧化應(yīng)激表達(dá)，及其與頸動脈粥樣硬化的關(guān)系。方法連續(xù)入選2015年3月～2016年12月于瓊海市人民醫(yī)院心血管內(nèi)科治療的EH患者187例，根據(jù)彩色多普勒超聲檢查頸動脈內(nèi)膜中層厚度（IMT）將患者分為EH患者（對照組，n=97）和EH合并動脈粥樣硬化患者（研究組，n=90）。檢測患者血清中膽紅素水平，包括總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）和間接膽紅素（IBIL）水平，另外檢測血清中氧化應(yīng)激水平，包括同型半胱氨酸（HCY）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）及氧化型低密度脂蛋白（OX-LDL）水平。對比分析兩組患者膽紅素水平及氧化應(yīng)激因子水平，同時分析不同動脈粥樣硬化程度患者的各檢測因子水平及相關(guān)性，另外分析各檢測因素的相關(guān)性。結(jié)果兩組患者年齡、性別構(gòu)成比、體質(zhì)指數(shù)（BMI）、病程等比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。與對照組相比，研究組患者TBIL、DBIL、IBIL、SOD和NO水平均明顯下降，而HCY、MDA及OX- LDL水平均顯著升高，且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）。隨著動脈粥樣硬化程度的升高，各組患者檢測因子水平之間的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），與內(nèi)膜增厚組相比，內(nèi)膜斑塊形成組和內(nèi)膜狹窄組患者的TBIL、DBIL、IBIL、SOD及NO水平明顯下降，而HCY、MDA及OX- LDL水平顯著升高；與內(nèi)膜斑塊形成組相比，內(nèi)膜狹窄組患者的TBIL、DBIL、IBIL、SOD及NO水平明顯下降，而HCY、MDA及OX- LDL水平顯著升高，且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，IMT值與TBIL、DBIL、IBIL、SOD和NO水平呈負(fù)相關(guān)，而HCY、MDA及OX- LDL水平呈正相關(guān)（P＜0.05）。同時，各檢測指標(biāo)存在密切的相關(guān)性，TBIL、DBIL、IBIL、SOD和NO水平與HCY、MDA及OX- LDL水平之間呈負(fù)相關(guān)，TBIL、DBIL、IBIL、SOD和NO水平之間呈正相關(guān)，HCY、MDA及OX- LDL水平之間呈正相關(guān)（P均＜0.05）。結(jié)論原發(fā)性高血壓患者合并動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展，與血清膽紅素水平及氧化應(yīng)激反應(yīng)密切相關(guān)，血清膽紅素水平與氧化應(yīng)激因子水平顯著相關(guān)。

原發(fā)性高血壓；膽紅素；氧化應(yīng)激；頸動脈粥樣硬化

原發(fā)性高血壓（EH）是由于血壓長期維持在高水平容易導(dǎo)致心室壁肥厚、心肌舒張功能下降及動脈粥樣硬化等，同時EH也會造成一系列心腦血管疾病，發(fā)病率高，給患者的生活質(zhì)量造成重要影響[1,2]。臨床上EH與動脈粥樣硬化聯(lián)系密切，兩者互為影響[3]。動脈粥樣硬化多是由高血壓及機(jī)體代謝紊亂所致[4]，血液中的脂質(zhì)逐漸在血管壁上沉積，形成斑塊和管腔狹窄等，危險因素包括血管內(nèi)皮組織的損傷及功能障礙，其嚴(yán)重程度與多種因素有關(guān)[5,6]。近來研究證實(shí)[5]，膽紅素（BIL）水平與EH患者動脈粥樣硬化的發(fā)生情況密切相關(guān)，低水平的膽紅素能夠?qū)е聞用}粥樣硬化的發(fā)生，膽紅素在體內(nèi)有較強(qiáng)的抗氧化能力，清除氧自由基，保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞，從而防止動脈粥樣硬化的發(fā)生。另外，動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展與氧化應(yīng)激密切相關(guān)，可以用于反應(yīng)機(jī)體的氧化應(yīng)激狀態(tài)[7]。國內(nèi)對于膽紅素和氧化應(yīng)激的研究較多[2,6,7]，但并未進(jìn)行深入研究，本研究通過觀察EH患者膽紅素和氧化應(yīng)激狀態(tài)與動脈粥樣硬化的關(guān)系，旨在為治療EH患者合并動脈粥樣硬化提供治療方案，現(xiàn)報告如下：

1 資料與方法

1.1 研究對象與分組連續(xù)入選2015年3月～2016

年12月于瓊海市人民醫(yī)院心血管內(nèi)科治療的EH患者187例，其中男性113例，女性74例，年齡50～68歲，平均（57.43±4.96）歲。所有患者的診斷均參考2010年中國高血壓指南診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]，納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡不低于50歲；②患者臨床資料完整且依從性高；③患者同意并簽訂知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①繼發(fā)性高血壓患者；②合并患有痛風(fēng)、肝膽疾病及腎功能衰竭患者；③合并患有血液系統(tǒng)及風(fēng)濕免疫系統(tǒng)疾病患者；④精神意識障礙患者。所有研究過程均符合我院醫(yī)學(xué)倫理委員會的相關(guān)規(guī)定。根據(jù)彩色多普勒超聲檢查頸動脈內(nèi)膜中層厚度（IMT）將患者分為對照組97例（≤0.9 mm），研究組90例（＞0.9 mm），其中對于研究組進(jìn)一步細(xì)分為內(nèi)膜增厚組（0.9 mm＜IMT≤1.2 mm）39例，內(nèi)膜斑塊形成組（1.2 mm≤IMT＜1.4 mm）38例和內(nèi)膜狹窄組（IMT≥1.4 mm）20例。

1.2 方法

1.2.1 治療方法所有患者入院后，根據(jù)患者的臨床癥狀采用對癥治療、一般治療和藥物治療等。對癥治療主要包括對基礎(chǔ)疾病的治療，改善基礎(chǔ)疾病導(dǎo)致的癥狀；一般治療：保證患者每日能量的攝入量等；藥物治療：利尿劑（雙氫克尿塞、安體舒通、呋塞米等）；血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（依那普利等）；正性肌力藥（地高辛）；β受體阻滯劑（美托洛爾等）；擴(kuò)血管藥物（硝酸酯類藥物）。

1.2.2 頸動脈IMT值檢測患者處于安靜狀態(tài)，在恒溫檢查室中，由同一位醫(yī)生進(jìn)行操作，采用飛利浦HD11彩色多普勒超聲檢查儀，探頭頻率設(shè)置為8～10 MHz，取患者仰臥位，伸展頸部，使得其充分暴露，頭部向檢查對側(cè)偏向，從頸動脈開始，沿著血管走向縱向檢查及橫切面檢查，對頻譜特征進(jìn)行分析。

1.2.3 膽紅素水平檢測所有患者均于入院24 h內(nèi)空腹抽取靜脈血4 ml，置于未涂有肝素鈉的采血管中，以4000 r/min速度離心10 min，分離上清液，即得血清。取一部分血清采用礬酸氧化法檢測血清中總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）、間接膽紅素（IBIL）的水平。

1.2.4 血清氧化應(yīng)激因子檢測使用羅氏C8000全自動生化分析儀，采用循環(huán)酶法檢測血清中同型半胱氨酸（HCY）的水平，采用比色法檢測血清中超氧化物歧化酶（SOD）的水平，采用TBA法檢測血清中丙二醛（MDA）的水平。另外分別應(yīng)用硝酸還原酶法和酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血清中一氧化氮（NO）和氧化型低密度脂蛋白（OXLDL）的水平，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，多組間差異比較采用單因素方差分析；計數(shù)資料采用例數(shù)（構(gòu)成比）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；各檢測因子與動脈硬化程度的關(guān)系和各檢測因子水平的關(guān)系分別采用Spearman和Pearson相關(guān)性分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料比較兩組患者年齡、性別構(gòu)成比例、體質(zhì)指數(shù)（BMI）、病程比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05），表1。

2.2 兩組患者BIL水平及氧化應(yīng)激水平的比較與對照組相比，研究組患者TBIL、DBIL、IBIL、SOD和NO水平均明顯下降，而HCY、MDA及OXLDL水平均顯著升高，且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05），表2。

表1 兩組患者一般臨床資料的比較

表2 兩組患者BIL水平及氧化應(yīng)激水平的比較（±s）

表2 兩組患者BIL水平及氧化應(yīng)激水平的比較（±s）

注：BIL：膽紅素；TBIL：總膽紅素；DBIL：直接膽紅素；IBIL：間接膽紅素；HCY：同型半胱氨酸；SOD：超氧化物歧化酶；MDA：丙二醛；NO：一氧化氮；OX- LDL：氧化型低密度脂蛋白

指標(biāo) 對照組（n=97例）研究組（n=90例）t值 P值BIL（μmol/L） - - - -TBIL 13.15±3.26 11.07±2.87 -4.616 ＜0.001 DBIL 4.71±1.15 4.23±1.06 -2.9610.003 IBIL 8.63±2.21 7.03±2.16 -5.001 ＜0.001 HCY（mmol/L） 10.83±3.02 15.24±3.86 8.735 ＜0.001 SOD（U/mL） 128.14±25.0796.35±20.22-9.499 ＜0.001 MDA（nmol/L） 4.69±1.05 9.28±2.31 17.701 ＜0.001 NO（μmol/L） 84.21±23.36 60.35±10.87-8.841 ＜0.001 OX- LDL（μg/dL） 30.14±6.25 49.18±9.12 16.755 ＜0.001

2.3 不同動脈粥樣硬化程度組間BIL水平及氧化應(yīng)激水平的比較隨著動脈粥樣硬化程度的升高，三組患者各檢測因子水平之間的差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與內(nèi)膜增厚組相比，內(nèi)膜斑塊形成組和內(nèi)膜狹窄組患者的TBIL、DBIL、IBIL、SOD及NO水平明顯下降，而HCY、MDA及OX- LDL水平顯著升高；與內(nèi)膜斑塊形成組相比，內(nèi)膜狹窄組患者的TBIL、DBIL、IBIL、SOD及NO水平明顯下降，而HCY、MDA及OX- LDL水平顯著升高，且差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05），表3。

2.4 BIL水平及氧化應(yīng)激水平與IMT值的相關(guān)性應(yīng)用Spearman相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，187例患者IMT值與TBIL、DBIL、IBIL、SOD和NO水平呈負(fù)相關(guān)，而HCY、MDA及OX- LDL水平呈正相關(guān)（P均＜0.05），表4。

2.5 分析各檢測因子水平之間的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果表明，各檢測指標(biāo)存在密切的相關(guān)性，TBIL、DBIL、IBIL、SOD和NO水平與HCY、MDA及OX- LDL水平之間呈負(fù)相關(guān)，TBIL、DBIL、IBIL、SOD和NO水平之間呈正相關(guān)，HCY、MDA及OX- LDL水平之間呈正相關(guān)（P均＜0.05），表5。

3 討論

表3 不同動脈粥樣硬化程度組間BIL水平及氧化應(yīng)激水平的比較

表4 BIL水平及氧化應(yīng)激水平與IMT值的相關(guān)性

近年來，隨著我國人民飲食結(jié)構(gòu)的變化，心血管疾病的發(fā)病率和病死率逐年升高，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，對于心血管疾病的發(fā)展進(jìn)行了深入研究[9]。EH是啟動動脈粥樣硬化的因素之一，而頸動脈IMT可作為頸動脈粥樣硬化的早期表現(xiàn)[10]。高血壓患者的搏動性血流速度加快，血管出現(xiàn)痙攣而發(fā)生缺血缺氧，從而加重對血管內(nèi)皮組織的損傷，最終加速動脈粥樣硬化的發(fā)展[11]。動脈粥樣硬化是導(dǎo)致心腦血管疾病發(fā)生的病理基礎(chǔ)，對于機(jī)體全身的動脈系統(tǒng)產(chǎn)生影響，從而導(dǎo)致出現(xiàn)心腦血管疾病，同時頸動脈最易出現(xiàn)動脈粥樣硬化，其特征表現(xiàn)為頸動脈粥樣硬化斑塊的形成。由于頸動脈的位置特點(diǎn)有利于超聲檢查，從而對動脈粥樣硬化進(jìn)行評價[12,13]，動脈粥樣硬化的發(fā)展變化會加速動脈血管彈性下降，加重EH，形成惡性循環(huán)[11]，因此盡早防治動脈粥樣硬化對于降低EH患者發(fā)生心血管事件的發(fā)生具有重要意義。經(jīng)過單因素和多因素分析發(fā)現(xiàn)，BIL與動脈病變之間存在負(fù)相關(guān)，血清BIL水平每降低50%，動脈發(fā)生病變的幾率升高47%，高血糖和高血脂作為影響EH的獨(dú)立危險因素，國內(nèi)的研究較多，但血清中膽紅素水平與心血管疾病的聯(lián)系并未進(jìn)行深入研究[5]。另外氧化應(yīng)激也是導(dǎo)致動脈粥樣硬化形成的重要因素之一，參與斑塊的形成、發(fā)展和破裂全過程[14]。

表5 分析各檢測因子水平之間的相關(guān)性

BIL是由肝微粒體氧化酶分解亞鐵血紅素形成的終產(chǎn)物，同時根據(jù)與血紅蛋白的結(jié)合狀態(tài)又可以分為DBIL和IBIL，BIL來源于過氧化氫酶、細(xì)胞色素及肌紅蛋白等含葉琳的化合物分解得到的，正常機(jī)體每日大約產(chǎn)生300 mg的BIL，其抗氧化的作用是維生素E的20倍，能夠避免氧自由基的損傷作用。BIL不僅是一種四吡咯色素，而且作為一種具有抗氧化性的內(nèi)源性生物還原劑，經(jīng)過代謝后與血清蛋白結(jié)合在一起，輔以肝膽紅素葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶的作用，形成酯化BIL[5]。BIL能夠有效清除氧自由基，降低氧自由基對于血管內(nèi)皮造成的損傷，從而保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞，延緩動脈粥樣硬化的過程[15]。另外可提高膽固醇的溶解性，使其從膽汁中排泄，最近BIL越來越受到人們的關(guān)注，等摩爾濃度的BIL能夠有效抑制低密度脂蛋白被氧化的程度[12]。本研究中研究組患者血清中TBIL、DBIL和IBIL水平均明顯低于對照組（P＜0.05），同時隨著動脈粥樣硬化程度的升高，三組患者的BIL水平明顯降低（P＜0.05），同時IMT值與TBIL、DBIL和IBIL水平呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），另外，三種BIL類型之間存在正相關(guān)（P＜0.05），結(jié)果表明BIL對于EH患者合并出現(xiàn)動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展具有重要意義。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的原因分析如下[5,10,12]，BIL作為抗氧化劑，降低通過氧自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)損害，發(fā)揮保護(hù)因子的功效，加速膽固醇經(jīng)過膽汁排泄的速度；同時BIL可能通過影響抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而發(fā)揮抵抗動脈粥樣硬化的作用；另外BIL還可以下調(diào)人體纖維細(xì)胞內(nèi)蛋白激酶的活性，從而影響導(dǎo)致血管壁發(fā)生動脈粥樣硬化的進(jìn)程。

氧化應(yīng)激的失衡對于EH患者發(fā)生動脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展同樣具有重要意義，其中多種因子能夠表明機(jī)體的氧化應(yīng)激狀態(tài)[6]。研究中對氧化應(yīng)激相關(guān)因子水平進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，研究組患者SOD和NO水平均明顯下降（P＜0.05），而HCY、MDA及OX- LDL均顯著升高（P＜0.05），同時在對不同嚴(yán)重程度動脈粥樣硬化患者分析過程中，結(jié)果表明，隨著動脈粥樣硬化程度的升高，三組患者血清中各氧化應(yīng)激因子水平之間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），在相關(guān)性分析結(jié)果中，IMT值與SOD和NO水平呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），而HCY、MDA及OX- LDL水平呈正相關(guān)（P＜0.05），并且各種氧化應(yīng)激因子之間存在相關(guān)性，這些結(jié)果都表明氧化應(yīng)激反應(yīng)在EH患者合并發(fā)生動脈粥樣硬化的過程中具有重要作用。這主要是研究中選擇的氧化應(yīng)激反應(yīng)中的各個因子水平的升高或下降均會打破氧化應(yīng)激反應(yīng)的平衡狀態(tài)，加重血管內(nèi)皮組織的損傷，加速膽固醇的聚集速度，同時在炎癥因子的協(xié)同作用下，共同參與動脈粥樣硬化的形成與發(fā)展[16,17]。在對各檢測因子進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析中，各檢測因子之間均存在相關(guān)性，但是具體的原因尚未明確，需要進(jìn)一步的研究。

綜上所述，EH患者合并動脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展與BIL和氧化應(yīng)激水平存在密切聯(lián)系，而且可以用于動脈粥樣硬化惡化程度的診斷，為臨床上診斷、預(yù)防和治療EH合并動脈粥樣硬化提供理論基礎(chǔ)。

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本文編輯：楊新穎，姚雪莉

The relationship among bilirubin, oxidative stress of patients with essential hypertension and carotid artery atherosclerosi

Ye Zhangzhang*, Wu Min, Liang Yuyuan.

*Department of Cardiovascular Medicine,Qionghai People's Hospital, Qionghai 571400, China.

ObjectiveTo explore the expression of bilirubin and oxidative stress of patients with essential hypertension (EH) and its relationship with carotid atherosclerosis. Method According to the color doppler ultrasound carotid intima-media thickness (IMT), 187 patients with EH from March 2015 to December 2016 were divided into control group (patients with EH, n=97) and research group (patients with EH merger with atherosclerosis, n=90). The levels of oxidative stress in serum were measured, including total bilirubin (TBIL), direct bilirubin (DBIL) and indirect bilirubin (IBIL). In addition, the levels of homocysteine (HCY), superoxide dismutase(SOD), malondialdehyde (MDA), nitric oxide (NO) and oxidized low density lipoprotein (OX-LDL) in serum were measured. The levels of BIL and oxidative stress factors of two groups of patients were compared, at the same time,the levels and relevance of the degree of atherosclerosis and various detection factors were analyzed. Additionally,the correlation among detection factors were analyzed.ResultsThe levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD and NO of patients in research group were significantly lower than those in control group, while levels of HCY, MDA and OXLDL were significantly higher than those in control group, and the differences were statistically significant (P＜0.05).With the increase of the degree of atherosclerosis, the differences of levels of detection factors were statistically significant (P＜0.05). The levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD and NO in intimal plaque formation group and narrow group were lower than those in intimal thickening group (P＜0.05). The levels of HCY, MDA and OX-LDL were significantly higher than those in intimal thickening group (P＜0.05). The levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD and NO in narrow group were significantly higher than those in intimal plaque formation group, while the levels of HCY,MDA and OX-LDL were significantly higher than those in lining plaque formation group, and the differences werestatistically significant (P＜0.05). IMT value was negatively correlated with and the levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD and NO (P＜0.05), positively correlated with the levels of HCY, MDA and OX-LDL (P＜0.05). There were negative correlations among the levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD, NO, HCY, MDA and OX-LDL (P＜0.05); There were positive correlations among the levels of TBIL, DBIL, IBIL, SOD and NO (P＜0.05); There were positive correlations among the levels of HCY, MDA and OX-LDL (P＜0.05).Conclusions The occurrence and development of EH patients combined with atherosclerosis is closely related to the level of BIL and oxidative stress. The level of serum BIL is significantly related to the levels of oxidative stress factors.

Essential hypertension; Bilirubin; Oxidative stress; Carotid artery atherosclerosis

R544.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】1674-4055(2017)09-1040-05

海南省2014年度普通醫(yī)學(xué)科研項(xiàng)目(14A210213)

1571400 瓊海,瓊海市人民醫(yī)院心血管內(nèi)科

10.3969/j.issn.1674-4055.2017.09.05