姜超,于肖夏,于卓*,高喆,張明飛,楊東升,石悅
(1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010000;2.內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010000)
彩色馬鈴薯新品系花青素組分和含量的液質(zhì)聯(lián)用分析
姜超1,于肖夏1,于卓1*,高喆2,張明飛1,楊東升1,石悅1
(1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010000;2.內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010000)
為明確彩色馬鈴薯新品系蒙彩-01和蒙彩-02的塊莖花青素組分和含量的差異,對(duì)其新品種育成及花青素開發(fā)應(yīng)用提供依據(jù),以彩色馬鈴薯品種紅美作對(duì)照,利用高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),進(jìn)行了塊莖花青素組分的定性和定量分析。結(jié)果表明:1) 對(duì)照品種紅美的塊莖花青素總含量為169.88 mg/100 g FW,共含4種花青素組分,即天竺葵素-3-蕓香糖苷、矢車菊素-3-香豆酰-葡萄糖苷、天竺葵素-3-阿魏酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷和天竺葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷,其中天竺葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷和矢車菊素-3-香豆酰-葡萄糖苷含量較高,分別占總花青素含量的48.95%和39.97%。2) 新品系蒙彩-01的塊莖花青素總含量為1051.65 mg/100 g FW,共含4種花青素組分,即矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖苷、矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷、矮牽牛素-3-阿魏酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷和錦葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷。其中,矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷占總含量的79.14%,為主要組分。3) 新品系蒙彩-02的塊莖花青素總含量為159.41 mg/100 g FW,共含5種花青素組分,分別為矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖苷、矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖基--5-葡萄糖苷、矮牽牛素-3-阿魏酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷、芍藥素-3-咖啡酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷和芍藥素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷,其中矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷含量最高(54.08%),芍藥素-3-咖啡酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷次之(24.06%)。綜上,2個(gè)彩色馬鈴薯新品系塊莖花青素組分和含量與對(duì)照品種紅美有明顯差別。
彩色馬鈴薯;新品系;花青素;組分;含量;液質(zhì)聯(lián)用分析
花青素是一類天然水溶性色素,是目前世界上發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)效的自由基清除劑,具有很好的抗氧化功能和藥用價(jià)值。目前已知的花青素有20多種,常見的有6種:天竺葵色素、矢車菊色素、芍藥色素、飛燕草色素、矮牽牛色素和錦葵色素[1]。自然狀態(tài)下游離的花青素很少見,其多與糖基結(jié)合形成花色苷,廣泛存在于植物器官的細(xì)胞液中,使植物呈現(xiàn)繽紛色彩[2]。前人研究發(fā)現(xiàn),天竺葵素表現(xiàn)為磚紅色,矢車菊素及芍藥素則表現(xiàn)為紫紅色,而飛燕草素、矮牽牛素和錦葵色素則呈現(xiàn)藍(lán)紫色系[3]。
彩色馬鈴薯(Solanumtuberosum)中含有豐富的花青素,因其適應(yīng)性強(qiáng)、生產(chǎn)成本低、栽培范圍廣、生育期短等特點(diǎn),近年來成為重要的天然色素和抗氧化劑來源之一[4]。關(guān)于彩色馬鈴薯花青素組分國外已有一些研究報(bào)道,但國內(nèi)研究甚少。不同顏色彩色馬鈴薯塊莖花青素組分有一定差異,相同顏色不同基因型的彩色馬鈴薯塊莖花青素組分也有差異。Rodriguez-Saona等[6]在紅色馬鈴薯中發(fā)現(xiàn)了5種以天竺葵素為苷元的花青素。Lewis等[7]發(fā)現(xiàn)紅色馬鈴薯含有大量的天竺葵色素和少量的芍藥色素,而紫色馬鈴薯中則主要含有矮牽牛素和錦葵色素。Fossen[8]在紫色馬鈴薯中發(fā)現(xiàn)了3種矮牽牛素花青素和1種芍藥素花青素。楊智勇等[9]在紫色馬鈴薯“黑金剛”檢測(cè)出4種矮牽牛素花青素、2種芍藥色素衍生物和1種飛燕草素衍生物。彩色馬鈴薯的抗氧化活性強(qiáng)弱與花青素的含量高低呈正相關(guān),約為普通馬鈴薯的3~5倍。
液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS)是20世紀(jì)90年代發(fā)展起來的一門綜合性分析技術(shù),HPLC的高分離效能與MS的高靈敏度、高選擇性使之成為化合物未知組分研究中強(qiáng)有力的工具。大氣壓化學(xué)電離(Atmospheric Pressure Chemical Ionisation,API)、電噴霧電離(Electrospray Ionisation,ESI)、基質(zhì)輔助激光解吸電離(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization,MALDI)、熱噴霧電離(Thermal Spray,TSP)和快速原子轟擊電離(Fast Atom Bombardment,F(xiàn)AB)等離子化方式以及各種多級(jí)質(zhì)譜技術(shù)的出現(xiàn),使該項(xiàng)技術(shù)日益成熟[10]。高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)具有靈敏度高、快速檢出的特點(diǎn),克服了HPLC法缺少標(biāo)準(zhǔn)品的缺陷,顯著提高了花青素組分鑒定的準(zhǔn)確性,是花青素定性和定量分析的先進(jìn)手段。
本試驗(yàn)用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù),以彩色馬鈴薯品種紅美(Hongmei)為對(duì)照,對(duì)課題組育成的2個(gè)彩色馬鈴薯新品系蒙彩-01(Mengcai-01)和蒙彩-02(Mengcai-02)的塊莖花青素組分及其含量進(jìn)行了分析,旨在明確不同材料花青素組分和含量的差異,為彩色馬鈴薯新品種選育及其花青素的開發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)。
圖1 供試材料塊莖薯皮薯肉特征Fig.1 Tuber shin and flesh characteristic of tested materialsA: 蒙彩-01 Mengcai-01; B: 蒙彩-02 Mengcai-02; C: 紅美Hongmei.
供試材料為課題組從“MIN-021×黑美人”雜交組合中選育出的彩色馬鈴薯優(yōu)異新品系蒙彩-01(Mengcai-01)和從“紅彩×黑美人”雜交組合中選育出的優(yōu)異新品系蒙彩-02(Mengcai-02),對(duì)照材料為彩色馬鈴薯品種紅美(Hongmei)。蒙彩-01塊莖為紫皮、黑紫肉,蒙彩-02塊莖為灰紫皮、紫色薯肉,由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院馬鈴薯育種研究中心提供;品種紅美塊莖薯皮薯肉均為紅色,由內(nèi)蒙古馬鈴薯繁育中心李文剛研究員提供(圖1)。各材料種植于呼和浩特市賽罕區(qū)內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)場(chǎng),土壤為沙壤土,肥力中等,有灌溉條件,在各材料塊莖成熟后,分析花青素組分和含量。試驗(yàn)于2016年5月至10月在田間和室內(nèi)進(jìn)行。
1.2方法
1.2.1彩色馬鈴薯花青素的提取 將供試馬鈴薯材料的塊莖用清水洗凈、晾干,切成小塊,在研缽內(nèi)搗碎、研磨均勻。每種材料各取8 g放入用錫箔紙包裹避光的錐形瓶中作為提取物,加15 mL提取液(98 mL甲醇+2 mL甲酸),常溫下100 W超聲波處理30 min,5000 r/min離心5 min,吸取上清液,重復(fù)3次,合并3次離心后的上清液,用濾紙過濾除去蛋白質(zhì)、不溶物,以及多糖,再經(jīng)0.22 μm微孔濾膜過濾,置4 ℃冰箱中備用。
1.2.2花青素組分的定性分析 用WATERS ACQUITY UPLC I-CLASS/SYNAPT G2-SI液質(zhì)聯(lián)用儀對(duì)塊莖花青素組分進(jìn)行分析。質(zhì)譜條件:正離子模式全掃描和自動(dòng)二級(jí)離子掃描;掃描范圍(m/z)100~900 u;以氮?dú)庾鳛楦稍餁夂蛧婌F氣,干燥氣溫度350 ℃,氮?dú)饬魉?1.0 L/min,霧化氣壓35 psi;離子化方式為ESI+;所用的電離電壓為+4000 V,毛細(xì)管出口電壓106.0 V,八級(jí)射頻電壓振幅171 Vpp,skim電壓40.0 V。
1.2.3花青素組分的含量分析 采用Waters1525高效液相色譜儀(泵Waters1525、檢測(cè)器Waters 2998、自動(dòng)進(jìn)樣器2707)進(jìn)行塊莖花青素組分的定量分析。色譜條件:色譜分析柱為TSK gel ODS-80 Ts QA(150.0 mm×4.9 mm,7 μm,Tosoh,Japan),保護(hù)柱C18柱(10.0 mm×4.9 mm,7 μm,Kromasil,Sweden);流動(dòng)相A為10%含0.1%三氯乙酸的甲酸-水溶液,流動(dòng)相B為15%甲醇-乙腈溶液,梯度洗脫條件見表1;流速1 mL/min,柱溫30 ℃,檢測(cè)波長(zhǎng)525 nm,進(jìn)樣體積20 μL。
表1 梯度洗脫條件Table 1 The gradient elution program
1.2.4花青素組分定量分析的標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 標(biāo)準(zhǔn)品為矢車菊素-3-葡萄糖苷(Cyanidin-3-glucoside,Cy3G)。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),測(cè)得峰面積為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:Y=92973X-20288,r=0.9995。其中,Y為色譜峰面積,X為矢車菊-3-葡萄糖苷的質(zhì)量濃度,r為相關(guān)系數(shù)(>0.999),即花青素質(zhì)量濃度與峰面積的線性關(guān)系緊密。將供試樣品中測(cè)得花青素成分峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,計(jì)算各材料塊莖花青素總含量及各組分含量,花青素含量用mg/100 g FW表示。試驗(yàn)重復(fù)3次。
施工前,提前1 h配制10 m3暫堵膠塞液體;施工時(shí),先向油管內(nèi)注入16 m3清水,適當(dāng)平衡地層壓力,然后注入5 m3暫堵膠塞液體,并用5 m3清水將暫堵膠塞頂替至目的位,關(guān)井等待成膠;4 h后油壓由59 MPa降至29 MPa,暫堵壓井成功。后續(xù)采用不丟手帶壓更換主控閥技術(shù)完成了異徑法蘭和閥門更換后,向油管注入12 m3解堵液;解堵液與頂替液存在濃度差,使得解堵液逐漸與膠塞接觸,破膠、解堵,4 h后油壓逐漸恢復(fù),氣井恢復(fù)產(chǎn)能,暫堵壓井獲得成功。
1.3統(tǒng)計(jì)分析
用統(tǒng)計(jì)軟件Excel和SPSS進(jìn)行分析。
2.1彩色馬鈴薯塊莖花青素組分定性分析
圖2 供試馬鈴薯材料塊莖花青素HPLC色譜圖(525 nm)Fig.2 The HPLC extracted chromatogram at 525 nm of tested colored potato tuber A:紅美 Hongmei; B:蒙彩-01 Mengcai-01; C:蒙彩-02 Mengcai-02.
表2 彩色馬鈴薯塊莖花青素質(zhì)譜參數(shù)及推斷結(jié)構(gòu)Table 2 Mass spectrum data and tentative structures of anthocyanin detected in colored potato tuber
利用HPLC-MS方法對(duì)供試材料塊莖花青素組分鑒定結(jié)果見圖2和表2。3個(gè)彩色馬鈴薯材料共分離出10個(gè)有效峰,按保留時(shí)間順序命名為P1~P10,分別代表10個(gè)組分。對(duì)照品種紅美含P1、P3、P4和P10共4個(gè)組分;新品系蒙彩-01含P2、P5、P6和P8共4個(gè)組分,蒙彩-02含組分P2、P5、P6、P7和P9共5個(gè)組分。其中,組分P2、P5、P6為2個(gè)新品系的共有組分。
對(duì)色譜圖中的有效峰進(jìn)行質(zhì)譜分析得到含有不同質(zhì)荷比的準(zhǔn)分子離子峰及二級(jí)碎片離子,根據(jù)正離子模式下色譜峰的一級(jí)質(zhì)譜的分子離子和二級(jí)質(zhì)譜離子碎片,獲得化合物的準(zhǔn)確分子量信息,分析每個(gè)譜峰,確定其分子量,并與文獻(xiàn)報(bào)道的組分相比較,推測(cè)出色譜峰的花青素組分。
組分P1:準(zhǔn)分子離子峰的質(zhì)荷比為[M]+=m/z579,子離子碎片質(zhì)荷比為MS/MS=m/z271,與天竺葵素苷元相符,中性丟失質(zhì)量308 Da,308為蕓香糖苷受到攻擊裂解成葡萄糖基(162)和鼠李糖基(146)而形成的中性碎片,據(jù)此推測(cè)組分P1的為天竺葵素-3-蕓香糖苷[11]。
組分P2:準(zhǔn)分子離子峰的質(zhì)荷比為[M]+=m/z771,子離子碎片質(zhì)荷比為MS/MS=m/z317,為矮牽牛素衍生物,中性丟失質(zhì)量454 Da,結(jié)合參考文獻(xiàn)分析[12],454基團(tuán)由1分子脫水香豆酸(146)和1分子脫水蕓香糖(308)組成,因二糖基團(tuán)被?;?,質(zhì)譜條件下容易從苷元上完整脫落,獲得單一的產(chǎn)物離子碎片,據(jù)此推測(cè)組分P2為矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖苷。
組分P3:準(zhǔn)分子離子峰為[M]+=m/z595,二級(jí)碎片離子為m/z449和m/z287。m/z287對(duì)應(yīng)矢車菊素苷元,而m/z449對(duì)應(yīng)于矢車菊素單己糖苷(m/z=449=287+162,162是己糖參與糖苷化脫去1分子水后的質(zhì)荷比),常見的己糖包括葡萄糖和半乳糖,結(jié)合相關(guān)參考文獻(xiàn)分析[6],彩色馬鈴薯的花色苷成分中,己糖基團(tuán)通常為葡萄糖,碎片離子m/z449來源于花色苷分子丟失質(zhì)量146 Da所得(m/z=449=595-146),146可能是五碳糖或是香豆酸的中性碎片,由于馬鈴薯花色苷至今未發(fā)現(xiàn)含有五碳糖基,而馬鈴薯花色苷常?;愣顾?,由此判斷失去的146是1分子脫水香豆酸,因此推測(cè)組分P3為矢車菊素-3-香豆酰-葡萄糖苷[14]。
組分P4:準(zhǔn)分子離子峰[M]+=m/z917,二級(jí)碎片離子為m/z755、m/z433和m/z271,天竺葵素被1分子脫水葡萄糖取代得碎片離子m/z433(m/z=433=271+162),而m/z755則源于花色苷分子失去1分子脫水葡萄糖(m/z=755=917-162),且為天竺葵素經(jīng)質(zhì)荷比484的基團(tuán)取代所得(m/z=755=271+484),結(jié)合參考文獻(xiàn)分析[15],m/z484由1分子脫水蕓香糖基(308)和1分子脫水阿魏酸(176)作為?;鶊F(tuán),故推測(cè)組分P4為天竺葵素-3-阿魏酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷。
組分P5:準(zhǔn)分子離子峰[M]+=m/z933,二級(jí)碎片離子為m/z771、m/z479和m/z317(圖3)。碎片離子m/z479對(duì)應(yīng)矮牽牛素單葡萄糖苷(m/z=479=317+162),而m/z771則對(duì)應(yīng)于花色苷分子失去1分子脫水葡萄糖(m/z=771=933-162),也是矮牽牛素被m/z454基團(tuán)取代所得(m/z=771=317+454),與組分P2類似,m/z454基團(tuán)由1個(gè)香豆酸(146)和1個(gè)蕓香糖基(308)組成,因此推斷組分P5為矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷[16]。
組分P6:[M]+=m/z963,二級(jí)碎片離子為m/z801、m/z479和m/z317,為矮牽牛素苷元,質(zhì)譜碎裂方式與組分P4相似,推測(cè)為矮牽牛素-3-阿魏酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷[18]。
組分P7:準(zhǔn)分子離子峰[M]+=m/z933,二級(jí)碎片離子為m/z771、m/z463和m/z301。m/z463為芍藥素單葡萄糖苷(m/z=463=301+162),m/z771為花色苷分子失去1分子脫水葡萄糖m/z=771=933-162),且為芍藥素被m/z470基團(tuán)取代所得(m/z=771=301+470),m/z470基團(tuán)由1個(gè)咖啡酸(162)和1個(gè)蕓香糖基(308)組成,故推測(cè)該組分為芍藥素-3-咖啡酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷[19]。
組分P8~P10:組分P8質(zhì)譜數(shù)據(jù)為m/z947/785/493/331(圖3),為錦葵素衍生物;組分P9的質(zhì)譜數(shù)據(jù)為m/z917/755/463和/301,為芍藥素苷元;組分P10的質(zhì)譜數(shù)據(jù)為m/z887/725/433/271(圖3),為天竺葵素苷元。這3個(gè)組分質(zhì)譜碎裂形式均與組分P5相似,據(jù)此分別指認(rèn)為錦葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷[20]、芍藥素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷和天竺葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷[15]。
2.2彩色馬鈴薯塊莖花青素組分定量分析
依據(jù)花青素組分定量分析的標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)供試彩色馬鈴薯塊莖的花青素組分含量進(jìn)行計(jì)算,結(jié)果如表3所示。新品系蒙彩-01的總花青素含量高達(dá)1051.65 mg/100 g FW,新品系蒙彩-02總花青素含量為159.41 mg/100 g FW,對(duì)照品種紅美的總花青素含量為169.88 mg/100 g FW,蒙彩-01、蒙彩-02與對(duì)照品種紅美間差異極顯著(P<0.01)。
新品系蒙彩-01和蒙彩-02共有的3種組分為矮牽牛素衍生物,其相對(duì)含量最高的組分均為矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷(P5),分別占其總花青素含量的79.14%(832.26 mg/100 g FW)和54.08%(86.21 mg/100 g FW)。此外,蒙彩-01含有1種錦葵素衍生物,即錦葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷(P8),含量為142.53 mg/100 g FW,占總含量的13.55%;蒙彩-02中含有2種芍藥素衍生物,即芍藥素-3-咖啡酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷(P7)和芍藥素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷(P9),其中芍藥素-3-咖啡酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷的含量為38.35 mg/100 g FW,占24.06%。
圖3 部分彩色馬鈴薯花色苷結(jié)構(gòu)及ESI正離子質(zhì)譜圖Fig.3 Structures and MS spectra of anthocyanin extracted from the colored potato P5: 組分5 Component 5; P8:組分8 Component 8; P10:組分10 Component 10.
對(duì)照品種紅美含有3種天竺葵素衍生物和1種矢車菊素衍生物。這4個(gè)花青素組分中,天竺葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷(P10)的含量最高,為83.16 mg/100 g FW,占花青素總量的48.95%;矢車菊素-3-香豆酰-葡萄糖苷(P3)次之,為67.91 mg/100 g FW,占39.97%。
相關(guān)研究表明,顏色不同的彩色馬鈴薯塊莖花青素組分有一定差異,薯肉顏色呈紅色的馬鈴薯富含?;祗每仡惡蜕炙幩仡惢ㄇ嘬?,而紫色馬鈴薯則含有酰基化的牽?;ㄋ亍w燕草素、錦葵素、芍藥素的混合組分[21]。
表3 供試彩色馬鈴薯塊莖花青素組分含量Table 3 The anthocyanin content of tested colored potato tuber
注:不同小寫字母表示P<0.05水平差異顯著,不同大寫字母表示P<0.01水平差異極顯著。
Note: The different lowercase letters show significant difference atP<0.05, and the different capital letters show significant difference atP<0.01.
本試驗(yàn)以本課題組育成的黑紫色和淺紫色薯肉的馬鈴薯品系蒙彩-01和蒙彩-02為材料,并以紅色薯肉的馬鈴薯品種紅美作對(duì)照,經(jīng)液質(zhì)聯(lián)用分析發(fā)現(xiàn),蒙彩-01和蒙彩-02均含有3種矮牽牛衍生物,其中矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷組分含量最高,分別占各自總花青素含量的79.14%和54.08%,該組分在蒙彩-01中的含量為蒙彩-02中的9.7倍,這可能是二者塊莖薯肉分別呈現(xiàn)深黑紫色和淺紫色的原因所在。另外,新品系蒙彩-01還含有錦葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷(13.55%),但未檢測(cè)出飛燕草素和芍藥素這2種花青素衍生物;蒙彩-02中僅含有2種芍藥素衍生物,其占總花青素含量的29.83%,未發(fā)現(xiàn)有飛燕草素和錦葵素衍生物。這表明不同苷元的花青素組分也可能是導(dǎo)致2個(gè)紫色馬鈴薯品系薯肉顏色深淺不同的原因之一,此點(diǎn)有待深入研究。對(duì)照品種紅美(紅色薯肉)塊莖花青素中檢測(cè)出3種天竺葵素衍生物組分,占總花青素含量的60.03%,其中以天竺葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷含量最高,占總含量的48.95%,表明它是決定塊莖薯肉呈紅色的主要色素組分之一,這與Lewis等[14]和胡艷梅等[27]的研究結(jié)果基本一致;此外,品種紅美塊莖花青素中還檢測(cè)出含量較高的矢車菊素-3-香豆酰-葡萄糖苷,其占總花青素含量的39.97%,表明該組分也是決定塊莖薯肉呈紅色的重要組分。
自然界花青素的穩(wěn)定性與花色苷組成有關(guān),一般認(rèn)為所含花色苷種類越多,穩(wěn)定性越強(qiáng),而?;问降幕ㄉ胀葐渭兲腔〈绞秸純?yōu)勢(shì)[28]。本研究中,3個(gè)彩色馬鈴薯材料所含的花色苷種類主要為酰化雙糖基取代的形式,結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定。與藍(lán)莓、紫色甘藍(lán)和葡萄等天然色素資源相比較[29],彩色馬鈴薯種植較為簡(jiǎn)單,且產(chǎn)量高,可作為天然色素的重要來源之一,尤其是新品系蒙彩-01,其總花青素含量高達(dá)1051.65 mg/100 g FW,具重要應(yīng)用前景。
1)彩色馬鈴薯新品系蒙彩-01和蒙彩-02均含有矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖苷、矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷和矮牽牛素-3-阿魏酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷,其中矮牽牛素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷為主要組分;此外,蒙彩-01特有錦葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷組分,蒙彩-02中特有芍藥素-3-咖啡酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷和芍藥素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷2種組分。2)對(duì)照品種紅美含有天竺葵素-3-蕓香糖苷、天竺葵素-3-阿魏酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷、天竺葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷和矢車菊素-3-香豆酰-葡萄糖苷3種組分,其中天竺葵素-3-香豆酰-蕓香糖基-5-葡萄糖苷和矢車菊素-3-香豆酰-葡萄糖苷為主要組分。3)新品系蒙彩-01塊莖花青素總含量高達(dá)1051.65 mg/100 g FW,蒙彩-02和對(duì)照品種紅美分別為159.41和169.88 mg/100 g FW,3個(gè)材料間差異極顯著。
References:
[1] Jiang C, Yu X X, Yu Z,etal. Nutritional quality, cytology and SSR analysis of new colored potato hybrid lines. Journal of Northeast Normal University: Natural Science Edition, 2016, 48(3): 126-134.
姜超, 于肖夏, 于卓, 等. 彩色馬鈴薯營養(yǎng)品質(zhì)及染色體構(gòu)型和SSR分析. 東北師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版, 2016, 48(3): 126-134.
[2] Fang F. Anti-Prostate Cancer Effect of Anthocvanin Extracts from Purple Potato (SolanumtuberosumL.)inVitro[D]. Hangzhou: Zhejiang University, 2014.
方芳. 紫色馬鈴薯花色苷提取物體外抗前列腺癌[D]. 杭州: 浙江大學(xué), 2014.
[3] Kong J M, Chia L S, Goh N K,etal. Analysis and biological activities of anthocyanins. Phytochemistry, 2003, 64(5): 923-933.
[4] Yin L Q, Peng Y Q, Zhong C,etal. Determination of anthocyanins composition of different pigmengted potato (SolanumtuberosumL). Journal of Food Science, 2015, 36(18): 143-147.
殷麗琴, 彭云強(qiáng), 鐘成, 等. 高效液相色譜法測(cè)定8個(gè)彩色馬鈴薯品種中花青素種類和含量. 食品科學(xué), 2015, 36(18): 143-147.
[5] Cui K S, Yu X X, Yu Z,etal. QTL location of anthocyanin content and yield in teraploid pigment potato. Acta Prataculturae Sinica, 2016, 25(5): 116-124.
崔闊澍, 于肖夏, 于卓, 等. 四倍體彩色馬鈴薯花青素含量及產(chǎn)量性狀的QTL定位. 草業(yè)學(xué)報(bào), 2016, 25(5): 116-124.
[6] Rodriguez S L E, Giusti M M, Wrolstad R E. Anthocyanin pigment composition of red-fleshed potatoes. Journal of Food Science, 1998, 63(3): 458-465.
[7] Lewis C E, Walker J R L, Lancaster J E,etal. Changes in anthocyanins, flavonoids and phenolic acids in concentrations during development and storage of coloured potato (SolanumtuberosumL). Journal of the Science of Food and Agriculture, 1998, 79(2): 311-316.
[8] Fossen T. Anthocyanins from a norwegian potato cultivar. Food Chemistry, 2003, 81(2): 433-437.
[9] Yang Z Y, Li X S, Ma J Y,etal. Anthocyanin pomposition and content in “Heijingang” purple potato. Food Science, 2013, 34(14): 271-275.
楊智勇, 李新生, 馬嬌燕, 等. 紫色馬鈴薯“黑金剛”中花青苷組分和含量分析. 食品科學(xué), 2013, 34(14): 271-275.
[10] Xu L L, An R, Wang X H. Application of liquid chromatography-mass spectrometry in traditional Chinese Medicine analysis. Chinese Traditional Patent Medicine, 2006, 28(2): 239-246.
許玲玲, 安睿, 王新宏. 液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在中藥分析中的應(yīng)用. 中成藥, 2006, 28(2): 239-246.
[11] Zhang C, Ma Y, Zhao X Y,etal. Determination of anthocyanins for purple potato by HPLC-MS. Science and Technology of Food Industry, 2011, 32(7): 417-422.
張超, 馬越, 趙曉燕, 等. 高效液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定紫色馬鈴薯花色苷組成. 食品工業(yè)科技, 2011, 32(7): 417-422.
[12] Ishikura N. Anthocyanins in the flowers of Japanese garden iris belonging to ‘Higo’ line. Kumamoto Journal of Science Biology, 1978, 14(1): 9-15.
[13] Andersen M. Structure of petanin, an acylated anthocyanin isolated fromSolanumtuberosum, using homo-and hetero-nuclear two-dimensional nuclear magnetic tesonance techniques. Phytochemical Analsis, 1991, 2(5): 230-236.
[14] Lewis C E, Walker J R L, Lancaster J E,etal. Determination of anthocyanins, flavonoids and phenolic acids in potatoes Ⅰ: coloured cultivars ofSolanumtuberosumL. Journal of the Science of Food and Agriculture, 1998, 77(1): 45-57.
[15] Naito K, Umemura Y, Mori M,etal. Acylated pelargonidin glycosides from a red potato. Phytochemisry, 1998, 47(1): 109-112.
[16] Harborne J B. Plantp olyphenols—XI: the structure of acylated anthocyanins. Phytochemistry, 1964, 3(2): 151-160.
[17] Nerdal W, Andersen M. Intermolecular aromatic acidassociation of an anthocyanin (petanin) evidenced by two-dimensional nuclear overhauser enhancement nuclear magnetic resonance experiments and distance geometry calculations. Phytochemical Analsis, 1992, 3(4): 182-189.
[18] Fossen T, Andersen M. Anthocyanins from tubers and shoots of the purple potato,Solanumtuberosum. The Journal of Horticultural Science and Biotechnology, 2000, 75(3): 360-363.
[19] Fossen T, Ovstedal D O, Slimestad R,etal. Anthocyanins from a norwegian potato cultivar. Food Chemistry, 2003, 81(3): 433-437.
[20] Slimestad R, Aaberg A, Andersen M. Acylated anthocyanins from petunia flowers. Phytochemistry, 1999, 50(6): 1081-1086.
[21] Cristina A, Saavedra G, Pascual-teresas S D,etal. Identification of anthocyanins of pinta boca (Solanumstenotomum) tubers. Food Chemistry, 2004, 86(3): 441-448.
[22] Simirogiotis M J, Theoduloz C, Caligarri P D S,etal. Comparison of phenolic composition and antioxidant properties of two native chilean and one domestic strawberry genotypes. Food Chemistry, 2009, 113(2): 377-385.
[23] Hong V, Wrolsta D R E. Use of HPLC separation photodiodearray detection for characterization of anthocyanins. Food Chemistry, 1990, 38(3): 708-715.
[24] Reyes L F, Miller J C, Cisneros-zevallos L. Environmental condition influence the content and yield of anthocyanins and total phenolics in purple and red-flesh potatoes during tuber development. American Journal of Potato Research, 2004, 81(3): 187-193.
[25] Reyes L F, Miller J C, Cisneros-zevallos L. Antioxidant capacity, anthocyanins and total phenolics in purple and red-fleshed potato (SolanumtuberosumL.) genotypes. American Journal of Potato Research, 2005, 82(4): 271-278.
[26] Harborne J B. Plant polyphenols anthocyanin production in the cultivated potato. Biochemical Journal, 1960, 74(2): 262-269.
[27] Hu H M, Meng R R, Li Z,etal. Determination and analysis of total anthocyanin in colorful potatoes. Southwest China Journal of Agricultural Sciences, 2013, 26(37): 950-956.
胡艷梅, 孟然然, 李周, 等. 彩色馬鈴薯塊莖花色素苷分析測(cè)定. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2013, 26(37): 950-956.
[28] Luo X, Yang X, Su Y,etal. HPLC-MS determination of anthocyanins in pigmented tuber of potatoes. Seed, 2013, 32(7): 30-34.
羅弦, 楊雄, 蘇躍, 等. 彩色馬鈴薯品種塊莖花色苷HPLC-MS分析. 種子, 2013, 32(7): 30-34.
[29] Li M. Study on Component Analysis, Stability and Oxidation Resistance of Different Anthocyanins[D]. Nanjing: Nanjing University of Finance and Economics, 2013.
李敏. 不同花青素提取物的組成、穩(wěn)定性及抗氧化性比較的研究[D]. 南京: 南京財(cái)經(jīng)大學(xué), 2013.
HPLC-MSanalysisofanthocyanincomponentsandcontentinnewstrainsofcoloredpotato
JIANG Chao1, YU Xiao-Xia1, YU Zhuo1*, GAO Zhe2, ZHANG Ming-Fei1, YANG Dong-Sheng1, SHI Yue1
1.AgronomyCollege,InnerMongoliaAgriculturalUniversity,Huhhot010000,China; 2.LifeScienceCollege,InnerMongoliaUniversity,Huhhot010000,China
To identify differences in anthocyanin composition and content in new varieties Mengcai-01 and Mengcai-02, and a control Hongmei and provide a foundation for colored potato breeding and the development and application of potato anthocyanin, qualitative and quantitative analysis of anthocyanin in each variety using high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS). The control variety Hongmei had a total anthocyanin content of 169.88 mg/100 g FW, and contained four anthocyanin components; pelargonidin-3-rutinoside, cyanidin-3-coumaryl-glucoside, pelargonidin-3-(4'''-feruloylrutinoside)-5-glucoside and pelargonidin-3-(4'''-p-coumarylrutinoside)-5-glucoside, of which pelargonidin-3-(4'''-p-coumarylrutinoside)-5-glucoside and cyanidin-3-coumary-glucoside were the main components, accounting for 48.95% and 39.97% of the total anthocyanin content, respectively. The new variety, Mengcai-01, had a total anthocyanin content of 1051.65 mg/100 g FW, and contained four anthocyanin components; petunidin-3-(4'''-p-coumarylrutinoside), petunidin-3-(4'''-p-coumarylrutinoside)-5-glucoside, petunidin-3-(4'''-feruloylrutinoside)-5-glucoside and malvidin-3-(4'''-p-coumar ylrutinoside-5-glucoside) of which petunidin-3-(4'''-p-coumarylrutinoside)-5-glucoside was the main component accounting for 79.14% of the total anthocyanin content. Mengcai-02 had a total anthocyanin content of 159.41 mg/100 g FW and contained five anthocyanin components; petunidin-3-(4'''-p-coumarylrutinoside), petunidin-3-(4'''-p-coumarylrutinoside)-5-glucoside, petunidin-3-(4'''-feruloylrutinoside)-5-glucoside, peonidin-3-(4'''-p-caffeylrutinoside)-5-glucoside and peonidin-3-(4'''-p-coumarylrutinoside)-5-glucoside, of which petunidin-3-(4'''-p-coumarylrutinoside)-5-glucoside was the most important followed by peonidin-3-(4'''-p-caffeylrutinoside)-5-glucoside was the second, accounting for 54.08% and 24.06% of the total anthocyanin content, respectively. In conclusion, there were clear differences of anthocyanin components between the two new colored potato strains and the control variety Hongmei.
colored potato; new strains; anthocyanin; composition; content; high liquid chromatography-tandem mass spectrometry analysis
10.11686/cyxb2017051http//cyxb.lzu.edu.cn
姜超, 于肖夏, 于卓, 高喆, 張明飛, 楊東升, 石悅. 彩色馬鈴薯新品系花青素組分和含量的液質(zhì)聯(lián)用分析. 草業(yè)學(xué)報(bào), 2017, 26(10): 99-107.
JIANG Chao, YU Xiao-Xia, YU Zhuo, GAO Zhe, ZHANG Ming-Fei, YANG Dong-Sheng, SHI Yue. HPLC-MS analysis of anthocyanin components and content in new strains of colored potato. Acta Prataculturae Sinica, 2017, 26(10): 99-107.
2017-02-17;改回日期:2017-05-22
內(nèi)蒙古科技計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(2016ZD),內(nèi)蒙古自然科學(xué)基金博士基金(2014BS0324)和內(nèi)蒙古自然科學(xué)基金重大項(xiàng)目(2013ZD03)資助。
姜超(1989-),女,遼寧阜新人,在讀博士。E-mail: jiangchao8905@sina.com
*通信作者Corresponding author. E-mail: yuzhuo58@sina.com