張 梅 范 剛 龔懂文

長效醋酸甲羥孕酮對子宮內(nèi)膜癌組織中血管內(nèi)皮生長因子的影響

張 梅 范 剛 龔懂文

目的探討長效醋酸甲羥孕酮對子宮內(nèi)膜癌組織中血管內(nèi)皮生長因子的影響。方法選擇原發(fā)性子宮內(nèi)膜癌患者80例作為觀察組，同時選取80例正常增生期子宮內(nèi)膜組織做對照。比較觀察組治療前后與對照組VEGF的表達情況。結(jié)果治療前，觀察組中VEGF陽性表達較對照組高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=46.673，P<0.05)；治療后，2組VEGF陽性表達率比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.972，P<0.05)。治療后，觀察組VEGF陽性表達較治療前降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=14.171，P<0.05)。治療前和治療后，子宮內(nèi)膜癌患者病變組織中VEGF表達在不同年齡、組織分級、病理分期、病理類型、肌層浸潤深度有不同，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)。結(jié)論VEGF可通過促進血管形成參與到子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展過程，采用長效醋酸甲羥孕酮治療子宮內(nèi)膜癌可降低患者血管內(nèi)皮生長因子的表達，從而抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。

長效醋酸甲羥孕酮；子宮內(nèi)膜癌；內(nèi)皮生長因子

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1606～1608)

子宮內(nèi)膜癌是女性常見的惡性腫瘤之一[1]，近年來，子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率逐步上升，在我國其發(fā)病率居女性惡性腫瘤第9位，病死率居第3位[2]，且呈現(xiàn)年輕化趨勢。分子生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的主要機制是異?；罨种颇[瘤凋亡和增殖的異?；罨?，尤其是血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF) 可特異性地作用于血管內(nèi)皮細胞，再促進內(nèi)皮增殖、血管生長而促進腫瘤的形成[3]。本文觀察了長效醋酸甲羥孕酮治療子宮內(nèi)膜癌患者的療效，并分析了其對血管內(nèi)皮生長因子的影響，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇2012年1月至2015年12月在我院門診及住院處就診的原發(fā)性子宮內(nèi)膜癌患者80例，所有病例診斷經(jīng)均術(shù)后病理證實，年齡為54～72歲，平均(59.34±3.12)歲，病程(3.12±0.45)年；平均孕次(2.86 ±1.24) 次，平均產(chǎn)次為(2.56±1.12)次。病例組織學(xué)分類和手術(shù)病理分期均參照2009年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)標準，即手術(shù)病理分期：Ⅰ期～Ⅱ期52例，Ⅲ期以上28例；組織學(xué)分類：高分化(G1)20例，中分化(G2)32例，低分化(G3)28例。肌層浸潤深度>1/2 者43例，≤1/2者37例。腺癌38例，其他42例。將80例原發(fā)性子宮內(nèi)膜癌患者作為觀察組。同期選取正常增生期子宮內(nèi)膜組織女性80例作為對照組，年齡54～73歲，平均年齡為(59.58±3.08)歲；平均孕次(2.67±1.34)次，平均產(chǎn)次為(2.88±1.32)次。2組研究對象的年齡、孕次、產(chǎn)次等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P均>0.05)，具有可比性。所有患者知情同意。

1.2 方法

1.2.1 觀察組的治療方法 觀察組患者口服長效醋酸甲羥孕酮200 mg/d，療程為3個月。

1.2.2 檢驗方法[4]將其術(shù)后所取子宮內(nèi)膜標本浸泡于10%的甲醛溶液中，進行常規(guī)的石蠟包埋。本文采用采用免疫組化法，即SP法測定子宮內(nèi)膜標本中VEGF的表達情況，以5 μm厚度對包埋蠟塊進行連續(xù)切片。之后所有檢測程序均參照試劑盒(試劑盒：北京中杉金橋公司)說明書進行操作：以75%的酒精、二甲苯對切片脫蠟，之后采用微波進行抗原修復(fù)，以3%過氧化氫阻斷抗原修復(fù)后的標本的內(nèi)源性過氧化氫酶，以羊血清封閉后，加以兔抗人單克隆抗體作為一抗，之后4 ℃孵育12 h，再加入二抗后37 ℃孵育，采用DAB顯色，再以蘇木精復(fù)染分化，之后氨水返藍脫水，最后采用中性樹膠進行封片。陰性對照中采用PBS 替代一抗，陽性判定標準為細胞質(zhì)或者細胞核內(nèi)可見黃色或棕黃色顆粒。完成后以IPP圖像軟件測量VEGF的平均光密度值(OD)。平均光密度=總光密度/面積。平均光密度值與VEGF表達量呈正相關(guān)關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計方法

2 結(jié)果

2.1 2組患者子宮內(nèi)膜組織中VEGF表達水平比較

在子宮內(nèi)膜中，觀察組和對照組VEGF均有表達。治療前，VEGF在觀察組陽性表達率為82.5%，對照組陽性表達率為20.0%，2組VEGF陽性表達率比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=46.673，P<0.05)。治療后，VEGF在觀察組陽性表達率為40.0%，對照組陽性表達率為20.0%，2組VEGF陽性表達率比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.972，P<0.05)。觀察組治療前與治療后VEGF陽性表達率比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=14.171，P<0.05)。見表1。

表1 觀察組和對照組VEGF 在子宮內(nèi)膜中的表達情況/例

2.2 VEGF表達量與子宮內(nèi)膜癌臨床特征的關(guān)系

治療前，子宮內(nèi)膜癌患者病變組織中VEGF表達在不同年齡(χ2=7.833)、組織分級(χ2=12.028)、病理分期(χ2=9.757)、病理類型(χ2=15.589)、肌層浸潤深度(χ2=6.848)之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。治療后，子宮內(nèi)膜癌患者病變組織中VEGF表達在不同年齡(χ2=3.948)、組織分級(χ2=5.483)、病理分期(χ2=6.484)、病理類型(χ2=8.734)、肌層浸潤深度(χ2=4.958)之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。治療后與治療前病變組織中VEGF表達比較，不同年齡(≥45歲χ2=4.039；<45歲χ2=3.847)、組織分級(G1：χ2=6.483；G2：χ2=6.038；G3：χ2=5.268)、病理分期(Ⅰ期～Ⅱ期：χ2=6.848；Ⅲ期：χ2=7.483)、病理類型(腺癌：χ2=6.282；其他：χ2=3.895)、肌層浸潤深度(>1/2 者：χ2=7.038；≤1/2 者：χ2=5.937)之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。治療后VEGF陽性表達率均較治療前低。見表2。

3 討論

近年來，子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率逐步上升，已成為女性常見的惡性腫瘤之一。目前臨床主要以手術(shù)及術(shù)后放化療為主要手段，為了降低患者治療痛苦，提高生存質(zhì)量，臨床治療逐漸向藥物的研發(fā)和使用進行。長效醋酸甲羥孕酮是一種人工合成的純孕激素避孕藥，能夠有效抑制卵巢功能[5]，并且因為其具有吸收和排泄慢的特點而逐漸被應(yīng)用于治療子宮內(nèi)膜癌等疾病。部分研究[5-6]發(fā)現(xiàn)采用長效醋酸甲羥孕酮治療可使再次復(fù)發(fā)時間間隔延長，并降低復(fù)發(fā)率，這與其作用于下丘腦而抑制垂體促性腺激素的分泌，造成低雌激素的狀態(tài)有關(guān)。本文通過觀察長效醋酸甲羥孕酮治療子宮內(nèi)膜癌患者在治療前后血管內(nèi)皮生長因子水平變化，分析其作用機制而評估其對子宮內(nèi)膜癌的臨床療效。

表2 VEGF表達量與子宮內(nèi)膜癌臨床特征的關(guān)系/例

VEGF 是由2個相同亞基以二硫鍵交聯(lián)結(jié)合成的二聚體糖蛋白[7]，一般在機體中的合體滋養(yǎng)細胞、細胞滋養(yǎng)細胞和血管內(nèi)皮細胞均有表達[8]。VEGF參與整個正常妊娠過程，同樣其作為促血管生成的主要調(diào)控因子，可特異性作用于血管內(nèi)皮細胞，促進其有絲分裂而加速血管新生，同時參與腫瘤的發(fā)生、加速其生長和轉(zhuǎn)移[9-10]。閆文靜等[11]發(fā)現(xiàn)腫瘤的機制主要是信號傳導(dǎo)系統(tǒng)發(fā)生缺陷、異?；罨种颇[瘤凋亡和增殖異?；罨^程，而VEGF為具有多種功能的促血管形成因子，可特異性地作用于血管內(nèi)皮細胞而促進內(nèi)皮增殖和血管生長。子宮內(nèi)膜癌病變組織細胞的生長、增殖及轉(zhuǎn)移過程均依賴于病變組織的血管生成以提供豐富的血供，其為腫瘤組織提供營養(yǎng)的同時，還可以為腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移提供條件[12]。

本文觀察發(fā)現(xiàn)VEGF在子宮內(nèi)膜癌患者的病變組織和正常子宮內(nèi)膜中均有表達，其在子宮內(nèi)膜癌患者病變組織中的表達陽性率遠高于對照組正常子宮內(nèi)膜組織，本文還發(fā)現(xiàn)這也間接證明了VEGF參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。同時本文還發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌患者病變組織中VEGF表達在不同年齡、組織分級、病理分期、病理類型、肌層浸潤深度有不同，其在年齡越大、組織學(xué)分化程度越低，手術(shù)病理分期級別越高、非腺癌及肌層浸潤深度>1/2者中表達陽性率更高。這與既往報道[12]的VEGF同病理分期、組織學(xué)分級、淋巴轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)關(guān)系的結(jié)論相似。這與腫瘤細胞微環(huán)境有關(guān)，VEGF是受缺氧條件調(diào)控的血管生成調(diào)節(jié)因子，缺氧情況下腫瘤細胞的增殖會加速，因此當子宮內(nèi)膜存在缺氧狀態(tài)可出現(xiàn)血管結(jié)構(gòu)及功能異常，導(dǎo)致腫瘤病變的發(fā)生。機體正常情況下，在組織中，VEGF可促進血管生成，尤其是可促進機體組織受損細胞的血管生成，加速其恢復(fù)生理功能，但由于腫瘤組織的正常生理結(jié)構(gòu)受損，一旦出現(xiàn)病理狀態(tài)，VEGF可通過上述機制促進腫瘤血管的新生[13]。另外，因年齡越大，其體內(nèi)性激素在逐漸減少，研究[14]發(fā)現(xiàn)激素受體陽性率與腫瘤組織分化程度呈正相關(guān)，子宮內(nèi)膜癌往往局限于子宮內(nèi)膜，分化好的腫瘤不易發(fā)生肌層浸潤，分化不好的子宮內(nèi)膜癌易發(fā)生肌層浸潤而轉(zhuǎn)移。浸潤程度與組織學(xué)分級、病理分期均存在關(guān)聯(lián)，高分級的子宮內(nèi)膜癌往往更容易發(fā)生肌層浸潤[15]。

總之，子宮內(nèi)膜癌是由多因素、多種機制相互作用的結(jié)果，采用長效醋酸甲羥孕酮治療子宮內(nèi)膜癌可降低患者血管內(nèi)皮生長因子的表達，從而抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。

[1] 馬躍琴.保守手術(shù)聯(lián)合長效醋酸甲羥孕酮治療中重度子宮內(nèi)膜異位癥體會〔J〕.基層醫(yī)學(xué)論壇，2014，18(11)：1377-1378.

[2] 高 雙，李軼琳，姜雅萍，等.左炔諾孕酮宮內(nèi)緩釋系統(tǒng)與長效醋酸甲羥孕酮治療子宮內(nèi)膜異位癥的臨床療效〔J〕.中國婦幼保健，2012，27(35)：5758-5761.

[3] 鄭秀英，鄭樂榮，蔡珠華，等.中重度子宮內(nèi)膜異位癥術(shù)后聯(lián)合長效醋酸甲羥孕酮治療的效果觀察〔J〕.現(xiàn)代實用醫(yī)學(xué)，2013，25(3)：307-309.

[4] 石 波，徐元屏，張先華，等.卵巢內(nèi)異囊腫術(shù)后應(yīng)用DMPA和GnRHa的效果比較〔J〕.長江大學(xué)學(xué)報(自然版)，2011，8(4)：163-164.

[5] 葉思款，季 波，吳佩茲，等.醋酸甲羥孕酮的藥理作用與臨床應(yīng)用〔J〕.中國藥業(yè)，2010，19(1)：63-64.

[6] 夏 萍.長效醋酸甲羥孕酮在子宮內(nèi)膜異位癥大鼠中的作用〔D〕.福建醫(yī)科大學(xué)，2014.

[7] 高曉旭.子宮內(nèi)膜癌組織中缺氧誘導(dǎo)因子-1α、血管內(nèi)皮生長因子基因表達的臨床意義〔J〕.中國基層醫(yī)藥，2010，17(20)：2759-2760.

[8] 馬德花，趙淑萍，劉素梅，等.子宮內(nèi)膜癌及癌周組織VEGF mRNA表達及其臨床意義初步研究〔J〕.中華腫瘤防治雜志，2008，15(14)：1080-1084.

[9] 王曉冰.老年子宮內(nèi)膜癌組織中突變型p53基因表達與血管內(nèi)皮生長因子的關(guān)系〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2014，34(19)：5426-5428.

[10] 王洪蕊，馬德花，趙淑萍，等.p53和VEGF蛋白表達與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系〔J〕.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展，2008，8(10)：1900-1902.

[11] 閆文靜，黎衛(wèi)平，李東鵬，等.FAK和VEGF-D在子宮內(nèi)膜癌中的表達及其相互關(guān)系的研究〔J〕.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2008，35(21)：4295-4297.

[12] 李豐玲，王月玲.子宮內(nèi)膜癌組織中PTEN與VEGF、MVD的相關(guān)性分析〔J〕.中國婦幼健康研究，2008，19(6)：573-576，封3.

[13] 鄒積艷，盛敏佳，潘 穎，等.PTEN和VEGF蛋白在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達及臨床意義〔J〕.中國婦幼保健，2010，25(25)：3645-3647.

[14] 盛 梅.子宮內(nèi)膜癌組織中VEGF的表達及意義〔J〕.山東醫(yī)藥，2008，48(33)：49-50.

[15] 耳麗雪，劉鳳巧.子宮內(nèi)膜癌患者血管內(nèi)皮生長因子和脂聯(lián)素及表皮生長因子受體表達的臨床意義〔J〕.醫(yī)學(xué)綜述，2011，17(9)：1417-1418.

EffectofLong-actingMedroxyprogesteroneAcetateontheExpressionofVascularEndothelialGrowthFactorinEndometrialCancer

ZHANGMei，F(xiàn)ANGang，GONGDongwen.

BazhongCentralHospital，Bazhong，636000

ObjectiveTo investigate the effect of long-acting medroxyprogesterone acetate on the expression of vascular endothelial growth factor in endometrial cancer.Methods80 pregnancies with endometrial cancer were selected as the observation group and 80 healthy women were selected as the control group.Compared the expression of vascular endothelial growth factor before and after treatment.ResultsBefore treatment，the difference of total effective rate for VEGF between both groups was statistically significant(χ2=46.673，P<0.05)，the total effective rate for VEGF of the control group was lower than the observation group.After treatment，the difference of total effective rate for VEGF between both groups was statistically significant (χ2=6.972，P<0.05).The difference of total effective rate for VEGF of the observation group before and after treatment was statistically significant (χ2=14.171，P<0.05)，the total effective rate for VEGF after treatment was lower than before treatment.The total effective rate of VEGF was different for different ages，Tissue grading，pathological stage，pathological type，depth of muscular invasion before and after treatment(P<0.05).ConclusionThe vascular endothelial growth factor may participate in the occurrence and development of endometrial cancer by promoting angiogenesis.It can reduce the expression of vascular endothelial growth factor in serum of endometrial cancer treated by long-acting medroxyprogesterone acetate to inhibit the occurrence and development of tumor.

Long-acting medroxyprogesterone acetate；Endometrial cancer；Vascular endothelial growth factor

636000 四川省巴中市中心醫(yī)院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.10.012

R737.33

A

1001-5930(2017)10-1606-03

2016-09-08

2017-03-23)

(編輯甘艷)