吳江洲

摘 要：文章通過實驗，利用固相萃取-氣相色譜法為檢測方法，建立蔬菜膳食中19種有機磷農(nóng)藥殘留的同時分析方法，結(jié)果表明，此方法具有快速、簡便、準確、靈敏、重現(xiàn)性好的特點，適合蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留量的測定，可推廣使用。

關(guān)鍵詞：氣相色譜儀；色譜分析；有機磷農(nóng)藥殘留；檢測性能；加標回收率；精密度

現(xiàn)代科技的高速發(fā)展使得農(nóng)業(yè)生產(chǎn)越來越便捷。在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)中，農(nóng)藥是的重要生產(chǎn)資料，對于保證農(nóng)作物優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)具有不可或缺的作用，已成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中不可或缺的一部分。目前，我國使用最多的農(nóng)藥就是有機磷農(nóng)藥。雖然，有機磷農(nóng)藥的使用可以大大提高經(jīng)濟效益，但這種農(nóng)藥可能會殘留在蔬菜上，通過飲食引起人體慢性中毒，并且誘發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等多種系統(tǒng)的疾病。因此，為了能夠確保蔬菜上的農(nóng)藥殘留不超標，維護人們的身體健康，必須尋求蔬菜中有機磷農(nóng)藥殘留量的快速檢測手段，進行一定的檢測。目前，對果蔬中有機磷農(nóng)藥殘留進行檢測的方式有很多，并且每一種方式都有著各自的優(yōu)勢和缺陷。色譜法屬于對果蔬進行有機磷農(nóng)藥殘留的檢測方法中進行分離的方法，主要就是根據(jù)對固定相和流動相之間的分配系數(shù)進行物質(zhì)的分析，以便于達到分離的目的，并且把對物質(zhì)濃度進行的分析，轉(zhuǎn)變?yōu)槟軌蜻M行測量的信號，能夠讓記錄儀進行記錄。當前利用色譜法進行有機磷農(nóng)藥檢測的方法主要有薄層色譜方式、氣相色譜方式。下面，文章將對固相萃取-氣相色譜測定方法進行研究與介紹。

一、材料與方法

1.儀器與試劑

安捷倫789B氣相色譜儀；SPE100全自動固相萃取儀；渦輪粉碎機；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；TTL-DCⅡ型氮吹儀，ENVI-C18固相萃取小柱（500mg，6ml），ENVI-CARB固相萃取小柱（500mg，6ml），CARB/NH2固相萃取小柱（500mg，6ml）和LC-NH2（500mg，6ml），均購自杭州福裕科技服務(wù)有限公司。

敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲基內(nèi)吸磷、甲拌磷、氧化樂果、二嗪磷、氯唑磷、久效磷、樂果、毒死蜱、甲基對硫磷、馬拉硫磷、對硫磷、喹硫磷、水胺硫磷、滅線磷、三唑磷、亞胺硫磷（均購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所，濃度為40～100μg/ml）。丙酮、乙腈、二氯甲烷均為色譜純，氯化鈉為優(yōu)級純，經(jīng)烘烤后備用。

2.色譜分析條件

色譜條件按已優(yōu)化的氣相色譜條件，即采用Rtx-1701（30m×0.25mm×0.25μm）農(nóng)殘專用毛細管柱，不分流進樣。FPD檢測器溫度：280℃。進樣口溫度：250℃，色譜柱流量2.0ml/min，總流量65.0ml/min，吹掃流量3.0ml/min，氫空比為62.5：90。程序升溫條件：初始柱溫80℃，以20℃/min速率程序升溫至170℃，以2℃/min速率程序升溫至180℃，停留4min，再以14℃/min速率程序升溫至230℃，停留2.5min，然后以30℃/min速率程序升溫至260℃，停留8min。進樣1μl，外標法定量。

3.樣品處理

（1） 提取。 按GB/T8855抽取蔬菜樣品，取可食部分，經(jīng)縮分后，將其切碎，充分混勻放入食品加工器粉碎，制成待測樣。準確稱取25.0g切碎混勻的蔬菜于200ml具塞三角燒瓶中，加入50ml乙腈超聲提取0.5h，濾紙過濾，濾液收集到裝有6gNaCl的100ml具塞比色管中，劇烈震蕩2min，室溫靜置30min，靜置分層后吸取上層溶液10.00ml放入15ml具塞刻度離心管，40℃水浴氮吹至近干，待凈化。

（2）凈化。 使用全自動固相萃取儀進行凈化處理。配置二氯甲烷-丙酮體積比1：1的淋洗液，先以流速3ml/min淋洗液活化固相小柱3min，然后用2ml淋洗液洗滌離心管，將清洗液加到小柱上，重復(fù)三次，最后用10ml洗脫固相小柱。收集洗脫液，40℃水浴氮吹至近干，用丙酮定容至1ml，上氣相色譜儀測定。

二、結(jié)果與討論

1.提取條件的選擇

實驗發(fā)現(xiàn)，將勻漿、振蕩、超聲結(jié)合起來經(jīng)優(yōu)化組合后比單純采用其中任何一種方法對農(nóng)藥的提取率均高一些，為此確定了1.3中樣品提取的方法。同時考查了乙腈、丙酮、二氯甲烷三種溶劑作提取溶液對蔬菜中有機磷的提取效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，二氯甲烷適合水中部分有機磷的提取，并不合適本研究中如此多種類的提取，丙酮作溶劑時回收率也不是很理想，而乙腈效果明顯優(yōu)于其他。

2.固相小柱的選擇

實驗前色譜柱篩選對比中對C18柱、ENVI-CARB、CARB/NH2和LC-NH2固相小柱對樣品的凈化能力進行了比較。其中ENVI-CARB柱具有最佳的凈化效果，樣品回收率理想。LC-NH2柱由于活化和洗脫中要使用毒性較大的甲苯才能達到較好的效果，故采用ENVI-CARB柱作為凈化小柱。

3.洗脫溶劑的確定

凈化過程發(fā)現(xiàn)不同溶液的洗脫效果差別較大，分別比較了乙腈、丙酮、二氯甲烷、二氯甲烷-丙酮和乙腈-甲苯的洗脫效果。結(jié)果表明二氯甲烷-丙酮洗脫溶劑洗脫效果最佳，乙腈-甲苯洗脫溶劑次之，乙腈-甲苯洗脫溶劑尤其適合LC-NH2柱，但其他回收率相對較低。綜合考慮采用二氯甲烷-丙酮作為洗脫溶劑。

4.方法的檢測性能

（1）方法的線性關(guān)系及檢出限 用丙酮稀釋配制常見的19種有機磷農(nóng)藥的混合標準溶液。將標準系列溶液在上述色譜條件下進行測定，用標準系列溶液濃度為橫坐標，用峰面積為縱坐標進行線性回歸。其中18種有機磷的線性范圍在4～200μg/L之間時，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)≥0.9994，只有乙酰甲胺磷響應(yīng)相對較低，可能是其中-NHCOCH3基團的給電子的共軛效應(yīng)存在對進樣口和柱前端的變化比較敏感。以儀器信噪比（S/N）為3時確定最低檢測濃度，根據(jù)前處理方法計算方法的檢出限為0.8～5.1μg/kg，方法的定量檢出限為2.5～16.9μg/kg，見表1。有機磷混合農(nóng)藥標準色譜圖及樣品加標回收色譜圖見圖1。

（2） 回收率和精密度 在空白蔬菜樣中添加入有機磷混合標準溶液，按上述實驗步驟，分別做高低兩個濃度的加標回收試驗，即40μg/kg和120μg/kg，平行測定6次，結(jié)果見表2。結(jié)果表明，加標回收率為62.4%～111.5%，相對標準偏差（RSD）為0.74%～5.26%，其中高濃度樣本回收效果要好于低濃度。

三、結(jié)語

總之，加強農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管力度，完善其分析檢測手段是保障民生的重要舉措之一。本研究通過對樣品處理、固相萃取條件進行優(yōu)化，進行了固相萃取——氣相色譜法測定蔬菜膳食中19種有機磷農(nóng)藥的殘留量的實驗，并驗證了該方法的良好性能，具體表現(xiàn)為快速、靈敏、準確、成本低，可滿足新鮮蔬菜中常見的多種有機磷農(nóng)藥殘留的快速檢測要求。

參考文獻：

[1]易承學(xué)，徐虹，何凱.固相萃取-氣相色譜法測定蔬菜膳食中有機磷農(nóng)藥殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志， 2015（8）：1145-1148.

[2]蔡曦，鐘良康，丁堅強等.固相萃取-氣相色譜法快速測定蔬果中23種有機磷農(nóng)藥殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志， 2011（3）：566-567.endprint