丁峰

（山東省沂水縣檢驗檢測中心，山東 臨沂 276400）

高效液相色譜（HPLC）法在食品檢驗中的應用

丁峰

（山東省沂水縣檢驗檢測中心，山東 臨沂 276400）

色譜法作為一種分離以及分析的方法，其廣泛應用于分析化學以及食品檢測等領域，又稱為“色譜分析法”“層析法”等。簡述了高效液相色譜檢測方法，其作為一種新型分離分析技術在食品檢驗過程中得到了廣泛應用，并針對該種方法在食品添加劑檢測、食品分析以及農藥殘留等各個方面的應用進行了闡述。

高效液相色譜；食品檢測；添加劑檢測；溶質

1 高效色譜儀（HPLC）

高效液相色譜法是在高壓條件下溶質在固定相和流動相之間進行的一種連續(xù)多次交換的過程，它借溶質在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同引起排阻作用的差別，使不同溶質得以分離。

因為色譜柱填充劑顆粒直徑很小，并且為了使得淋洗液以均勻的速度流過色譜柱，在高效液相色譜中需要采用高壓泵。高壓泵要求具有穩(wěn)定的壓力以及流量，通常壓力選取范圍為510～710 kPa之間。在色譜分析中，應用較多的為梯度淋洗（梯度洗脫），其為以一定比例混合的不同極性的溶劑，通過極性變化改變被分離組分的分離因素，以提高分離效果。高效色譜儀（HPLC）常采用的色譜柱為內壁極為光滑的不銹鋼管，但當壓力較低時，色譜柱也可以采用玻璃或石英材質，通常色譜柱為直圓柱形，以達到便于液體填充的目的。

在高效色譜儀（HPLC）中采用的檢測器的作用為檢測對象經過色譜柱后各個成分的濃度變化，其輸出的結果為定性或者定量分析的圖形。為了使得結果較為精準，就要求檢測器具有足夠高的靈敏度以及滿足使用范圍的要求等，還應該具有對溫度等周圍環(huán)境的變化不敏感等特點。

2 液相色譜法在食品分析中的應用

20世紀80年代，有學者在食品分析中已經采用高效液相色譜法。隨著技術的發(fā)展，該種方法在食品分析中得到了廣泛應用。

2.1 在乳品分析中的應用

乳制品主要成分為葡萄糖、脂肪、蛋白質以及維生素等，利用HPLC液相色譜法可以精確地檢測出奶制品中各個組成營養(yǎng)成分的類型及比例。此外，還可以利用糖類分析專用柱或氨基鍵合柱來檢測低分子糖類。

2.2 在肉制品分析中的應用

HPLC液相色譜法可用于肉制品分析中，比如在臘肉制品中，加工商往往采用硝酸鹽或者亞硝酸鹽作為發(fā)色劑，但如果上述成分添加量過多，則在存放過程中可能轉變生成N-亞硝胺，該種成分具有毒性，會導致食用者患肝癌、結腸癌等疾病的概率提升。在該類食品銷售前都需要抽樣檢測，利用HPLC液相色譜法分析硝酸鹽或亞硝酸鹽所占的比例，如果大于國標要求值，則會禁止該種食品進入市場。

2.3 在其他食品分析中的應用

在果蔬以及其他熟食制品銷售前，往往也需要對其的營養(yǎng)成分、比例、食品添加劑以及有毒物質是否超標等方面進行檢測，保證安全，讓消費者購買、食用時放心。

3 在食品微生物及代謝物檢測中的應用

在食品中通常有著大量的微生物，其中，有些對人類有益，有些本身或其代謝物具有毒性，從而需要對食品中微生物的含量進行分析。

HPLC方法也被應用于食品微生物及微生物代謝物的檢測，該種方法可以通過分析不同微生物的組成以及不同微生物的代謝產物，可以得出樣品中各類細菌的類型及比例，最終確定病原微生物的組成成分，以判斷被檢驗的食品所包含微生物的比例是否存在超標的現(xiàn)象，以及是否包含對人類健康有損害的成分。

4 添加劑檢測中的應用

為了獲得更好的食品外觀或味道，食品制造商往往會采用增加添加劑的方法。另外，部分食品添加劑也具有防腐或者干燥等作用，部分食品添加劑的成分為天然的，該種添加劑往往對人們健康沒有損害。然而，也存在很多人工合成的添加劑，其往往對食品安全產生了很大的影響；很多不良商販為了獲取高額利益，添加了大量添加劑，造成大量群眾中毒或引發(fā)疾病。例如，在奶粉中添加大量的三聚氰胺后，會對嬰幼兒造成不可逆轉的傷害。因此，采用HPLC方法對食品添加劑進行檢測極其重要。以下對各類常見添加劑的檢測進行簡單介紹。

4.1 甜味添加劑的檢測

在食品添加劑中，甜味添加劑極為常見，其多用于糕點以及飲料制品中，添加部分甜味添加劑就可以使得食品獲得較高的甜度值。甜味添加劑中糖精最為常見，很多食品加工商對人們的身體健康置之不理，在食品中大量投放糖精，使得消費者出現(xiàn)血小板減少的癥狀，更有甚者對消費者的肝臟功能造成了損害。在糖精的檢測中，我國多家檢測機構采用HPLC方法結合熒光以及紫外線檢測的方法，與傳統(tǒng)的檢測方法相比，該種方法具有檢測迅速、靈敏度高、準確率高的特點，檢測初期可以很好地避免因為檢測成分多而引起的樣品分離效果不理想。

4.2 色素添加劑的檢測

色素添加劑可以使食品具有更加吸引人的外觀，色素添加劑也分為天然和人工合成兩大類。其中，天然的色素添加劑為從自然的動植物中提取，具有無害的特點；而人工合成的食品添加劑會對使用者的身體構成損害，過量使用合成的色素添加劑，會使食用者產生中毒現(xiàn)象。具體檢測步驟如下：對肉類制品進行脫脂處理，按照特定比例將乙醇和氨水進行混合，利用超聲波過濾技術對上述樣品進行提取處理，再用安捷倫1100系統(tǒng)按照20 kmmol/L乙酸銨與甲醇梯度進行洗脫，最后利用二極管整列檢測，以得到最終檢測結果。

5 農藥與獸藥殘留檢測中的應用

在農作物耕種和牲畜飼養(yǎng)過程中，往往會或多或少地使用農藥和獸藥。如果農藥的殘留量過多，則會對消費者的健康構成損害。該現(xiàn)象已經引起國內外學者的廣泛關注，藥物殘留的檢測已成為食品安全的極為重要的課題。隨著HPLC方法的發(fā)展，結合液質聯(lián)用的技術在農藥以及毒素成分檢測的過程中廣泛應用。

6 結論

綜上所述，高效液相色譜法作為一種現(xiàn)代的檢測分析方法，在食品的添加劑、農藥殘留、微生物以及添加劑的檢測中發(fā)揮著極為重要的作用。隨著該種方法的發(fā)展，其檢測范圍更為廣泛，檢測精度也有了較大的提高，其對食品進行了較為全面的分析，提高了食品的安全性，保障了人們的身體健康，該種方法值得推廣。

［1］費賢明，張紅梅.應用HPLC FLD法測定食品中的糖精鈉［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2007，17（08）.

［2］黎其萬，劉宏程.高效液相色譜法測定油浸醬菜中的苯甲酸、山梨酸和糖精鈉［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2004，3（10）.

〔編輯：張思楠〕

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10.15913/j.cnki.kjycx.2017.24.148

2095-6835（2017）24-0148-02