許楚楚 ， 胡士玲,2 ， 陳宋杰 ， 劉辰光 ， 劉 洋 ， 呂艷麗,2

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院 ， 北京 海淀 100193 ； 2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 ， 北京 海淀 100193)

貓上呼吸道感染(Upper respiratory tract disease, URTD)是貓常見(jiàn)的臨床問(wèn)題，導(dǎo)致該癥狀的病原有很多，主要的病原是貓皰疹病毒(Felineherpesvirus, FHV)和貓杯狀病毒(Felinecalicivirus, FCV)。其他病原，包括支氣管敗血波氏桿菌和衣原體的感染也會(huì)造成貓的上呼吸道感染，但衣原體主要造成結(jié)膜感染[1-2]。FHV和FCV均為貓上呼吸道感染的重要病原。FHV通常造成上呼吸道和眼部癥狀，其中，角膜樹(shù)突狀潰瘍是這種感染的特征性癥狀[3]。FCV會(huì)造成急性的口腔和上呼吸道癥狀，有口腔潰瘍的貓通常提示有FCV感染，F(xiàn)CV感染也有可能導(dǎo)致貓出現(xiàn)跛行的癥狀[4]。

盡管針對(duì)預(yù)防FHV和FCV的疫苗(貓三聯(lián)疫苗)已經(jīng)普遍在幼貓中使用，但這兩種病毒仍然在貓中流行。一些研究顯示，F(xiàn)CV和FHV的感染風(fēng)險(xiǎn)與貓的性別、年齡、品種有關(guān)[5]。本文對(duì)北京地區(qū)來(lái)中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院就診的412例存在URTD并做FCV和FHV病原檢查的病例進(jìn)行回顧性調(diào)查，以明確FCV和FHV可能的感染風(fēng)險(xiǎn)因素，為預(yù)防個(gè)體家養(yǎng)貓發(fā)生FHV和FCV感染及相關(guān)疾病的臨床診治提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣本來(lái)源 本研究412例樣本來(lái)自于2015年1月至2017年2月來(lái)中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院就診的有上呼吸道癥狀的患貓。患貓主要表現(xiàn)為打噴嚏、鼻分泌物增多、眼分泌物增多、結(jié)膜炎、呼吸困難、咳嗽、多涎和口腔潰瘍等其中的1個(gè)或多個(gè)臨床癥狀。部分患貓同時(shí)具有厭食和/或發(fā)熱等臨床表現(xiàn)。

1.2 樣本采集 采集具有上述呼吸道癥狀的患貓的眼、鼻和咽拭子用于FHV 和FCV的檢測(cè)。取無(wú)菌棉拭子采集咽部分泌物、眼結(jié)膜分泌物和鼻分泌物，將分泌物拭子放于裝有0.5 mL的滅菌磷酸鹽緩沖液的離心管中，充分混合， 4 ℃保存，24 h之內(nèi)完成檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法 本研究的所有樣本檢測(cè)均采用PetNAD 貓卡里西病毒檢測(cè)套組和PetNAD 貓皰疹病毒檢測(cè)套組提供的試劑，按照PetNAD 寵物診間核酸檢測(cè)系統(tǒng)(金瑞鴻捷生物技術(shù)有限公司，廈門)流程提取核酸，與引物混合，上機(jī)檢測(cè)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 計(jì)算FCV和FHV的陽(yáng)性率；用二元邏輯回歸分析(SPSS 19.0)方法分析不同性別、年齡和品種貓發(fā)生病毒感染的發(fā)生率和風(fēng)險(xiǎn)因素；用Fisher精確試驗(yàn)方法(SPSS 19.0)分析FCV和FHV陽(yáng)性病例不同癥狀的發(fā)生率和風(fēng)險(xiǎn)因素。

2 結(jié)果

2.1 FCV和FHV混合感染和單獨(dú)感染在貓上呼吸道疾病的發(fā)生率 對(duì)FCV陽(yáng)性和FHV陽(yáng)性的樣本數(shù)量及FCV和FHV感染在貓呼吸道疾病中的發(fā)生率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)(表1)。結(jié)果顯示，在412份被檢樣本中，F(xiàn)CV和/或FHV感染病例占被檢總樣本數(shù)的60.2%， FHV單一感染在檢測(cè)FHV的病例中發(fā)生率為26.3%，F(xiàn)CV單一感染在檢測(cè)FCV的病例中發(fā)生率為46.3%，F(xiàn)HV和FCV混合感染在FCV和FHV同時(shí)檢測(cè)的病例中發(fā)生率為11.8%。

表1 FHV和FCV的檢出率

2.2 FCV和FHV感染在不同性別、年齡、品種貓的發(fā)生率 對(duì)不同性別、年齡、品種的貓F(tuán)HV和FCV發(fā)生率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，利用二元邏輯回歸分析統(tǒng)計(jì)了各個(gè)因素對(duì)于FHV和FCV感染的優(yōu)勢(shì)比(Odd Ratio，OR)和顯著性(P)的影響(表2和表3)。在邏輯回歸分析中，將每組的最后指標(biāo)作為參考分類(OR=1.0)，OR>1或OR<1的意義是該因素和參考因素相比的風(fēng)險(xiǎn)大小。每種因素對(duì)于疾病的相關(guān)性通過(guò)P值評(píng)估。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，家養(yǎng)長(zhǎng)毛貓與FHV感染呈顯著正相關(guān)(P<0.05，OR=3.25)，波斯血統(tǒng)貓與FHV感染呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05，OR=0.32)。其余因素與FCV或FHV感染均無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.05)。

表2 不同性別、年齡、品種的貓F(tuán)HV感染的發(fā)生率和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

表3 不同性別、年齡、品種的貓F(tuán)CV感染的發(fā)生率和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

2.3 FHV和FCV感染引起的不同上呼吸道癥狀的發(fā)生率和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 對(duì)FHV和FCV感染引起的常見(jiàn)呼吸道癥狀的發(fā)生率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估(表4)。其中OR值代表該癥狀在疾病中發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，其結(jié)果的評(píng)估需結(jié)合P值。從統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知，打噴嚏和口腔潰瘍與FCV感染呈顯著相關(guān)(P<0.05)，其他癥狀與FCV或FHV感染均無(wú)顯著相關(guān)性。

表4 FHV和FCV感染不同上呼吸道癥狀的發(fā)生率和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

3 討論

本文首次對(duì)北京地區(qū)貓F(tuán)CV和FHV的感染情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。在其他國(guó)家和地區(qū)已經(jīng)有FCV和FHV感染的相關(guān)的統(tǒng)計(jì)報(bào)道。Mireia Fernandez[6]等人2016年對(duì)西班牙地區(qū)有呼吸道癥狀和沒(méi)有癥狀的貓進(jìn)行FHV的篩查，結(jié)果顯示，F(xiàn)HV的發(fā)生率為18.5%。在其他調(diào)查中，由于調(diào)查對(duì)象的飼養(yǎng)環(huán)境和貓的臨床狀態(tài)不同，F(xiàn)HV的發(fā)病率的變化范圍也很大，在日本[7]、美國(guó)[8]、澳大利亞[9]和意大利[10]等國(guó)家對(duì)家養(yǎng)有臨床癥狀的貓調(diào)查中FHV的陽(yáng)性率從4.5%到76.3%。本研究中FHV的發(fā)生率為26.3%，相對(duì)其他研究較低。對(duì)于FHV的檢測(cè)要考慮到FHV是間歇排毒，并且大多數(shù)情況下是潛伏在三叉神經(jīng)，所以有時(shí)很難用PCR的方法檢測(cè)到[1]。對(duì)于FCV的發(fā)病率，之前有0%到29%不同的報(bào)道[11-13]。本研究中FCV的感染率高達(dá)46.3%，可能由于試驗(yàn)選取的樣本均為有呼吸道癥狀的貓，病毒感染的幾率較大。本調(diào)查中，出現(xiàn)呼吸道癥狀的貓檢出FCV和/或FHV的比率高達(dá)60.2%，這一方面表明患有上呼吸疾病的貓感染FCV或FHV的風(fēng)險(xiǎn)極高，另一方面提示，具有呼吸道癥狀的貓除了感染FHV和/或HCV外，尚有40%的病貓是有其他病原或病因引起的。因此，對(duì)于有呼吸道癥狀的貓，排查FHV和FCV是鑒別呼吸道致病微生物的較為有效的手段。

本研究中，不同性別的貓對(duì)于FHV和FCV單獨(dú)或混合感染均無(wú)顯著相關(guān)性。有的研究發(fā)現(xiàn)，未去勢(shì)的公貓呼吸道疾病和病毒感染的風(fēng)險(xiǎn)更高，這個(gè)結(jié)果可能的原因是公貓更易外出，與病原的接觸機(jī)會(huì)較多[14-15]。但對(duì)于嚴(yán)格在室內(nèi)生活的貓的研究中，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)性別和病毒感染存在相關(guān)性[6]。對(duì)于各個(gè)年齡段的貓對(duì)FCV和FHV的易感性，本研究沒(méi)有顯示出相關(guān)性。在其他大部分研究中，幼齡貓和老年貓由于抵抗力下降，可能有更高的上呼吸道疾病的發(fā)生率[5,16]。但對(duì)于FHV和FCV的感染，Jane E.Sykes等人和本研究的類似，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)FHV對(duì)于不同年齡段患貓的感染有顯著差異[17]。以往我們對(duì)FCV和FHV的印象可能是幼年貓的發(fā)生率更高，是因?yàn)橛啄曦埌l(fā)生上呼吸道疾病的數(shù)量較多，造成臨床上的誤解。所以在診斷上呼吸道疾病時(shí)，成年貓有呼吸道癥狀時(shí)，也應(yīng)把病毒感染考慮進(jìn)去。對(duì)于不同品種的貓發(fā)生上呼吸道疾病的風(fēng)險(xiǎn)，有報(bào)道稱純種貓不易感染FHV，但是在一些研究中發(fā)現(xiàn)純種貓?jiān)谪埳岬沫h(huán)境中接觸病原的機(jī)會(huì)少，使得它們?cè)谥魅孙曫B(yǎng)之后有更高的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，在應(yīng)激或更換環(huán)境后也有更高的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)[18-19]。本研究結(jié)果顯示，家養(yǎng)長(zhǎng)毛貓與FHV的感染呈顯著正相關(guān)，可能與中國(guó)北京地區(qū)飼養(yǎng)貓的品種傾向性有關(guān)。 有文獻(xiàn)報(bào)道，波斯血統(tǒng)貓易發(fā)生呼吸道疾病，波斯血統(tǒng)貓包括加菲，布偶，喜馬拉雅，金吉拉等品種，它們的主要特點(diǎn)是短頭顱，但還沒(méi)有報(bào)道短頭顱的貓和病毒感染有相關(guān)性[20]。本研究中發(fā)生FHV感染和波斯血統(tǒng)貓呈顯著負(fù)相關(guān)，表明波斯血統(tǒng)貓發(fā)生上呼吸道感染患貓較多，但病毒感染的比例較少，對(duì)于波斯貓這種短頭顱品種發(fā)生呼吸道癥狀除了病毒原因外應(yīng)注意排查其他可能因素。

有較多關(guān)于FCV和FHV感染的臨床癥狀的報(bào)道，其中打噴嚏是兩種病毒感染最常發(fā)的癥狀，其次是眼鼻分泌物、角膜炎和咳嗽[21]。對(duì)于FHV感染，經(jīng)常發(fā)生的是鼻腔黏膜和眼角膜表面的侵蝕和潰瘍，這會(huì)導(dǎo)致打噴嚏，眼鼻分泌物增多的臨床表現(xiàn)[22]。本研究中，各個(gè)癥狀和FHV的發(fā)生沒(méi)有顯著相關(guān)性，但發(fā)生打噴嚏癥狀的貓發(fā)生率和數(shù)量都相對(duì)較高。FCV感染時(shí)，除了會(huì)伴發(fā)一些常見(jiàn)的上呼吸道癥狀，如打噴嚏、眼鼻分泌物增多等，還有報(bào)道稱會(huì)出現(xiàn)明顯的口腔、齒齦或舌部的潰瘍[23]。本研究中，F(xiàn)CV感染和打噴嚏、口腔潰瘍顯著相關(guān)，和文獻(xiàn)報(bào)道一致。FCV感染后病毒會(huì)在口腔上皮中復(fù)制，從而導(dǎo)致口腔、齒齦、舌部的潰瘍，這是區(qū)分FHV感染和FCV感染的主要特征[24]。其他癥狀中，有報(bào)道咳嗽更常見(jiàn)于FHV感染，但是咳嗽也是其他感染，比如支氣管敗血波氏桿菌感染的主要癥狀，本研究對(duì)于有呼吸道癥狀的貓沒(méi)有排查其他原因，一些混合癥狀可能伴隨其他因素的感染，應(yīng)注意其鑒別診斷。

針對(duì)貓F(tuán)HV和FCV感染，還存在其他風(fēng)險(xiǎn)因素，比如免疫情況，是否有外出的生活習(xí)慣，家中是否有其他貓和動(dòng)物等等。由于臨床病例信息條件所限，無(wú)法進(jìn)行這些信息的詳細(xì)調(diào)查，下一步研究應(yīng)該針對(duì)這些因素進(jìn)行調(diào)查，并且對(duì)引起上呼吸道疾病的其他病原(支原體，衣原體)開(kāi)展檢測(cè)。從而對(duì)貓上呼吸道感染的風(fēng)險(xiǎn)因素進(jìn)行更全面的評(píng)估。

4 結(jié)論

本調(diào)查首次對(duì)北京地區(qū)貓上呼吸道FCV和FHV感染做了調(diào)查。結(jié)果顯示，北京地區(qū)貓的上呼吸道FCV和FHV感染率較高，同時(shí)DLH較易發(fā)生FHV感染，波斯血統(tǒng)貓發(fā)生上呼吸道癥狀可能與病毒感染相關(guān)性不大。也顯示出FCV感染的癥狀與打噴嚏和口腔潰瘍相關(guān)。為進(jìn)一步研究病毒在貓上呼吸道感染所起作用提供理論基礎(chǔ)。

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