陳艷

（蘇州市吳中人民醫(yī)院婦產(chǎn)科 江蘇 蘇州 215128）

染色體疾病是各種原因所致染色體數(shù)目和（或）結(jié)構(gòu)異常的統(tǒng)稱，是一類嚴(yán)重的遺傳病，可累及多器官系統(tǒng)形態(tài)及功能異常，造成胚胎死亡或出生后發(fā)育遲緩、智力低下、多發(fā)畸形等問題，影響人口質(zhì)量[1]。目前，臨床尚無染色體疾病有效治療方法，因此產(chǎn)前診斷本病以預(yù)防出生缺陷成為臨床防治關(guān)鍵。無創(chuàng)染色體非整倍體基因檢測是近年國內(nèi)外廣泛使用及推廣的胎兒染色體疾病診斷技術(shù)[2]，它通過孕婦靜脈血為樣本得到胎兒遺傳信息，對胎兒安全無創(chuàng)。文章現(xiàn)以我院近年收治孕婦為例，分析探討無創(chuàng)染色體非整倍體基因檢測的臨床應(yīng)用價值，具體報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

以2016年1月—2017年12月于我院行產(chǎn)前檢查的311例孕婦為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）單胎妊娠；（2）孕中期；（3）知曉本研究目的并自愿配合研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）孕婦自身染色體異常；（2）近期異體輸血；（3）既往干細(xì)胞治療史；（4）臨床資料不全。入選孕婦年齡18～45歲，平均（29.3±8.7）歲；孕周13～24周，平均（18.2±5.1）周

1.2 方法

全部孕婦均于抽取外周靜脈血液樣本5ml置于抗凝采血管中，常規(guī)送檢實(shí)驗(yàn)室。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，樣本于上機(jī)離心10min（速率2000r/min，半徑12cm，溫度4℃），取血漿置于微型離心管中，靜置一段時間后繼續(xù)上機(jī)離心10min（參數(shù)同上），去除細(xì)胞及殘留碎片，取無細(xì)胞的血漿置于-80℃冰箱保存，然后以高通量測序儀檢測血漿DNA，測定染色體核酸片段數(shù)量，生物信息學(xué)分析各染色體對應(yīng)覆蓋深度值并轉(zhuǎn)化為風(fēng)險指數(shù)，以此為據(jù)判斷胎兒染色體情況。檢測結(jié)果示正常的孕婦予以隨訪，胎兒娩出及3個月后常規(guī)檢查；異常者超聲定位經(jīng)腹羊膜腔穿刺，抽取適量羊水，常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)G顯帶，參照ISCN2009相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)及核型分析，確診染色體疾病者予以引產(chǎn)。以羊膜腔穿刺胎兒染色體核型分析結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，評價無創(chuàng)染色體非整倍體基因檢測診斷染色體疾病的準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

以SPSS17.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料±標(biāo)準(zhǔn)差表示，t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

311例孕婦無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒染色體非整倍體基因檢測結(jié)果示，308例染色體數(shù)目正常，3例染色體數(shù)目異常，包括21-三體綜合征2例、18-三體綜合征1例，異常檢出率0.96%。無創(chuàng)基因檢測示正常孕婦隨訪至分娩，常規(guī)檢查未見新生兒染色體疾病，異?；颊邚?fù)行羊膜腔穿刺胎兒染色體核型分析，診斷結(jié)果均與無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒染色體非整倍體基因檢測結(jié)果一致，以此為金標(biāo)準(zhǔn)，無創(chuàng)染色體非整倍體基因檢測診斷染色體疾病準(zhǔn)確率100%。

3.討論

染色體非整倍體指染色體中缺少或額外增加一條或多條染色體，主要包括13三體綜合征（Patau綜合征）、18三體綜合征（愛德華氏綜合征）、21-三體綜合征（唐氏綜合征）等，其中以21-三體綜合征最為常見，由生殖細(xì)胞減數(shù)分裂過程中胎兒遺傳獲得三條21號染色體所致，流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)發(fā)生率約占出生嬰兒的1.5‰，實(shí)際水平更高。染色體非整倍體屬基因失衡范疇，發(fā)病與多因遺傳、孕婦年齡、環(huán)境因素等有關(guān)，是導(dǎo)致胚胎停育、流產(chǎn)、胎兒缺陷的主要原因之一，也是小兒先天性發(fā)育異常的重要影響因素，因此，早期確診此類疾病并適時引產(chǎn)是減少缺陷兒出生、保證母體安全、提高人口質(zhì)量的關(guān)鍵。

既往，臨床診斷此類疾病主要采用血清學(xué)聯(lián)合超聲診斷檢查的方法，前者假陽性率高，檢出率低，特異性較差，后者存在診斷延遲問題，介入性穿刺取羊水、臍血進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)雖診斷敏感，準(zhǔn)確性高，但對胎兒有創(chuàng)，重復(fù)性較差，臨床推廣受限。近年，臨床研究發(fā)現(xiàn)母體血漿中含有胎兒游離的脫氧核糖核酸（DNA），胎兒染色體異常會造成母體外周血漿游離DNA含量及片段結(jié)構(gòu)的微量變化，為無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒染色體非整倍體基因檢測奠定了基礎(chǔ)[3]。該項(xiàng)檢測技術(shù)僅需取孕婦少量外周靜脈血，利用新一代DNA測序技術(shù)對染色體進(jìn)行生物信息分析，可獲得胎兒遺傳信息，從而為臨床判斷胎兒染色體非整倍體疾病提供基因?qū)W依據(jù)。本次臨床研究中，3例無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒染色體非整倍體基因檢測異常，復(fù)行羊膜腔穿刺胎兒染色體核型分析得到確診，符合率100%，與文獻(xiàn)報道結(jié)果一致[4]，其應(yīng)用對胎兒安全無創(chuàng)，可重復(fù)性好，適用于產(chǎn)前廣譜篩查，但值得注意的，其檢測結(jié)果受母源性等因素影響可能出現(xiàn)假陰性和假陽性的可能[5]，因此仍需加強(qiáng)對母嬰隨訪并以胎兒染色體核型分析結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，以確保診斷準(zhǔn)確性，更好為臨床干預(yù)提供依據(jù)參考。

綜上所述，產(chǎn)前基因檢測對胎兒染色體非整倍體疾病具有良好的診斷價值，簡單易行、安全無創(chuàng)，是減少新生兒出生缺陷的有效產(chǎn)前篩查手段，對提高人口質(zhì)量具有積極作用，值得臨床推廣。