李冬梅 呂復兵 陳和明 趙超藝 劉小飛 朱根發(fā)

摘 要 ‘紅霞兜蘭是以‘帶葉兜蘭為母本、‘同色兜蘭為父本，通過人工授粉雜交育成的F1新品種，屬斑葉類，抗性強，花期3～5月，開花期長達50～60 d；花梗長5.5～7.8 cm，紫褐色，披白色短柔毛；花1～2朵，直徑10～12 cm，紫紅色具紫褐色斑點；中萼片寬卵形，長3.5～4.3 cm，寬3.2～4.0 cm，紫紅色，邊緣具淡黃色暈和紫褐色斑點；合萼片寬卵形，稍小于中萼片，長3.0～3.5 cm，寬2.5～3.0 cm，淡黃白色，具深淺不一的紫紅色斑點或斑塊；花瓣橢圓形，邊緣波狀具白色緣毛，長5.0～5.5 cm，寬3.5～4.0 cm；唇瓣兜狀，長3.5～4.5 cm，寬1.9～2.1 cm，黃褐色，具紫紅色斑點；退化雄蕊黃色，中心具紫褐色暈?；üｉL度中等，避免了母本花梗過長易倒伏和父本花梗過短貼著盆生長的缺點，具有較好的觀賞價值，對兜蘭屬植物資源的種質創(chuàng)新和保護具有重要意義。

關鍵詞 紅霞兜蘭 ；品種 ；選育

中圖分類號 S682.31 文獻標識碼 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2018.10.008

Abstract Paphiopedilum variety 'Hongxia' was a new F1 of a hand pollinated Paphiopedilum crossed with P. hirsutissimum as female parent and P. concolor as male parent. The new variety has spotted leaves with high resistance. This variety flowers for 50～60 days from March to May. The pedicel is 5.5～7.8 cm long， and purple-brown with white pubescence. The variety has one or two flowers， 10～12 cm in diameter， with purple-red and purple-brown spots in the flower（s）. Dorsal sepal， broadly ovate， 3.5～4.3 cm long， 3.2～4.0 cm wide， purple-red with yellowish halo and purple-brown spots at the margin. Synsepal broadly ovate， slightly smaller than dorsal sepal， 3.0～3.5 cm long， 2.5～3.0 cm wide， yellowish white with dark purple spots or patches. Petals elliptic， margin wavy with white margin hairs， 5.0～5.5 cm long， 3.5～4.0 cm wide. Lip， deeply pouched， 3.5～4.5 cm long， 1.9～2.1 cm wide， yellowish-brown with purple-red spots. The staminode is yellow with purple-brown halo at the center. The pedicel is medium in length， which avoids the disadvantages of slope of long female pedicel and the attachment of short male pedicel to the basin. The new variety has good ornamental value， and has great influence on the innovation and protection of germplasm resources of the genus Paphiopedilum.

Keywords Paphiopedilum variety Hongxia ； variety ； breeding

兜蘭，是蘭科（Orchidaceae）兜蘭屬（Paphiopedilum）植物的統(tǒng)稱。其花期持久，花色艷麗，花型奇特，具有很高的觀賞和經濟價值[1]。兜蘭主要分布于亞洲熱帶地區(qū)至太平洋一些島嶼，為陸生蘭，少數(shù)為附生蘭。中國是世界上兜蘭屬植物最豐富的國家之一[1]。由于人們對兜蘭野生資源的過度采挖，兜蘭已成為世界上最瀕危的植物物種之一，所有野生兜蘭種類均被列入《瀕危野生動植物種國際貿易公約》附錄Ⅰ而被禁止貿易。兜蘭雜交育種對滿足市場需求和對野生兜蘭植物資源的保護具有重要意義[1-8]。

英國皇家園藝學會（Royal Horticultural Society，簡稱RHS）是世界上權威的蘭花新品種登錄機構，該機構只登錄首次育成的蘭花屬間和種間雜交種。由于以‘帶葉兜蘭為母本和‘同色兜蘭為父本的雜交種之一Paph. Kamioka已于2007在RHS登記，本研究以‘帶葉兜蘭為母本和‘同色兜蘭為父本的雜交種將不能再在RHS網站登記。因此，本文僅對兜蘭新品種‘紅霞兜蘭的選育過程及栽培技術特點闡述。

1 材料與方法

1.1 材料

母本‘帶葉兜蘭（圖1），屬綠葉類，葉帶形或線形，花單朵，較大，直徑9～12 cm，紫褐色為主，花期4～5月，單株花期30～50 d，環(huán)境適應性較強，抗逆性較強。

父本‘同色兜蘭（圖2），屬斑葉類，葉矩形至狹橢圓形，葉背面具極密集的紫點或完全紫色，花1～2朵，直徑5～7 cm，淡黃色或近黃色，具紫色細斑點，周年開花，單株花期35～45 d，環(huán)境適應性強，抗逆性強。

1.2 方法

1.2.1 人工授粉

2014年4月中下旬，用滅菌牙簽采集父本的花粉授于母本的柱頭上，母本‘帶葉兜蘭在花朵盛開7 d內進行人工授粉，授粉前先用剪刀剪去母本和父本的唇瓣，將‘同色兜蘭的花粉授于‘帶葉兜蘭的柱頭上。

1.2.2 雜交蒴果的保存

采集的蒴果裝于尼龍網袋中，保存于4℃冰箱5 d。

1.2.3 雜交蒴果的消毒

將4℃處理過的蒴果，在超凈工作臺上用棉球蘸取70%酒精擦拭蒴果表面晾干后，用0.1%升汞溶液消毒25 min，滅菌水沖洗4次。

1.2.4 無菌播種與原球莖誘導

用刀片切開消毒的蒴果，將褐色粉末種子接種到種子萌發(fā)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25～30℃，光照強度為2 000～2 300 lx，光照時間控制為14 h/d；所述的種子萌發(fā)培養(yǎng)基成分為1/6 MS、6-芐氨基腺嘌呤2.0 mg/L、萘乙酸0.50 mg/L、椰汁15.0%、香蕉汁15.0%、活性炭1.0 g/L、蔗糖30 g/L、卡拉膠粉9.5 g/L，pH 5.6。培養(yǎng)基滅菌條件為125℃，40 min。發(fā)芽率=（發(fā)芽的種子數(shù)/播種的種子數(shù)）×100%。

1.2.5 壯苗及生根培養(yǎng)

將原球莖及芽混合體接種在壯苗及生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25～30℃，光照強度為2 000～2 300 lx，光照時間控制為14 h/d；所述的壯苗及生根培養(yǎng)基成分為1/6 MS、萘乙酸0.50 mg/L、椰汁15.0%、香蕉汁15.0%、活性炭1.5 g/L、蔗糖30 g/L、卡拉膠粉8.5 g/L，pH 5.6。培養(yǎng)基滅菌條件為125℃，40 min。

1.2.6 煉苗移栽

當小苗植株長至4～7 cm高時，2015年9月，將培養(yǎng)瓶轉移至溫室，在溫室自然光照下煉苗10 d，取出瓶苗，洗凈根部培養(yǎng)基，百菌清溶液消毒后，移栽到體積比蘭石∶陶粒為3∶2的混合基質中。移栽成活率達85%；百菌清溶液消毒是用0.3%的百菌清溶液浸泡30 min。

1.2.7 大棚種植與病蟲害防治

移栽5 d開始施水溶性的平衡肥，每10 d施肥1次，噴施藥劑預防病蟲害；每月用清水沖洗栽培基質1次。移栽后前6個月為小苗管理期，待小苗長出新根，更換栽培杯，施肥方式同上。植株進入大苗期后，進行水、肥、光、溫度和病蟲害管理調控，保持通風透氣遮陰，濕度在70～85%，溫度在20～32℃條件；如果溫度高于32℃，用風機和水簾降溫?；ㄑ砍霈F(xiàn)后，要進行花期的水、肥、光、溫和病蟲害的管理。

2 結果與分析

2.1 選育過程

授粉后120 d，將基本成熟而未開裂的蒴果作為外植體（圖3）；蒴果消毒后播種原球莖誘導培養(yǎng)基，培養(yǎng)90 d，形成原球莖及芽混合體（圖4），雜交種子萌發(fā)率達90%以上（一共播種10瓶培養(yǎng)基，每瓶播種種子數(shù)100粒，發(fā)芽數(shù)在90～95，總種子發(fā)芽率達90%以上）；再培養(yǎng)210 d，長成帶2～4條根，2～4片葉的完整植株（圖5）。大棚種植2.5年后，進行開花類型的兜蘭新品種選擇。從中選育出類型之一，在2018年3～5月初次開花，如圖6所示，于2018年6月將選育出的新類型命名為‘紅霞兜蘭。

2.2 品種特征特性

‘紅霞兜蘭單株花期50～60 d，花期在3～5月，花為紫紅色，花瓣有紫褐色斑點。‘紅霞兜蘭植株株形、花形、花色和花梗長等性狀介于兩個親本之間（圖6），其與父母本的主要區(qū)別特征見表1?！t霞兜蘭植株叢生，單株有葉5～9片；開花株平均株高9.5 cm，株幅27.5 cm，倒二葉葉長11～12 cm，葉寬2.5～2.8 cm。葉基部具紫紅色斑點，葉面具深淺綠色相間的網格斑，葉背面綠色?；üｉL5.5～7.8 cm，紫褐色，披白色短柔毛；花1～2朵，直徑10～12 cm，紫紅色，具紫褐色斑點；中萼片寬卵形，長3.5～4.3 cm，寬3.2～4.0 cm，紫紅色，邊緣具淡黃色暈和紫褐色斑點；合萼片寬卵形，稍小于中萼片，長3.0～3.5 cm，寬2.5～3.0 cm，淡黃白色，具深淺不一的紫紅色斑點或斑塊；花瓣橢圓形，邊緣波狀具白色緣毛，長5.0～5.5 cm，寬3.5～4.0 cm；唇瓣兜狀，長3.5～4.5 cm，寬1.9～2.1 cm，黃褐色，具紫紅色斑點；退化雄蕊黃色，中心具紫褐色暈。

2.3 繁殖及栽培技術要點

選擇健康的親本進行人工授粉雜交，收取蒴果后，采用組織培養(yǎng)無菌播種的方式進行。將裝有瓶苗的培養(yǎng)瓶置于溫室中煉苗10～15 d，取出瓶苗，洗凈根部培養(yǎng)基，0.1%～0.3%的百菌清溶液浸泡30～40 min，取出晾干后移栽到蘭石體積比∶陶粒=（1～3）∶（1～2）的混合基質中；需用雙層遮陰網遮陰。蘭石和陶粒用清水浸泡3～4 h至充分吸水后，再用清水沖洗除去殘渣和塵泥，晾曬至1～2成干。移栽成活率達85%以上。

移栽5～7 d開始施肥。選擇水溶性的平衡肥（氮∶磷∶鉀=20∶20∶20），以1 000～1 500倍濃度，每10～15 d基部澆灌施肥1次；為防栽培基質中鹽分過高，每月用清水淋洗栽培基質1次，淋洗方法同施肥方法。移栽后前6個月為小苗管理期，待小苗長出新根，更換栽培杯，施肥方式同上。植株進入大苗期后，施用高磷鉀肥（氮∶磷∶鉀=10∶20∶30），施用方式、濃度和次數(shù)同上。小苗和大苗期保持通風透氣遮陰，濕度在70～85%，溫度在20～32℃條件。換盆時間宜選擇3～5月和9～10月，健康的植株可直接轉入較大盆中，病株可用70%酒精擦拭過的剪刀剪去老根和病葉，清除基質，將修理好的植株用0.1%～0.3%的百菌清溶液浸泡30～40 min后，放在陰涼處晾干后種植。

病害的防治是每月分別噴灑50%的多菌靈可濕性粉劑800～1 000倍1～2次，70%的甲基托布津可濕性粉劑800～1 000倍1～2次；蟲害的防治是將40%的氧化樂果乳油800～1 000倍和80%的敵敵畏800～1 000倍交替噴施，防治菜蛾和蝸牛，每月噴施1～2次。

3 討論與結論

兜蘭屬植物的雜交育種由于在自然條件下受種子萌發(fā)條件的限制，發(fā)展較緩慢，而采用普通的無菌播種技術也存在著種子萌發(fā)率低和周期長的困難?！畮~兜蘭人工同種異株授粉的種子播種在1/2 MS、MS、RE、VW、‘花寶1號、1/4 MS的基本培養(yǎng)基上，1/2 MS和RE的基本培養(yǎng)基上種子萌發(fā)率高[9-12]；‘帶葉兜蘭授粉后120～150 d的種子萌發(fā)率高[9-10，13]?！堤m人工同種異株授粉的種子播種在1/2 MS和1/4 MS的基本培養(yǎng)基上，種子萌發(fā)率高；同時，‘同色兜蘭授粉后210 d的種子萌發(fā)率最高[14-15]。因此，不同的兜蘭品種的最佳種子萌發(fā)培養(yǎng)基和最佳授粉后果莢的采集時間也不同。

筆者經改變基本培養(yǎng)基的成分，將基本培養(yǎng)基調成1/6MS，再在其中添加椰汁15.0%、香蕉汁15.0%、6-芐氨基腺嘌呤2.0 mg/L、萘乙酸0.50 mg/L、活性炭1.0 g/L、蔗糖30 g/L和卡拉膠粉9.5 g/L，以‘帶葉兜蘭為母本、‘同色兜蘭為父本的雜交蒴果種子在此培養(yǎng)基上萌發(fā)率達90%以上。推測可能是1/6 MS的鹽離子濃度低，有利于種子的萌發(fā)，而其中附加物椰汁和香蕉汁，也為種子的萌發(fā)提供必需的物質基礎，其具體的作用機理需要做進一步探究。在已成功報道的兜蘭種子萌發(fā)的培養(yǎng)基中，一般都有附加物椰汁或香蕉汁[5，10-12，14-15]。已報道的兜蘭新品種的選育時間在3～5年[5-8]。本研究的選育時間為4年，與已報道的兜蘭新品種選育的時間長一致。

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