趙婉，張穎

珠海市婦幼保健院病理科，廣東珠海 519000

子宮內(nèi)膜癌（endometrial cancers，EC）是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，且發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，明確其發(fā)病機(jī)制將可能成為達(dá)到治療目的的根本途徑。近年來(lái)研究表明，miRNA可通過(guò)調(diào)控其靶基因參與的信號(hào)通路，進(jìn)而影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移，其發(fā)揮著與癌基因或抑癌基因類(lèi)似的作用。并且近年來(lái)的眾多研究表明，miRNA可通過(guò)調(diào)節(jié)靶基因通路增強(qiáng)化療藥物的療效，這為臨床治療子宮內(nèi)膜癌提供了新思路及新方法的可能性。

1 miRNA介紹

微小核糖核酸（microRNA,miRNA）是一種廣泛存在的重要的由19～25個(gè)氨基酸組成的內(nèi)源性非編碼RNA。自L(fǎng)ee等[1]在秀麗隱桿蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)首個(gè)miRNA后，現(xiàn)已在人類(lèi)中發(fā)現(xiàn)1 800多個(gè)前體miRNA及2 500多個(gè)成熟miRNA[2]。 miRNA通過(guò)與靶 mRNA 的 3’端非編碼區(qū)（3’-untranslation region,3’-UTR）堿基互補(bǔ)配對(duì)特異性的結(jié)合，使靶mRNA降解或抑制其翻譯，而導(dǎo)致靶基因的轉(zhuǎn)錄后沉默，從而參與轉(zhuǎn)錄后水平的基因調(diào)控[3]。包括惡性腫瘤在內(nèi)的多種疾病的發(fā)生與miRNA層面的基因調(diào)控網(wǎng)衰弱有關(guān)。

2 miRNA與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系

子宮內(nèi)膜癌是最常見(jiàn)的女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，根據(jù)臨床和病理特征可分為雌激素依賴(lài)型（Ⅰ型）和非雌激素依賴(lài)型（Ⅱ型 ），80%以上的病例為Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌，組織學(xué)分類(lèi)大部分為內(nèi)膜樣癌，少數(shù)為黏液樣癌[4]。目前，研究表明miRNA在癌組織中的表達(dá)不同于正常組織，這種表達(dá)模式與子宮內(nèi)膜癌的致癌模式及其轉(zhuǎn)移和侵襲相關(guān)。在包括子宮內(nèi)膜樣腺癌及乳頭狀癌在內(nèi)的多種類(lèi)型的子宮內(nèi)膜癌中同樣存在miRNA的異常表達(dá)[5]。

在子宮內(nèi)膜癌中， 包括 miR-185、miR-106a、miR-181a、miR-210、miR-423、miR-103、miR-107、miR-let7c、miR-205、miR-449和miR-429在內(nèi)的miRNA表達(dá)上調(diào)并參與腫瘤的發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移[6-8]。miR-7在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)上調(diào)，并且使用抗miRNA抗體使miR-7表達(dá)下調(diào)可抑制子宮內(nèi)膜癌的侵襲及癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移[9]。叉頭框（Forkhead box,Fox）基因廣泛存在于從酵母到哺乳動(dòng)物中，其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物FOXO1是磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路下游的靶點(diǎn)，在正常子宮內(nèi)膜中調(diào)節(jié)細(xì)胞周期性分化和凋亡。在子宮內(nèi)膜樣腺癌中，miR-27通過(guò)其產(chǎn)物降低FOXO1的表達(dá)破壞子宮內(nèi)膜的穩(wěn)態(tài)，使細(xì)胞增殖失調(diào)控，從而促進(jìn)腫瘤的形成。

DNA甲基化是一種可逆的表觀(guān)遺傳學(xué)修飾方式。生物體在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶 （DNA methytransferase,DNMT）的催化下，將S-腺苷甲硫氨酸 （S-Adenosylmethionine，SAM）提供的甲基共價(jià)結(jié)合到特定堿基上的過(guò)程被稱(chēng)為DNA甲基化。研究表明，基因組正常而發(fā)生甲基化的改變與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān) 。目前發(fā)現(xiàn)在子宮內(nèi)膜癌進(jìn)展過(guò)程的DNA甲基化中也有miRNA的參與。在子宮內(nèi)膜癌中，DNA甲基化及組蛋白乙?；筸iR-129-2表達(dá)上調(diào)，從而抑制癌細(xì)胞的增殖。miR-152的表達(dá)受DNMT1調(diào)節(jié)在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)下調(diào)[9-11]。轉(zhuǎn)錄因子FOXC1（Fordhead box C1）作為miR-204的靶基因之一可調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜癌衍生細(xì)胞HEC1A的轉(zhuǎn)移和浸潤(rùn)。miR-204的表達(dá)下調(diào)引起FOXC1的過(guò)表達(dá)，并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲[12]。miR-30c通過(guò)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)移性腫瘤抗原1（metastatic tumor antigen 1，MTA1）抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖，并且miR-30c下調(diào)可能涉及Ⅰ型和Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌[13-14]。miR-302可抑制癌細(xì)胞增殖，使其處于增生過(guò)程的G2/M階段，從而抑制多種腫瘤[15]。 miR-302a、miR-302b、miR-302c 在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)低于正常子宮內(nèi)膜組織，并且在不同臨床分期、組織學(xué)分化程度及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的子宮內(nèi)膜癌組織中，表達(dá)也不同[16-18]。

3 miRNAs作為生物學(xué)標(biāo)志物在子宮內(nèi)膜癌中的應(yīng)用

Lawrie等首次發(fā)現(xiàn)腫瘤特異性miRNA是有效的生物標(biāo)記物，并隨后增進(jìn)了利用miRNA作為生物標(biāo)記物的發(fā)展。多種miRNA特異性表達(dá)于特定癌癥中，并有可能作為生物標(biāo)志物。例如，has-let-7、has-let-7a-2及has-miR-155與肺癌，has-miR-125b與肝細(xì)胞癌，miRNA-205與宮頸癌等[19]。因此分析miRNA可能比分析20 000余種mRNA能更準(zhǔn)確地對(duì)癌癥進(jìn)行分類(lèi)。雖然大多數(shù)子宮內(nèi)膜癌患者被診斷為早期臨床階段，但是在子宮內(nèi)膜癌晚期患者中，5年生存率很低，僅為10%～29%[20]。因此，需要發(fā)現(xiàn)一個(gè)用于子宮內(nèi)膜癌早期診斷的特異性的標(biāo)記物[21]。例如，miR-155與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)、進(jìn)展、分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[22]，并且血清中miR-155在正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜樣腺癌及其他組織類(lèi)型中的表達(dá)不同。

目前發(fā)現(xiàn)，包括miR-125b在內(nèi)的很多miRNA有助于子宮內(nèi)膜癌的診斷[23]。miR-125b在Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中的表達(dá)明顯高于Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌。miR-194在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)明顯減少，這種減少與腫瘤的分期及預(yù)后有關(guān)[24]。

4 miRNA在子宮內(nèi)膜癌治療中的應(yīng)用

miRNA與癌癥有著密切的關(guān)系，因此可能也有助于治療癌癥。目前已提出應(yīng)用miRNA做為治療手段的可能性及探索。第一種方法補(bǔ)充在腫瘤中表達(dá)下調(diào)的miRNA。在前列腺癌骨轉(zhuǎn)移的小鼠模型中，補(bǔ)充miR-16可減少局部腫瘤的增殖及明顯抑制骨轉(zhuǎn)移，而且無(wú)不良反應(yīng)。這表明補(bǔ)充那些表達(dá)下調(diào)的miRNA可取得治療效果[25]。同樣的，管理miR-143也可抑制骨肉瘤肺轉(zhuǎn)移小鼠模型中的轉(zhuǎn)移[26]。第二種方法是抑制那些在腫瘤中過(guò)表達(dá)的miRNA的表達(dá)水平。在子宮內(nèi)膜癌中miR-200b、miR-200c及miR-429的表達(dá)上調(diào)可抑制轉(zhuǎn)錄因子AP-2α，并且其表達(dá)率與順鉑耐藥呈正相關(guān)。但是單核苷酸多態(tài)性（rs1045385A＞C）可降低AP-2α的作用并加強(qiáng)順鉑的敏感性[27]。miRNA-199a-3p與阿霉素聯(lián)合使用可抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖并促進(jìn)其凋亡[28]。

miRNA自身也可做為一種增加抑癌基因表達(dá)或抑制癌基因表達(dá)的方法用于癌癥治療。調(diào)控miR-152（一種抑癌性miRNA）在體外及體內(nèi)均有明顯的抑癌作用[10]。miRNA穩(wěn)定存在于各種組織及器官中，因此應(yīng)該相對(duì)易于通過(guò)血管運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞及其他器官。但是，目前沒(méi)有一種miRNA可用于臨床實(shí)踐，其中一部分原因是miRNA的應(yīng)用依賴(lài)于有效的、癌細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)運(yùn)。由于短干擾RNA（siRNAs）與miRNA的結(jié)構(gòu)相似，因此siRNA的轉(zhuǎn)運(yùn)方法應(yīng)該也可用于miRNA，,納米技術(shù)可用于增強(qiáng)miRNA的穩(wěn)定性，脂質(zhì)體-聚陽(yáng)離子透明質(zhì)酸（LPH）修飾的單鏈抗體片段（scFv）被用于將miRNA及siRNA轉(zhuǎn)運(yùn)入癌細(xì)胞并使靶基因（c-Myc、MDM2及VEGF）表達(dá)下調(diào)。靜脈注射含人源化單克隆抗體GC4、miR-34a及兩種siRNA的納米顆粒也導(dǎo)致其在癌細(xì)胞中的明顯累積并抑制靶基因的表達(dá)[29]。

這些結(jié)果表明應(yīng)用抗體納米技術(shù)可將miRNA特異性地轉(zhuǎn)運(yùn)到癌細(xì)胞并被癌細(xì)胞表面標(biāo)記物識(shí)別，以及聯(lián)合應(yīng)用siRNA和miRNA可以提高基因調(diào)控效率。與分子靶向藥物相比，miRNA的效果相對(duì)溫和，但是miRNA可抑制多個(gè)靶分子的表達(dá)，同時(shí)在正常細(xì)胞中引起較少的不良反應(yīng)。

5 小結(jié)

子宮內(nèi)膜癌是一組發(fā)生于子宮內(nèi)膜的上皮性惡性腫瘤，好發(fā)于圍絕經(jīng)期及絕經(jīng)后婦女，近年來(lái)發(fā)病率呈年輕化及上升趨勢(shì)。雖然子宮內(nèi)膜癌有陰道排液增多或陰道出血等癥狀，但許多患者發(fā)現(xiàn)時(shí)仍處于晚期，增加了其病死率。miRNA自發(fā)現(xiàn)至今僅20余年，卻是RNA研究領(lǐng)域的重大突破，目前已明確miRNA在子宮內(nèi)膜癌的形成、轉(zhuǎn)移等多方面發(fā)揮重要作用，癌細(xì)胞包含表達(dá)上調(diào)或表達(dá)下調(diào)的腫瘤特異性的miRNA。同時(shí)這些miRNA在癌組織中的表達(dá)模式與正常組織不同，可能作為子宮內(nèi)膜癌的生物學(xué)標(biāo)記物并對(duì)其治療有助。隨著對(duì)miRNAs研究的不斷深入，相信將來(lái)miRNAs可能成為一個(gè)有效的臨床應(yīng)用的新靶點(diǎn)。目前，關(guān)于miRNA的研究仍處于臨床應(yīng)用發(fā)展的前期階段，對(duì)于其在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其臨床價(jià)值還不甚明了，有待更多的深入性的研究來(lái)闡明。