劉懷阿， 張春梅， 呂 敏， 衛(wèi) 甜， 吉春明

(江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，江蘇揚(yáng)州 225007)

咪鮮胺為咪唑類高效、廣譜、低毒型殺菌劑，具有預(yù)防、保護(hù)和治療等多重作用。對(duì)多種作物子囊菌和半知菌引起的病害具有明顯的防效，它可以與大多數(shù)殺菌劑、殺蟲(chóng)劑、除草劑混用，均有較好的防治效果。對(duì)大田作物、水果蔬菜、草皮及觀賞植物上的多種病害具有治療和鏟除作用，如水稻稻瘟病、水稻紋枯病、油菜菌核病、小麥赤霉病、果樹(shù)蔬菜葉斑病、白粉病、銹病等[1]。

國(guó)內(nèi)眾多科研部門(mén)和農(nóng)藥生產(chǎn)企業(yè)都在研究開(kāi)發(fā)咪鮮胺類的復(fù)配制劑，以便能夠進(jìn)一步擴(kuò)大防治對(duì)象，提升使用效果，減少農(nóng)藥使用劑量及延緩病菌抗藥性的產(chǎn)生與發(fā)展。市售產(chǎn)品眾多，如咪鮮胺與烯唑嗎啉、咪鮮胺與三環(huán)唑、咪鮮胺與甲環(huán)唑、咪鮮胺與氟硅唑等在生產(chǎn)上得到了廣泛的應(yīng)用。江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所以咪鮮胺與戊唑醇作為原料，進(jìn)行了該混劑的生物活性測(cè)定以及田間對(duì)水稻紋枯病的防治試驗(yàn)。戊唑醇為三唑類廣譜、內(nèi)吸性殺菌劑，同樣具有保護(hù)、治療和鏟除三大功能，殺菌譜廣，持效期長(zhǎng)，主要用于防治小麥、水稻、蔬菜、果樹(shù)等作物上的多種真菌病害，在60多種作物上取得登記并廣泛應(yīng)用[2]。

1 材料與方法

1.1 生物活性測(cè)定

1.1.1 試驗(yàn)材料供試靶標(biāo) 小麥赤霉病病原禾谷鐮刀菌，由江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所保存并提供，將小麥赤霉病菌菌株接種至PDA培養(yǎng)基平板上，置于生物培養(yǎng)箱中，溫度在25～26 ℃條件下備用。試驗(yàn)藥劑：丙酮(分析純)；95% 咪鮮胺原藥，江蘇綠葉農(nóng)化有限公司提供；97%戊唑醇原藥，江蘇七洲綠色化工股份有限公司提供。

1.1.2 試驗(yàn)方法 參照NY/T 1156.2—2006《農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則 殺菌劑 第2部分：抑制病原真菌菌絲生長(zhǎng)試驗(yàn) 平皿法》，采用抑制菌絲生長(zhǎng)速率法[3]。

1.1.3 試驗(yàn)處理 藥液的配制：分別稱取一定量的咪鮮胺原藥與戊唑醇原藥，用丙酮溶液配制成100 μg/mL的母液備用。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)得知咪鮮胺與戊唑醇對(duì)小麥赤霉病菌的聯(lián)合毒力趨勢(shì)，設(shè)置咪鮮胺 ∶戊唑醇分別為5 ∶1、4 ∶1、3 ∶1、2 ∶1、1 ∶1(體積比)5組配比進(jìn)行測(cè)定，各單劑及各組混劑用0.1%吐溫80水溶液稀釋成5個(gè)系列濃度藥液。含藥平板的制備：在無(wú)菌條件下，依據(jù)上述藥液濃度從低到高定量吸取藥液加入含有定量融化PDA培養(yǎng)基的無(wú)菌錐形瓶中，充分搖勻，然后等量倒入4個(gè)直徑為9 cm的培養(yǎng)皿內(nèi)，制成5個(gè)系列濃度的含藥平板，咪鮮胺單劑及各配比測(cè)定濃度均為1、0.5、0.25、0.125、0.0625 μg/mL；戊唑醇單劑測(cè)定濃度為10.5、2.5、1.25、0.625 μg/mL，同時(shí)設(shè)置不含藥平板作空白對(duì)照，每處理重復(fù)4皿，即重復(fù)4次。接種：在無(wú)菌條件下，用直徑5 mm的滅菌打孔器沿已培養(yǎng)好的菌落邊緣切取菌餅，用已消毒的接種器將菌餅接種于不同處理培養(yǎng)基平板的中央，有菌絲一面朝下，置于25～26 ℃的生物培養(yǎng)箱中培育3 d后，調(diào)查測(cè)定結(jié)果。

1.1.4 數(shù)據(jù)記載與分析 培養(yǎng)到預(yù)定時(shí)間后，取出培養(yǎng)皿，采用卡尺以十字交叉法垂直測(cè)量2個(gè)菌落直徑(mm)，取其平均值作為該菌落的直徑。根據(jù)調(diào)查結(jié)果，由下列公式計(jì)算各處理對(duì)小麥赤霉病菌菌絲生長(zhǎng)抑制率：菌絲生長(zhǎng)抑制率=[1-(處理菌落直徑-5)/(對(duì)照菌落-5)]×100%。根據(jù)藥劑濃度對(duì)數(shù)值及對(duì)應(yīng)的菌絲生長(zhǎng)抑制率概率值作回歸分析，利用DPS分析軟件，計(jì)算出回歸方程，求出抑制孢子萌發(fā)50%的藥液濃度(EC50)、95%置信限及相關(guān)系數(shù)(r)。根據(jù)Warley法計(jì)算混劑的增效系數(shù)(SR)，從而評(píng)價(jià)藥劑混用的增效作用，即SR>1.5為增效作用，SR<0.5為拮抗作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用。增效系數(shù)(SR)計(jì)算公式如下：X=(PA+PB)÷(PA/A+PB/B)，SR=X/X1。式中：X為混劑的EC50(g/mL)理論值；PA為混劑中A的百分含量；PB為混劑中B的百分含量；A為混劑中A的EC50(g/mL)；B為混劑中B的EC50(g/mL)值；SR為混劑的增效系數(shù)；X1為混劑的EC50(g/mL)實(shí)測(cè)值。

1.2 田間藥效試驗(yàn)

1.2.1 試驗(yàn)對(duì)象 水稻栽培品種南粳9108，防治對(duì)象：水稻紋枯病。

1.2.2 供試藥劑 45%咪鮮胺·戊唑醇可濕性粉劑(WP)由江蘇揚(yáng)州綠源生化有限公司提供，25%咪鮮胺乳油(EC)為江蘇連云港市立本農(nóng)藥化工有限公司市售產(chǎn)品，43%戊唑醇懸浮劑(SC)為江蘇七洲綠色化學(xué)股份有限公司產(chǎn)品。

1.2.3 試驗(yàn)地概況 試驗(yàn)地點(diǎn)設(shè)在江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所良種繁育基地，試驗(yàn)田前茬為小麥，土質(zhì)為黏性土，肥力中等，pH值6.7。栽培方式為育苗移栽，水稻長(zhǎng)勢(shì)良好，常規(guī)肥水管理，水稻紋枯病常規(guī)中等發(fā)生，整個(gè)生育期不施其他農(nóng)藥。

1.2.4 試驗(yàn)處理 試驗(yàn)設(shè)6個(gè)處理，分別為：(1)45%咪鮮胺·戊唑醇 WP 750 g/hm2；(2)45%咪鮮胺·戊唑醇WP 900 g/hm2；(3)45%咪鮮胺·戊唑醇 WP 1 050 g/hm2；(4)25%咪鮮胺EC 900 mL/hm2；(5)43%戊唑醇SC 300 mL/hm2；(6)清水對(duì)照(CK)。每處理重復(fù)4次，小區(qū)面積30 m2，隨機(jī)區(qū)組排列，小區(qū)間筑埂隔開(kāi)，田間肥水管理一致。

1.2.5 施藥與調(diào)查方法 本試驗(yàn)用藥2次，使用華豐-16型背負(fù)式噴霧器，噴孔直徑1.3 mm，操作壓力3～4 kg/cm2，由低劑量到高劑量依次常規(guī)噴霧，用藥兌水750 L/hm2，于2016年7月20日水稻孕穗期第1次施藥、8月30日水稻抽穗期第2次施藥。調(diào)查方法：每處理定5個(gè)點(diǎn)，每點(diǎn)固定調(diào)查5叢，第2次施藥后14 d分別調(diào)查水稻總株數(shù)，各級(jí)病株數(shù)，計(jì)算病指及防效。

1.2.6 藥效計(jì)算方法 病情指數(shù)=∑[(各級(jí)病穗數(shù)×相對(duì)應(yīng)病級(jí)數(shù)值)/(調(diào)查總穗數(shù)×9)]×100%；防效=(空白對(duì)照區(qū)病情指數(shù)-藥劑處理區(qū)病情指數(shù))/空白對(duì)照區(qū)病情指數(shù)×100%。采用鄧肯氏新復(fù)極差法(DMRT)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 生物活性測(cè)定

根據(jù)室內(nèi)生物活性測(cè)定結(jié)果，咪鮮胺、戊唑醇以及二者復(fù)配劑對(duì)小麥赤霉病菌菌絲生長(zhǎng)具有較強(qiáng)的抑制作用，不同處理抑制孢子萌發(fā)50%的藥液濃度EC50為0.116 5～2.354 6 μg/mL(表1)。咪鮮胺與戊唑醇5個(gè)配比的增效系數(shù)SR≥0.5，表明咪鮮胺與戊唑醇復(fù)配沒(méi)有拮抗作用，復(fù)配可行；但不同配比，聯(lián)合作用表現(xiàn)有差異，其中咪鮮胺 ∶戊唑醇 2 ∶1 的增效系數(shù)SR最高，為1.58，表明具有增效作用(表2)。本試驗(yàn)是在室內(nèi)離體條件下進(jìn)行的，江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所揚(yáng)州綠源生化有限公司依據(jù)該試驗(yàn)結(jié)果配制成45%咪鮮胺·戊唑醇WP待試驗(yàn)使用。

2.2 田間藥效試驗(yàn)

藥劑45%咪鮮胺·戊唑醇WP防治水稻紋枯病效果見(jiàn)表3。使用45%咪鮮胺·戊唑醇WP 750、900、1 050 g/hm2第2次施藥后14d的防效分別為82.30%、85.75%、88.13%；對(duì)照藥劑25% 咪鮮胺EC 900 mL/hm2、43%戊唑醇SC 300 mL/hm2的防效分別為79.69%、82.35%(表3)，分析結(jié)果表明，45%咪鮮胺·戊唑醇WP高劑量、中劑量2個(gè)處理的防效沒(méi)有顯著性差異，但均顯著高于該藥劑低劑量處理的防效，同時(shí)高、中劑量2處理防效也顯著高于對(duì)照藥劑25%咪鮮胺EC 900 mL/hm2和43%戊唑醇SC 300 mL/hm2的防效。供試藥劑在本試驗(yàn)劑量范圍內(nèi)對(duì)試驗(yàn)作物水稻安全無(wú)藥害，對(duì)環(huán)境亦無(wú)不良影響。

表1 咪鮮胺、戊唑醇及其混劑對(duì)小麥赤霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果

表2 咪鮮胺與戊唑醇混配的聯(lián)合作用

表3 45%咪鮮胺·戊唑醇 WP防治水稻紋枯病田間防效

3 結(jié)論與討論

咪鮮胺與戊唑醇復(fù)配在室內(nèi)離體條件下，對(duì)小麥赤霉病菌菌絲生長(zhǎng)具有較強(qiáng)的抑制作用，其復(fù)配制劑在對(duì)小麥赤霉病田間試驗(yàn)防治效果有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

45%咪鮮胺·戊唑醇WP的本次田間藥效試驗(yàn)以水稻紋枯病作為防治對(duì)象。水稻紋枯病由立枯絲核菌感染致病，多在高溫、高濕條件下發(fā)生，南方稻區(qū)普遍危害嚴(yán)重，是水稻生產(chǎn)上的主要病害之一[4]。水稻紋枯病使水稻不能抽穗，或抽穗的秕谷較多，粒質(zhì)量下降。防治上除了選用良種、加強(qiáng)栽培管理、采用配方施肥技術(shù)、合理密植等[5]，化學(xué)防治是必不可少的。在目前抗紋枯病水稻品種缺乏的情況下，選擇適當(dāng)藥劑并采用合適的施藥方法是防治水稻紋枯病的重要措施[6]。

市場(chǎng)上防治水稻紋枯病的殺菌劑種類很多，比如井岡霉素、甲基硫菌靈、己唑醇、戊唑醇、噻呋酰胺、 氟環(huán)唑以及各類

復(fù)配劑。本研究田間試驗(yàn)結(jié)果表明，45%咪鮮胺·戊唑醇WP 900～1 050 g/hm2對(duì)水稻紋枯病具有較好的防治效果，生產(chǎn)上適宜推廣使用。建議防治水稻紋枯病使用45%咪鮮胺·戊唑醇WP 900～1 050 g/hm2于水稻發(fā)病初期第1次施藥，之后根據(jù)病情發(fā)展需要或間隔15～20 d再施藥1次；若紋枯病嚴(yán)重發(fā)生年份，建議與其他殺菌劑輪換交替使用，防治效果會(huì)更好，同時(shí)也有利于減緩抗藥性的產(chǎn)生。