周 文 曲湘勇 劉 華

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)沙410128；2.湖南文妹子現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技生態(tài)園有限公司，衡陽(yáng)421600;3.湖南美可達(dá)生物資源股份有限公司，長(zhǎng)沙 410128）

前言

現(xiàn)代動(dòng)物生產(chǎn)中普遍使用抗生素作為促生長(zhǎng)劑，但是抗生素的大量使用，導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性大幅提高，動(dòng)物組織殘留和環(huán)境污染問題日益嚴(yán)重，從而影響動(dòng)物源食品安全，并直接威脅人類健康和環(huán)境安全。在全球范圍內(nèi)禁用飼用促生長(zhǎng)抗生素是大勢(shì)所趨。2006年歐盟全面禁止了飼用促生長(zhǎng)抗生素的使用，我國(guó)也于2017年和2018年分別禁止硫酸粘桿菌素和喹乙醇在飼料作為促生長(zhǎng)劑使用。因此，開發(fā)新型安全、有效的飼用抗生素替代產(chǎn)品是目前動(dòng)物生產(chǎn)領(lǐng)域的重點(diǎn)課題。植物提取物因其天然來(lái)源，兼具營(yíng)養(yǎng)和藥物的雙重屬性，且不易產(chǎn)生耐藥性、無(wú)（低）殘留、毒副作用小、功能全面等優(yōu)勢(shì)，成為飼用抗生素替代品開發(fā)的重要資源。博落回散（商品名：美佑壯，Sangrovit）是從中草藥博落回果莢中提取的生物堿制成的散劑，主要成分為血根堿和白屈菜紅堿，是國(guó)家批準(zhǔn)的二類新中獸藥和中獸藥藥物飼料添加劑產(chǎn)品。博落回散的主要成分生物堿具有抗炎、抗菌、抗氧化、殺蟲、抗病毒、陣痛、消炎、改善肝功能等多方面的生物學(xué)活性，具備天然替抗產(chǎn)品的潛質(zhì)。本試驗(yàn)對(duì)比研究博落回散和金霉素對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能、血液生化指標(biāo)、腸道健康的影響，旨在評(píng)估博落回散替代飼用抗生素潛力，以期為博落回散替代飼用抗生素的應(yīng)用提供理論依據(jù)和參考。

1 材料與方法

（1）博落回散，規(guī)格 100g：0.375g，血根堿含量0.15%，由湖南美可達(dá)生物資源股份有限公司生產(chǎn)。

（2）金霉素預(yù)混劑，規(guī)格 100g：20g，由金河生物科技股份有限公司生產(chǎn)。

選取1日齡白羽肉雞300羽，隨機(jī)分為3組處理（對(duì)照組、金霉素組、博落回散組），每組10重復(fù)，每重復(fù)10羽。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，金霉素組飼喂基礎(chǔ)日糧+250g/t金霉素預(yù)混劑，博落回散組飼喂基礎(chǔ)日糧+400g/t博落回散。

基礎(chǔ)日糧配制選用常規(guī)玉米、豆粕、魚粉，參照NRC（1994）肉雞營(yíng)養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)制成顆粒飼料，基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

本試驗(yàn)在湖南文妹子現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技生態(tài)園有限公司養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行，飼養(yǎng)管理參照白羽肉雞的飼養(yǎng)管理手冊(cè)進(jìn)行，試驗(yàn)期間做好光照、溫度的控制，保持良好的通風(fēng)，定期消毒、清糞和打掃雞舍，按照免疫程序做好疫苗的免疫，觀察雞只的狀況，做好死淘記錄，自由采食、飲水，做好飼料采食記錄。

（1）血液樣品，于21日齡和42日齡，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1羽試驗(yàn)雞，心臟采血5ml，制備血清備用。

（2）腸道組織樣品，試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1羽試驗(yàn)雞，放血屠宰，分別取十二指腸、空腸、回腸腸斷，置于固型液中用于組織切片制作。取十二指腸、空腸、回腸置于PU管中用于腸斷組織抗氧化測(cè)定。

表1 基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平

（1）生長(zhǎng)性能指標(biāo)：分別于1日齡、21日齡和42日齡稱重、結(jié)料，以重復(fù)為單位計(jì)算生長(zhǎng)前期（1-21 日齡）、生長(zhǎng)后期（22-42 日齡）、生長(zhǎng)全期（1-42日齡）的平均日采食量、平均日增重和料肉比。

（2）血清生理生化指標(biāo)：對(duì)21日齡和42日齡血清樣品進(jìn)行分析，利用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清葡萄糖、尿素氮、尿酸、總蛋白、膽固醇、甘油三酯、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶的水平。

（3）血清抗氧化能力：對(duì)21日齡和42日齡血清樣品進(jìn)行抗氧化能力分析，利用抗氧化試劑盒分別檢測(cè)血清總過(guò)氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和丙二醛水平。

（4）腸道組織形態(tài)學(xué)：取出置于固型液中各腸段的組織樣品，常規(guī)脫水、石蠟處理、切片、HE染色后，利用Motic Images Advanced 3.2軟件，測(cè)量十二指腸、空腸、回腸腸壁厚度、絨毛高度、引窩深度，每張切片觀察10個(gè)視野，并計(jì)算絨毛高度/引窩深度值。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel2013進(jìn)行初步處理，再用軟件SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較和差異顯著性檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。以P＜0.01為差異極顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)，P＜0.05 為差異顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)，0.05＜P＜0.1 為呈升高或降低趨勢(shì)的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

由表2可知，試驗(yàn)前期（1-21日齡）日糧中添加博落回散具有提高白羽肉雞日增重的趨勢(shì) （P=0.087），并且顯著降低料肉比(P＜0.05)；試驗(yàn)后期（22-42日齡）和試驗(yàn)全期日糧中添加博落回散組白羽肉雞的料肉比顯著低于金霉素組合對(duì)照組(P＜0.05)，但是各組之間的采食量和日增重沒有顯著差異。

表2 博落回散和金霉素對(duì)白羽肉雞生產(chǎn)性能的影響

表3 博落回散和金霉素對(duì)42日齡肉雞血液生理生化的影響

由表3可知，博落回散組肉雞血清尿素氮水平顯著低于對(duì)照組和金霉素組（P＜0.05）；博落回散組血清尿酸水平相比于金霉素組和對(duì)照組有下降趨勢(shì)（P=0.083）；金霉素組血清膽固醇濃度相比于對(duì)照組和博落回散組有升高趨勢(shì)（P=0.063），而甘油三脂有下降趨勢(shì)（P=0.082）；日糧添加博落回散和金霉素對(duì)白羽肉雞血清葡萄糖、總蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶水平?jīng)]有影響。

由表4可知，日糧中添加金霉素顯著降低白羽肉雞21日齡時(shí)血清中總超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的水平（P＜0.05）；日糧中添加博落回散顯著降低白羽肉雞42日齡時(shí)血清中丙二醛濃度（P＜0.05）。

由表5可知，日糧中添加金霉素可以顯著降低十二指腸腸壁厚度（P＜0.001）；日糧添加博落回散可顯著降低空腸腸壁厚度（P＜0.019）；日糧添加博落回散和金霉素對(duì)回腸腸壁厚度沒有影響。博落回散組白羽肉雞十二指腸高度顯著高于金霉素組和對(duì)照組（P＜0.001），隱窩深度顯著低于對(duì)照組（P＜0.001），絨隱比顯著高于對(duì)照組（P＜0.001）。博落回散組白羽肉雞空腸絨毛高顯著高于對(duì)照組和金霉素組（P＜0.001），金霉素和對(duì)照組沒有差異；博落回散組肉雞空腸隱窩深度顯著低于對(duì)照組和金霉素組（P＜0.001），金霉素組隱窩深度顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）；博落回散組肉雞空腸絨隱比顯著高于對(duì)照組（P＜0.001），金霉素組與其他兩組差異不顯著。博落回散組肉雞回腸絨毛高度與對(duì)照組和金霉素組差異不顯著，但隱窩深度顯著低于對(duì)照組和金霉素組（P＜0.001），絨隱比顯著高于對(duì)照組（P＜0.001）。

表4 博落回散和金霉素對(duì)白羽肉雞血清抗氧化能力的影響

表5 博落回散和金霉素對(duì)白羽肉雞腸道組織形態(tài)的影響

3.討論

博落回散是從博落回植物中提取的血根堿和白屈菜紅堿制劑，是國(guó)家批準(zhǔn)的二類新中獸藥和藥物飼料添加劑產(chǎn)品。在歐洲博落回生物堿制劑Sangrovit于2004年注冊(cè)歐盟飼料添加劑，血根堿和白屈菜紅堿具有極強(qiáng)的抗炎、抑菌、抗腫瘤等生物活性，在歐洲主要作為飼用促生長(zhǎng)抗生素的替代產(chǎn)品，在豬、禽、反芻動(dòng)物、水產(chǎn)動(dòng)物上廣泛應(yīng)用。研究報(bào)道，日糧中添加血根堿和白屈菜紅堿制劑50ppm可顯著提高肉雞的采食量、日增重以及顯著改善料肉比。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，日糧中添加50ppm博落回散可以顯著改善試驗(yàn)全期的料肉比，并且試驗(yàn)前期日增重有提高趨勢(shì)（P=0.087），與上述研究結(jié)果一致。博落回散促生長(zhǎng)可能的機(jī)制是：（1）血根堿和白屈菜紅堿的抗炎活性，日糧添加博落回散提高了機(jī)體的抗炎閾值，節(jié)約了炎癥反應(yīng)的養(yǎng)分消耗；（2）博落回散提高氨基酸利用效率，促進(jìn)機(jī)體蛋白質(zhì)合成；（3）博落回散改善了腸道健康，提高了日糧養(yǎng)分利用率。

血液生理生化指標(biāo)是反應(yīng)機(jī)體代謝和健康狀態(tài)的中藥標(biāo)識(shí)物。本試驗(yàn)中，日糧添加博落回散顯著降低肉雞血清尿素氮濃度，金霉素和博落回散顯著降低肉雞血清尿酸水平，說(shuō)明博落回散能夠促進(jìn)機(jī)體氨基酸的代謝，促進(jìn)組織蛋白質(zhì)沉積，這一結(jié)果與Annabell Muhl等研究報(bào)道一致。本試驗(yàn)中，日糧添加博落回散與金霉素相比血清膽固醇水平有下降趨勢(shì)，說(shuō)明博落回散具有改善肉雞脂質(zhì)代謝的效果。Lee K W等研究報(bào)道日糧添加飼用促生長(zhǎng)抗生素阿維菌素肉雞的腹脂率顯著提高，而血根堿制劑組肉雞腹脂率沒有影響，也有研究報(bào)道日糧添加博落回散或血根堿制劑能夠提高肉雞肌肉脂肪酸含量，特別是單不飽和脂肪酸。本試驗(yàn)中日糧添加劑金霉素和博落回散制劑對(duì)肉雞血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶濃度沒有影響，說(shuō)明在50ppm博落回散和金霉素劑量下對(duì)肉雞肝臟和機(jī)體健康沒有影響。

小腸作為機(jī)體消化、吸收的主要場(chǎng)所，常常作為衡量動(dòng)物腸道健康的重要標(biāo)識(shí)，而小腸黏膜形態(tài)的完整性是保證動(dòng)物消化吸收功能的基礎(chǔ)。小腸絨毛高度越大，小腸的吸收面積就越大；腸絨毛寬度越大，隱窩深，消化吸收功能就越低；絨隱比值越大，消化吸收能力就越強(qiáng)。本試驗(yàn)中，日糧添加博落回散顯著改善十二指腸、空腸、回腸的形態(tài)學(xué)指標(biāo)，與前人的研究報(bào)道一致，說(shuō)明博落回散能夠改善肉雞腸道形態(tài)結(jié)果發(fā)育，從而提高肉雞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，促使肉雞生長(zhǎng)，而金霉素卻沒有這個(gè)效果。本試驗(yàn)中，日糧添加博落回散能夠顯著降低腸壁厚度，與Lee K W等的研究報(bào)道一致[1]。腸壁厚度與日糧養(yǎng)分消化利用率呈負(fù)相關(guān)，更薄的腸壁具有更高的養(yǎng)分轉(zhuǎn)運(yùn)效率。飼用促生長(zhǎng)抗生素的促生長(zhǎng)機(jī)理之一就是使動(dòng)物腸壁變薄，本試驗(yàn)中博落回散的使腸壁變薄的效果要優(yōu)于金霉素，說(shuō)明博落回散在調(diào)控腸道形態(tài)結(jié)果發(fā)育反面比金霉素更高效。

4.總結(jié)

本試驗(yàn)條件下，日糧中添加博落回散可以促進(jìn)肉雞日糧轉(zhuǎn)換效率的顯著提高，促進(jìn)日增重提高，可以改善腸道粘膜發(fā)育，提高機(jī)體抗氧化能力，具有比金霉素更優(yōu)的效果。博落回散具有較強(qiáng)的替抗?jié)摿?，可以在肉雞生產(chǎn)中替代促生長(zhǎng)抗生素使用。