關(guān)曉清，鄧毅峰，于秀華*

（1. 中國人民解放軍第208醫(yī)院，長春 130061；2. 長春中醫(yī)藥大學(xué)，長春 130117）

舒心顆粒由人參、柴胡、黃芩、法半夏、桂枝等十幾味藥材組成，常用于治療氣滯血瘀型冠心病，心律不齊，心絞痛，胸悶心悸，氣短腹脹[1]。黃芩中的黃芩苷具有抑菌、抗炎、抗病毒等作用[2]。為了有效確保產(chǎn)品質(zhì)量，本文采用HPLC法對舒心顆粒中黃芩苷進(jìn)行含量測定，以保證和控制產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性。

1 材料

1.1 儀器 LC-2010A型高效液相色譜儀（日本島津），

SPD-10AVP檢測器，十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18）色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），日本島津電子分析天平（AMW220D型），CAMAG型薄層色譜成像儀（瑞士CAMAG公司）。

1.2 藥品 黃芩苷對照品（批號：110715-201117）；甲醇為色譜純；本實(shí)驗(yàn)中所用對照藥材、黃芩苷對照品采購于中國藥品生物制品檢定研究院；乙醇為分析純；水為超純水；舒心顆粒為自制。

2 方法

2.1 色譜條件 色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相：甲醇-水-磷酸（ 45 : 55 : 0. 2）；檢測波長：280 nm；柱溫：室溫[3-4]。

2.2 溶液的制備

2.2.1 供試品溶液 取舒心顆粒適量，研細(xì)，樣品取樣量約0.5 g，溶劑加入量為100 mL，提取方法為超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz），30 min。取續(xù)濾液，即得[5]。

2.2.2 對照品溶液 取黃芩苷對照品約10 mg，精密稱定，加甲醇溶解，用0.45 μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，作為對照品溶液。

2.2.3 陰性樣品溶液 按照處方、制法、供試品溶液制備方法制成不含黃芩藥材的陰性樣品溶液。

3 結(jié)果

3.1 專屬性考查 按照預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索的色譜條件測定供試品溶液、對照品溶液、陰性對照品溶液，測得色譜圖，結(jié)果表明，陰性對照液色譜在與黃芩苷對照品峰相應(yīng)的保留時(shí)間處無色譜峰，表明無干擾，方法可行[6-7]。3.2 檢測波長的確定 根據(jù)紫外吸收圖的最大吸收峰以及現(xiàn)行版《中國藥典》和有關(guān)文獻(xiàn)，確定檢測波長為280 nm[8]。

3.3 系統(tǒng)適用性驗(yàn)證 應(yīng)用預(yù)選高效液相色譜測定時(shí)的流動(dòng)性比例、測定波長等條件，對對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，其理論板數(shù)、分離度、保留時(shí)間、拖尾因子均符合要求，表明此色譜條件可行[9]。

3.4 方法學(xué)考察

3.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 按照系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)條件，分別設(shè)定對照品溶液進(jìn)樣體積為2.0、4.0、8.0、10.0、12.0、15.0、20.0 μL，測定，根據(jù)峰面積積分值及對照品濃度進(jìn)行回歸方程計(jì)算[10-11]。黃芩苷回歸方程：Y = 3 278 245.86X+20 911.02，r2= 0.999 9，線性范圍：0.188 ～ 1.880 μg。

3.4.2 中間精密度試驗(yàn) 取配置好的黃芩苷對照品溶液，按照系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)條件，設(shè)定進(jìn)樣量10 μL，分別用2名實(shí)驗(yàn)人員操作測定、在2臺不同高效液相色譜儀、同一人不同時(shí)間測定[12]，計(jì)算峰面積積分值的偏差，結(jié)果RSD為0.37%。試驗(yàn)結(jié)果表明，精密度較好。3.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批樣品，按照供試品溶液制備方法制成待測溶液，測定，第1針進(jìn)樣時(shí)間設(shè)定為0 h，然后與第1針相隔2、4、8、12、24 h分別進(jìn)樣[13-14]，進(jìn)樣量10 μL，依法測定，RSD為0.42%。

3.4.4 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取樣品測定6次[15]，結(jié)果樣品中黃芩苷的含量分別為 20.75、21.74 、20.79 、21.03 、21.21 、20.99 mg，RSD為1.72%。

3.4.5 回收率試驗(yàn) 取已知含量（21.085 mg/g）的樣品粉末0.25 g，6份，精密稱定，加入對照品溶液15 mL（濃度分別為18.4、145.1 μg /mL），計(jì)算回收率[16-18]，結(jié)果見表1。

表1 回收率測定結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明：平均回收率為97.34%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.97%，證明舒心顆粒含量測定時(shí)采用此方法可行。

4 小結(jié)

本制劑處方在臨床應(yīng)用多年，具有一定的臨床療效及理論基礎(chǔ)。黃芩為方中主藥之一，在本制劑的臨床療效中起著重要作用。本文利用HPLC法測定舒心顆粒中黃芩苷的含量，方法簡便、專屬性強(qiáng)。本方法的建立，提高了檢測靈敏度，有效地確保了產(chǎn)品質(zhì)量，精確地控制了產(chǎn)品的穩(wěn)定性，為其內(nèi)在質(zhì)量的控制提供了科學(xué)依據(jù)。

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