谷溪 張培虎 （山東省成武縣畜牧獸醫(yī)局 274200）

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一起仔豬感染圓環(huán)病毒2型的診斷及防控

谷溪 張培虎 （山東省成武縣畜牧獸醫(yī)局 274200）

某規(guī)?；i場斷奶仔豬發(fā)生漸行性消瘦，皮膚發(fā)白，精神沉郁，呼吸困難，病程長為特征的疾病。剖檢發(fā)現(xiàn)肺臟呈橡皮樣，腹股溝淋巴結(jié)腫大。采集病死豬病料，采用RT-PCR和PCR方法進行檢測。結(jié)果顯示所采樣品中，豬圓環(huán)病毒2型為陽性，豬瘟病毒野毒株、藍耳病毒和偽狂犬病毒均為陰性。結(jié)合臨床癥狀、剖檢病變及實驗室檢測結(jié)果，診斷為豬圓環(huán)病毒2型感染。

豬圓環(huán)病毒(Porcine circovirus virus，PCV)屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬的單股環(huán)狀負鏈DNA病毒，為已知最小的動物病毒之一[1]。目前PCV主要分為PCV1和PCV2兩種血清型，其中PCV-1在豬群中廣泛存在，但無致病性，而PCV-2能引起豬繁殖障礙、豬皮炎與腎病綜合征、仔豬先天性震顫等一系列臨床表現(xiàn)，統(tǒng)稱為豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病(PCVAD)[2]。由于該病主要破壞動物機體的免疫系統(tǒng)，造成免疫抑制，引起繼發(fā)感染并誘發(fā)細菌和病毒的混合感染，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。

1 發(fā)病情況

該豬場存欄仔豬200頭，從2017年2月有35~50日齡仔豬陸續(xù)發(fā)病，發(fā)病率不高，但病程較長，最長有1個月，死亡率較高達20%。該批仔豬按照本場免疫流程進行了偽狂犬、豬瘟等疫苗的免疫，但未免疫過藍耳疫苗和圓環(huán)病毒疫苗。

2 臨床癥狀

仔豬被毛粗亂無光澤，皮膚發(fā)白，精神沉郁，眼睛分泌物增多，發(fā)熱，咳嗽、腹部和四肢等部位出現(xiàn)暗紅色病灶，觸摸淋巴結(jié)腫大等，生長緩慢消瘦，群體大小不均一。個別出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫大，呼吸困難等臨床癥狀。

3 剖檢變化

對病死豬進行剖檢發(fā)現(xiàn)，主要肺臟變硬，蒼白呈橡皮樣，腹股溝淋巴結(jié)腫大，腎臟水腫蒼白，其他臟器無明顯肉眼可見病變。

4 實驗室檢測

4.1 材料與方法

4.1.1 試劑 豬瘟病毒野毒株實時熒光RT-PCR檢測試劑盒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒通用型實時熒光RT-PCR檢測試劑盒，購自北京世紀元亨動物防疫技術(shù)有限公司；豬偽狂犬病毒熒光PCR檢測試劑盒和豬圓環(huán)病毒2型熒光PCR檢測試劑盒及病毒DNA/RNA柱式提取試劑盒，均購自北京森康生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

4.1.2 檢測方法 無菌采集病死豬的腎臟、肺臟、脾臟和腹股溝淋巴結(jié)。將4種臟器混合剪碎后，研磨并勻漿，反復(fù)凍融4次，4℃，8000r/min離心5min，取上清液分別用DNA/RNA柱式提取試劑盒提取核酸，置于-20℃保存?zhèn)溆?。豬瘟病毒野毒株和豬繁殖與呼吸綜合征病毒的反轉(zhuǎn)錄、擴增，偽狂犬病毒和圓環(huán)病毒2型的擴增均按試劑盒說明進行操作。

4.1.3 結(jié)果判定 豬瘟病毒野毒株和藍耳病病毒(通用型)判定方法：Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線判為陽性；3030且出現(xiàn)典型的擴增曲線的樣品應(yīng)復(fù)檢，復(fù)檢仍出現(xiàn)上述結(jié)果的判為陽性，否則判為陰性。

4.2 結(jié)果與分析

附表 豬瘟病毒野毒株、豬藍耳病病毒(通用型)、豬偽狂犬病毒和豬圓環(huán)病毒2型的熒光RT-PCR /PCR檢測結(jié)果

項目豬瘟病毒野毒株藍耳病病毒(通用型)豬偽狂犬病毒豬圓環(huán)病毒2型 Ct值結(jié)果Ct值結(jié)果Ct值結(jié)果Ct值結(jié)果 陽性對照陰性對照15.360試驗成立24.250試驗成立23.340試驗成立14.3260試驗成立 樣品B0陰性0陰性0陰性6.920陽性 樣品C0陰性0陰性0陰性20.037陽性

注：樣品B為病死豬，樣品C為發(fā)病活豬。

從附表可以看出，2份樣品豬瘟病毒野毒株、藍耳病病毒(通用型)和偽狂犬病毒檢測結(jié)果均為陰性，圓環(huán)病毒2型均為陽性，這表明2份樣品同時感染了圓環(huán)病毒2型。根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢變化、實驗室檢測等綜合判定，本次豬場發(fā)病原因主要是由豬圓環(huán)病毒2型感染而引起的。

5 綜合防控措施

5.1 加強飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)管理是養(yǎng)殖生產(chǎn)中的重要環(huán)節(jié)。根據(jù)仔豬生長情況，及時降低飼養(yǎng)密度，保持良好的圈舍通風。保證豬群全價營養(yǎng)，禁止飼喂發(fā)霉變質(zhì)飼料。實行全進全出的飼養(yǎng)方式，合理進行分群與混養(yǎng)，避免將不同日齡的豬混群飼養(yǎng)，從而減少和降低豬群之間PCV2及其他病原接觸感染的機會。

5.2 減少應(yīng)激因素

保育豬自身免疫還未健全，同時由于生長、生理特點及環(huán)境、營養(yǎng)、應(yīng)激等因素的影響，可降低斷奶仔豬的抵抗力，很容易被病毒感染[3]。仔豬斷奶后21~30d是預(yù)防本病的關(guān)鍵時期，因此，最有效的方法和措施是盡可能減少對斷奶仔豬的刺激[4]。

5.3 科學(xué)免疫接種

做好豬瘟、豬偽狂犬病、豬細小病毒病和豬支原體肺炎等疾病的疫苗免疫接種，有效預(yù)防和控制其他感染性疾病，提高豬群整體的免疫抗體水平，減少呼吸道系統(tǒng)病原的繼發(fā)感染。結(jié)合周邊疾病流行狀況和本場實際情況，科學(xué)選擇圓環(huán)病毒(PCV-2)滅活疫苗或亞單位疫苗對豬群進行免疫，降低豬群感染圓環(huán)病毒的風險。

5.4 建立生物安全體系

科學(xué)防控，逐步建立豬場生物安全體系。嚴格控制外來人員、車輛進入豬場，嚴防外來病原的引入。避免從疫區(qū)引進豬只，保障本場豬群健康。對早期發(fā)現(xiàn)疑似感染豬進行檢查、隔離、淘汰，病死豬及糞便排泄物做無害化處理。建立消毒制度，定期消毒，徹底對畜舍進行打掃消毒，切實做好豬場的生物安全工作。

5.5 做好保健預(yù)防

為更好地提高豬群的免疫力、抗病力，預(yù)防和減少其他疫病的混合感染或繼發(fā)感染，可在飼料中適當添加黨參、白術(shù)、黃芪之類的補氣扶正藥，配合添加優(yōu)質(zhì)電解多維，對防控豬圓環(huán)病毒相關(guān)病很有益處[5]。

[1] 田家偉, 吳霞, 張亮等. 重慶地區(qū)某規(guī)模化豬場豬圓環(huán)病毒2型的PCR檢測[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2013, 03(上): 89-91.

[2] 陳陸, 彭志鋒, 楊霞等. 10株豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)河南株全基因組的克隆與序列分析[J]. 中國獸醫(yī)學(xué), 2010, 30(2): 166-173.

[3] 蘆銀華, 陳德勝, 戴亞斌等. 應(yīng)用復(fù)合PCR法檢測豬圓環(huán)病毒[J]. 中國獸醫(yī)科技, 2001, 31(9): 8-9.

[4] 方博, 宋慧敏, 鐘麗紅等. 豬圓環(huán)病毒2型的臨床特點及綜合防控[J]. 廣東飼料, 2017, 26(5): 48-50.

[5] 懷川, 王茜, 王升等. 豬圓環(huán)病毒相關(guān)病(PCVAD)及其防治措施[J]. 中國畜禽種業(yè), 2013. 9(3).112.

（2017–09–19）

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1007-1733(2018)02-0039-02