于占松 李忠剛 （山東省膠州市動物預(yù)防與控制中心 266300）李學德 （山東省膠州市李哥莊動物衛(wèi)生與產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督站）

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偽狂犬病的診斷與防治

于占松 李忠剛 （山東省膠州市動物預(yù)防與控制中心 266300）李學德 （山東省膠州市李哥莊動物衛(wèi)生與產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督站）

偽狂犬病是由豬皰疹病毒1型引起的除人和猿以外的所有哺乳動物共患的一種傳染病。感染仔豬表現(xiàn)發(fā)熱、腹瀉、呼吸困難、肌肉震顫并繼發(fā)麻痹、共濟失調(diào)，母豬表現(xiàn)繁殖障礙，對養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的損失。為此，國內(nèi)外廣大獸醫(yī)科技工作者對偽狂犬病診斷與檢測方法進行了大量的研究，建立了病毒分離、動物接種等傳統(tǒng)診斷方法，以及大量的血清學、分子生物學診斷與鑒別診斷方法。其中使用分子生物學手段建立的gE鑒別ELISA方法在美國等國家用于偽狂犬病的根除計劃并取得了良好效果。研究偽狂犬病的診斷與檢測方法對防控偽狂犬病的暴發(fā)和傳播有重要意義。

1 病原及流行病學

（1）偽狂犬病(PR)是由偽狂犬病毒引起的多種動物和野生動物的一種以發(fā)熱、奇癢(除豬外)及腦脊髓炎為主要癥狀的臨診疾病。這種病對豬的危害最大，可導(dǎo)致妊娠母豬流產(chǎn)、死產(chǎn)、木乃伊胎；初生仔豬(特別是一周齡內(nèi)的仔豬)表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀和大批死亡(發(fā)病率和死亡率幾乎達到100%)；成年豬則多為隱性感染。（2）偽狂犬病毒(PRV)為皰疹病毒科皰疹病毒甲亞科豬皰疹病毒1型病毒。有囊膜，對外界的抵抗力強。殺滅條件為 55min，80℃ 3min 或 100℃。失活條件為干燥、陽光直射。該病毒對很多化學消毒劑敏感，例如氯仿、福爾馬林等。所以對豬舍及養(yǎng)殖人員的消毒是疾病預(yù)防中重要的環(huán)節(jié)[1]。（3）研究發(fā)現(xiàn)，豬偽狂犬病的流行具有季節(jié)性，尤其是春、秋、冬三個氣溫多變的季節(jié)。帶毒豬以及帶毒鼠類等是本病的主要傳染源。該病毒可通過消化道和呼吸道傳播，也可通過交配、精液、胎盤傳播。空氣傳播是PRV擴散的主要途徑。

2 臨床癥狀

豬感染PRV之后所表現(xiàn)的臨床癥狀跟所感染的病毒毒力，感染量量以及日齡有關(guān)。仔豬臨床表現(xiàn)為急性突發(fā)性疾病，高熱、精神不振、拒食、發(fā)抖、嘔吐及腹瀉，并有轉(zhuǎn)圈、昏睡、劃水、四肢痙攣、發(fā)出尖叫、牙關(guān)緊咬、角弓反張等明顯的神經(jīng)癥狀。病程短，通常發(fā)病后2d 即可因呼吸衰竭死亡。用肌肉注射頭孢噻呋等抗生素治療無效，緊急接種豬瘟疫苗，也無明顯效果。中大豬沒有明顯的臨床表現(xiàn)癥狀[2]。

3 病理變化

剖檢病死豬可見全身淋巴結(jié)都有不同程度的腫大，肝臟、脾臟有灰白色壞死病灶，腎臟有針尖狀大小的出血點，心臟外膜有出血點和出血斑，腦組織水腫，腦膜、腦實質(zhì)充血、出血，腦積液增多。

4 實驗室診斷及鑒別診斷

4.1 實驗實診斷 豬偽狂犬病的診斷通常要結(jié)合豬群發(fā)病史、臨床癥狀、病理學檢查、生物學實驗、血清抗體檢測、分子生物學診斷技術(shù)、病毒分離鑒定及動物實驗等多種方法。一般通過臨床癥狀和流行病學調(diào)查就可以對該疾病有一個初步的判斷。隨后可通過實驗室診斷來確診，大體分為以下幾種：（1）中和試驗：通過監(jiān)測中和指數(shù)、中和效價，發(fā)現(xiàn)SNT的特異性很強，但敏感性較低。如果延長抗原與血清的孵育時間，尤以補體存在時，可使其敏感性增高。（2）動物接種試驗：用腦懸液皮下接種3只家兔12~72h，3只兔子均出現(xiàn)劇癢、撕咬、死亡，偽狂犬病毒動物接種試驗陽性。（3）乳膠凝集試驗：利用抗原抗體特異性結(jié)合的性質(zhì)，先用乳膠包被抗原，再與相應(yīng)血清反應(yīng)，如幾分鐘內(nèi)發(fā)生凝集，可判定有PRV感染。美國已經(jīng)有商品化的LAT試劑盒供臨床使用，華中農(nóng)業(yè)大學也于國內(nèi)率先研制成功LAT試劑盒。LAT操作簡單、方便、快速，且敏感性、特異性強，適用于疫病監(jiān)測或流行病學調(diào)查，以及種豬群檢疫凈化陽性豬初次篩選。（4）免疫熒光試驗：用免疫熒光技術(shù)對采自不同組織的病料進行檢測發(fā)現(xiàn)，扁桃體和淋巴結(jié)的檢出率最高，其次是大腦、脾和脊髓。如病豬的腦三叉神經(jīng)、延腦和脊髓等組織作冰凍切片后免疫熒光檢查，可于2~4h內(nèi)得到結(jié)果。此法是我國目前用于PR 快速診斷的一種較好的方法。（5）ELISA檢測廣泛應(yīng)用PRV的檢測，ELISA在PRV的早期感染、持續(xù)感染中均得到應(yīng)用，并可以同時用于特性抗原和抗體的檢測。在診斷方面，定期采血監(jiān)測正常豬群中PRV抗體的ELISA效價，當豬群出現(xiàn)癥狀后，根據(jù)ELISA抗體升高的程度判斷是否存在感染PRV。母源抗體的存在對疫苗的免疫效果產(chǎn)生影響，常應(yīng)用ELISA檢測方法對疫苗免疫后血清中抗體的情況進行調(diào)查。（6）間接ELISA：Mout(1978)、A fshar(1987)、蔣雯(1988)等分別建立了檢測偽狂犬病病毒抗體的間接ELISA方法，為ELISA敏感性高，且快速、簡便，適于大面積血清學調(diào)查。王勇等用gE鑒別ELISA試劑盒調(diào)查某豬場流行情況，母豬陽性率為81%，但缺點是此種方法費用昂貴，難以在基層推廣[3, 4, 5, 6]。

4.2 鑒別診斷 （1）從流行病學特點上進行鑒別：①流行季節(jié)：豬偽狂犬病多發(fā)生于春、冬季節(jié)；豬流行性乙型腦炎有明顯的季節(jié)性，即蚊蟲活動的夏季和秋季較為多發(fā)；鉤端螺旋體病流行季節(jié)主要在7~10月的高溫季節(jié)；其他幾種疾病沒有明顯季節(jié)性，四季均可發(fā)生。②發(fā)病年齡：豬偽狂犬病和豬藍耳病具有明顯的年齡差異，哺乳仔豬表現(xiàn)發(fā)病死亡最高，其他疾病不同年齡段都易感。③傳播途徑：豬偽狂犬病主要通過呼吸道、消化道、損傷的皮膚傳播；豬細小病毒病通過接觸污染源、胎盤和精液傳播；豬乙腦主要通過蚊蟲叮咬傳播；豬瘟經(jīng)呼吸道(扁桃體)或直接接觸傳播；豬鉤端螺旋體主要經(jīng)過皮膚、黏膜、消化道傳播，也可通過交配、人工授精或菌血癥期間通過吸血昆蟲傳播；豬布魯氏桿菌病通過消化道、皮膚創(chuàng)傷、交配傳播。（2）從臨床癥狀上進行區(qū)別：發(fā)病母豬都表現(xiàn)為多次發(fā)生不孕、流產(chǎn)或產(chǎn)出死胎、木乃伊胎，新生仔豬活力弱等共同癥狀。初生仔豬癥狀比較嚴重，高熱、呼吸困難、四肢運動失調(diào)、嘔吐、下痢，若神經(jīng)癥狀出現(xiàn)于發(fā)病初期，死亡率可達100%，腹下皮膚有不規(guī)則小出血點，但沒有紫色和藍色斑塊，青年豬以上癥狀較輕，病死率低[7, 8]。

5 預(yù)防及治療

（1）消滅豬場中的鼠類，對豬舍及周圍環(huán)境進行嚴格消毒。實行仔豬全進全出制度，引進種豬時，須隔離觀察1個月，確認無病方可混群飼養(yǎng)。暴發(fā)本病時，豬舍的地面、墻壁、設(shè)施及用具等用百毒殺隔日噴霧消毒1次，糞尿要發(fā)酵處理，分娩欄和病豬欄用2%的燒堿溶液消毒，每隔5~6d消毒1次，哺乳母豬乳頭用2%的高錳酸鉀溶液清洗后，才讓仔豬吃初乳。將病豬隔離撲殺、深埋無害化處理。（2）采取免疫疫苗、檢疫、隔離和淘汰病豬及凈化豬群等綜合性防治措施。豬偽狂犬病有滅活疫苗、弱毒疫苗和基因缺失疫苗3種，主要應(yīng)用滅活疫苗和基因缺失疫苗。科學設(shè)置豬偽狂犬病免疫程序：種豬(包括公豬)，第1次注射后，間隔4~6周加強免疫1次，以后每次產(chǎn)前1個月前加強免疫1次。做為種用的仔豬在斷奶時(單月或雙月)注射第1次，間隔4~6周加強免疫1次，以后按種豬免疫程序(半年免疫1次，產(chǎn)前1個月前加免1次)進行。商品豬斷奶時注射1次，直到出欄。豬發(fā)生偽狂犬病時，全場未發(fā)病的豬均用偽狂犬病基因缺失弱毒苗進行緊急免疫注射，一般可有效控制疫情[9]。（3）治療方法，一是對發(fā)病豬使用干擾素，稀釋后按1ml/頭肌注，同時按2ml/頭注射抗病毒多肽，按0.12ml/kg體重注射黃芪多糖注射液，然后再用頭孢噻呋鈉按3mg/kg·體重肌注，1次/d，連用3d。二是對高燒不退、病情嚴重的仔豬肌注安乃近、氨芐青霉素，1次/d，連用3~5d。三是防止繼發(fā)感染，在每500kg飼料中加愛樂新500g、70%阿莫西林200g、強力霉素150g；每500kg飲水中加70%阿莫西林150g、多維250g、黃芪多糖250g，連用7d。經(jīng)采取以上綜合防治措施7d后，除個別病重仔豬死亡外，疫情得到有效控制[10]。

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（2017–10–26）

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