石慧麗，牛升梅，鐘光珍

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京朝陽醫(yī)院，北京100020)

新西蘭兔是心血管疾病研究常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，而該類模型研究，需在麻醉下實(shí)施。不同麻醉藥物對(duì)心電影響不同。因此，了解麻醉藥物本身對(duì)兔心電影響是必要的。戊巴比妥鈉起效快，作用穩(wěn)定，可持續(xù)性靜脈應(yīng)用，適合用于長(zhǎng)期麻醉[1,2]。速眠新為肌內(nèi)注射麻醉藥物，小劑量即可達(dá)到鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、催眠的效果[3]。目前已有研究[4～7]這兩種麻醉藥物對(duì)兔心電圖的影響，但是尚不全面，且對(duì)心電圖表現(xiàn)的差異性對(duì)比，目前未見相關(guān)報(bào)道。2016年11月～2017年2月本研究使用戊巴比妥鈉和速眠新Ⅱ?qū)ν慌挛魈m兔先后進(jìn)行麻醉，分析兩種情況下心電圖變化，以期進(jìn)一步明確心電圖各波段時(shí)長(zhǎng)和振幅及兩種麻醉藥物在心電圖表現(xiàn)上的差異。

1 材料與方法

1.1 材料 選用成年新西蘭兔20只，體質(zhì)量2.8～3.5 kg，雌雄各半，購自北京隆安實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖中心[SCXK(京)2014-0003]。實(shí)驗(yàn)操作在首都醫(yī)科大學(xué)大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行[SYXK(京)2014-0018]。新西蘭兔自由進(jìn)食飲水，飼養(yǎng)溫度在18～26 ℃，氨濃度≤14 mg/m3，充分保障五項(xiàng)基本福利。本研究實(shí)施前已通過首都醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物福利委員會(huì)的批準(zhǔn)(倫理批準(zhǔn)號(hào)AEEI-2014-041)，所有操作均符合動(dòng)物倫理要求。戊巴比妥鈉：5 g/瓶，批號(hào)：P3761(sigma公司)。速眠新Ⅱ注射液[(2010)獸藥GMP證字170號(hào)(吉林省敦化市圣達(dá)動(dòng)物藥品有限公司)]：1.5 mL/支，含量規(guī)格為1.5 mL∶0.03 g。動(dòng)物心電圖機(jī)：ECG-101A型(深圳邦健公司)。

1.2 麻醉方法 3%戊巴比妥鈉配制：微量天平稱取3 g的藥品，用雙蒸水溶解定容至100 mL，使用無菌濾膜在無菌廚中過濾后5 ℃保存，有效期約為1個(gè)月。速眠新Ⅱ在室溫下保存，抽取原液進(jìn)行麻醉。取20只新西蘭兔分別稱重，應(yīng)用3 %的戊巴比妥鈉按1.3 mL/kg的劑量進(jìn)行耳緣靜脈注射,約2 min角膜反射消失，無夾趾反射，四肢肌張力減低后，仰臥固定采集心電圖[8]。同一批新西蘭兔休息1周后在后肢股部肌注速眠新Ⅱ 0.2 mL/kg，約5 min后肌張力減低，角膜反射遲鈍后，再次記錄心電圖[9]。

1.3 心電圖檢查 本研究在衡紫微等[10]和Giannico等[11]采集心電圖方法的基礎(chǔ)上稍加改良，新西蘭兔麻醉后仰臥固定在兔臺(tái)上，四肢局部及右胸部剪去浮毛，涂抹洗發(fā)膏后用刀片剃凈細(xì)毛，貼上電極片(V1導(dǎo)聯(lián)的位置大致位于胸骨右緣第4肋間，與人類相似)，與扣試電極導(dǎo)線相連，采集6個(gè)肢體導(dǎo)聯(lián)及V1導(dǎo)聯(lián)的心電信號(hào)。該方法能避免多數(shù)文獻(xiàn)中使用的帶針的導(dǎo)線刺入皮下而給動(dòng)物帶來的不適感。心電圖機(jī)的定準(zhǔn)電壓調(diào)為20 mm/mV，走紙速度為50 mm/s，記錄心電圖。

2 結(jié)果

2.1 兩種麻醉藥物分別作用下心電圖總體特征比較 戊巴比妥鈉麻醉后新西蘭兔的心率(324.9±36.73)次/min，明顯大于速眠新Ⅱ麻醉后心率(145.8±31.86)次/min(P<0.05)。速眠新Ⅱ麻醉后50 %的兔出現(xiàn)竇性心律不齊，戊巴比妥鈉麻醉無此現(xiàn)象。速眠新Ⅱ麻醉后，心電圖整體的基線水平比使用戊巴比妥鈉平穩(wěn)。

2.2 兩種麻醉藥物分別作用下P波、PR間期及PR間期離散度的比較 P波的形態(tài)和方向，在兩種麻醉藥物作用下表現(xiàn)基本一致，呈鈍圓形或稍尖，在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、AVF導(dǎo)聯(lián)向上，AVR導(dǎo)聯(lián)向下。V1導(dǎo)聯(lián)可向上或雙向，以向上居多。在戊巴比妥鈉麻醉作用下，Ⅰ導(dǎo)聯(lián)上的P波時(shí)長(zhǎng)偏短且振幅偏低、不穩(wěn)定，V1導(dǎo)聯(lián)P波時(shí)長(zhǎng)波動(dòng)較大。戊巴比妥鈉麻醉后P波時(shí)長(zhǎng)小于速眠新Ⅱ[(0.032±0.010) s vs (0.036±0.007) s，P<0.05]。戊巴比妥鈉麻醉后P波波幅大于速眠新Ⅱ[(0.081±0.043)mV vs(0.059±0.021)mV，P<0.05]。戊巴比妥鈉麻醉和速眠新Ⅱ麻醉狀態(tài)下，P波離散度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(0.015±0.013 s vs 0.015±0.008 s，P>0.05)。戊巴比妥鈉麻醉后的PR間期小于速眠新Ⅱ[(0.058±0.007)s vs (0.075±0.008)s，P<0.05]。在戊巴比妥鈉麻醉和速眠新Ⅱ麻醉狀態(tài)下，PR間期的離散度分別為(0.013±0.006)s和(0.011±0.006)s，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.3 兩種麻醉藥物分別作用下QRS波、QT間期及QT間期離散度的比較 兩種麻醉藥物分別作用前后，QRS波的類型基本一致，波幅稍有變化，在各導(dǎo)聯(lián)中QRS主波可向上或者向下。AVR導(dǎo)聯(lián)上的QRS波主要表現(xiàn)為Qr、qR或rS，主波大多向下，主波向上時(shí)一般以q波為起始。V1導(dǎo)聯(lián)以rS為主，沒有出現(xiàn)Q或q波。在戊巴比妥鈉作用下QRS波時(shí)長(zhǎng)為(0.037±0.006)s，速眠新Ⅱ作用下為(0.038±0.007)s，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。戊巴比妥鈉麻醉后QT 間期為(0.116±0.019)s小于速眠新Ⅱ(0.169±0.024)s(P<0.05)。戊巴比妥鈉麻醉后QT間期離散度小于速眠新Ⅱ[(0.009±0.006)s vs (0.018±0.012) s，P<0.05]。

2.4 兩種麻醉藥物作用下ST段及T波的比較 兩種麻醉藥物使用前后ST段大部分均與基線持平，T波方向前后表現(xiàn)一致。T波在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、AVF、V1導(dǎo)聯(lián)均向上，在AVR導(dǎo)聯(lián)向下，在AVL導(dǎo)聯(lián)中向下多于向上。T波大多升支長(zhǎng)且緩，降支短且急，在速眠新Ⅱ麻醉狀態(tài)下，這種表現(xiàn)更明顯。T波大部分與QRS主波方向一致，振幅及時(shí)長(zhǎng)在不同新西蘭兔的心電圖中波動(dòng)較大。戊巴比妥鈉麻醉后ST段較短，有部分斜行直接與T波相連，T波波幅為(0.071±0.034)mV，而速眠新Ⅱ麻醉后ST段較長(zhǎng)且平緩，T波波幅(0.122±0.064)mV，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。速眠新Ⅱ麻醉后心電圖的T波時(shí)長(zhǎng)明顯長(zhǎng)于戊巴比妥鈉[(0.100±0.030)s vs (0.050±0.018)s]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

新西蘭兔是心血管疾病研究中常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，對(duì)其麻醉后進(jìn)行心電圖的監(jiān)測(cè)，是常用的實(shí)驗(yàn)室手段。然而實(shí)驗(yàn)室常用麻醉藥物戊巴比妥鈉和速眠新Ⅱ?qū)π挛魈m兔心電圖影響的對(duì)比，目前無相關(guān)報(bào)導(dǎo)。本研究對(duì)同一批新西蘭兔先后進(jìn)行戊巴比妥鈉和速眠新Ⅱ麻醉后采集心電圖，戊巴比妥鈉麻醉后測(cè)得心率比速眠新Ⅱ麻醉后快約123%。在兩種麻醉藥物作用下，P波在Ⅱ、Ⅲ、AVF導(dǎo)聯(lián)均向上，AVR導(dǎo)聯(lián)均向下，提示均為竇性心律，與人的竇性心律表現(xiàn)一致，故在竇性心律評(píng)判方面兩者無明顯差異。本研究中用戊巴比妥鈉麻醉測(cè)得的心率為(324.9±36.73)次/min，比張嘉寧等[6]使用該麻醉藥物得到的(285.5±16.64)次/min偏快。有研究[12]提示隨著麻醉藥物代謝動(dòng)物的心率可減慢，推測(cè)本研究與張嘉寧等測(cè)得的心率不同，在于本研究是在兔麻醉10 min左右測(cè)心電圖，而張嘉寧等是在麻醉后20 min做心電圖所致。我們使用速眠新Ⅱ麻醉得到的心率為(145.8±31.86)次/min，與之前學(xué)者使用速眠新麻醉后家兔心率平均為115次/min[4]結(jié)果相近。根據(jù)我們的結(jié)果分析，與戊巴比妥鈉相比，速眠新Ⅱ麻醉后使心率慢的主要原因可能為速眠新Ⅱ可以使QT間期延長(zhǎng)和T波時(shí)限延長(zhǎng)，心室肌復(fù)極化延長(zhǎng)。我們先后使用兩種麻醉藥物麻醉發(fā)現(xiàn)，戊巴比妥鈉麻醉后心律正常，而速眠新Ⅱ麻醉出現(xiàn)竇性心律不齊，故我們推測(cè)速眠新Ⅱ?qū)Ω]房結(jié)有影響。

我們研究發(fā)現(xiàn)戊巴比妥鈉麻醉后P波時(shí)長(zhǎng)小于速眠新Ⅱ麻醉后，而振幅大于速眠新Ⅱ麻醉，從形態(tài)上表現(xiàn)為，戊巴比妥鈉麻醉后P波高窄，速眠新Ⅱ麻醉后P波低長(zhǎng)，提示速眠新Ⅱ可能減弱心房的除極，表現(xiàn)為心房除極波P波的時(shí)限延長(zhǎng)及振幅偏低。心房非均質(zhì)性電活動(dòng)增加，會(huì)導(dǎo)致P波離散度的增大，它是預(yù)測(cè)心律失常、房顫的一個(gè)指標(biāo)。新西蘭兔是制備房顫相關(guān)模型的主要?jiǎng)游镏?，了解正常的P波離散度，對(duì)模型的評(píng)估至關(guān)重要，目前未見相關(guān)報(bào)導(dǎo)。本實(shí)驗(yàn)得出戊巴比妥鈉和速眠新Ⅱ兩種麻醉狀態(tài)下，P波離散度差異不明顯。

QRS波在兩種麻醉藥物作用下，主波方向會(huì)有變化，但是波形的構(gòu)成基本不變。AVR導(dǎo)聯(lián)QRS主波大部分向上，小部分向下，與衡紫薇總結(jié)的日本大耳白的QRS波改變相似[10]，與人類的QRS波AVR主波向下不一致。

QT間期離散度是評(píng)估室性心律失常和心肌梗死預(yù)后的重要標(biāo)準(zhǔn)[13]。心肌細(xì)胞復(fù)極過程不同步，會(huì)導(dǎo)致心肌細(xì)胞不應(yīng)期的不均一，就會(huì)在心電圖上顯示出QT間期長(zhǎng)短不一，QT間期離散度偏大，因此QT間期離散度可反應(yīng)不同部位心室肌復(fù)極均一性和電穩(wěn)定性。我們的研究顯示，速眠新Ⅱ應(yīng)用下的QT間期離散度明顯大于戊巴比妥鈉麻醉后QT間期離散度。此前學(xué)者研究表明速眠新Ⅱ可以使磷酸激酶及其同工酶升高，對(duì)心肌產(chǎn)生抑制作用[5]，本研究發(fā)現(xiàn)的QT間期離散度增大可能源于速眠新對(duì)心肌的影響。

新西蘭兔廣泛應(yīng)用于心房顫動(dòng)、心肌梗死和心肌肥厚等動(dòng)物模型中[8,14,15]。我們研究發(fā)現(xiàn)戊巴比妥鈉麻醉后可快速進(jìn)入麻醉狀態(tài)，不會(huì)導(dǎo)致心律失常，并且作用時(shí)間長(zhǎng)。根據(jù)我們的研究結(jié)果，推薦在心臟電生理方面研究，如房顫、心肌肥厚性心律失常等相關(guān)模型，為保證結(jié)果的穩(wěn)定準(zhǔn)確，應(yīng)避免使用易致心律失常的麻醉藥物，戊巴比妥鈉是該類研究較好的選擇。孫安會(huì)等[12]對(duì)比了水合氯醛、戊巴比妥鈉、烏拉坦和異氟烷在模型心血管系統(tǒng)的影響，也證明了戊巴比妥鈉對(duì)心電圖影響較小，可用于心血管病的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。單獨(dú)使用速眠新Ⅱ小劑量肌注，操作方便，麻醉不深入，大部分新西蘭兔角膜反射不能完全消失，夾趾反射存在，四肢肌張力降低，恢復(fù)快。故單獨(dú)使用速眠新Ⅱ時(shí)，由于麻醉深度不夠，不能用于長(zhǎng)時(shí)間的創(chuàng)傷性操作，而在采血、備皮、彩超檢測(cè)等短時(shí)小操作時(shí)，該藥是很好的選擇。速眠新麻醉后心電圖ST段較平穩(wěn)，故在監(jiān)測(cè)心電圖中，以觀察ST-T改變?yōu)檠芯恐攸c(diǎn)的模型，可適當(dāng)加用速眠新Ⅱ。

[1] 姜龍,張曉燕,姜平.動(dòng)物麻醉方法和麻醉藥物研究現(xiàn)狀[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2014,35(2):119-123.

[2] 孫婷婷,王宏坤.一種家兔持續(xù)靜脈麻醉方法[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2011,21(3):56-58.

[3] 吳曙光,錢寧.速眠新在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉中的應(yīng)用[J].貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,29(1):58-60.

[4] 楊柳,葉寶宏,樊新宇.四種麻醉劑對(duì)家兔心電圖的影響[J].榆林學(xué)院學(xué)報(bào),2009,19(4):9-11.

[5] 張立永,尹秀玲,蔣祿峰.水合氯醛、速眠新Ⅱ、二甲苯胺噻唑?qū)彝眯碾妶D、呼吸率和血壓的影響[J].中國畜牧獸醫(yī),2011,38(4):70-73.

[6] 張嘉寧,顧為望,吳清洪,等.SPF新西蘭兔心電圖測(cè)定[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2005,26(9):116-117

[7 ] 陳亮,潘永明,陳民利,等.麻醉狀態(tài)下WHBE免的心電圖觀測(cè)[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué),2009,29(6):419-423.

[8] Yuan Y, Jiang Z, He Y, et al. Continuous vagal nerve stimulation affects atrial neural remodeling and reduces atrial fibrillation inducibility in rabbits[J]. Cardiovasc Pathol, 2015,24(6):395-398.

[9] Jiang HJ, Lu HZ, Wang YM, et al. Experimental study on angiogenesis in a rabbit VX2 early liver tumour by perfusion computed tomography[J]. J Int Med Res, 2010,38(3):929-939.

[10] 衡紫微,閆書妹,常超,等.正常日本大耳白兔同步12導(dǎo)聯(lián)心電圖分析[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2016,26(12):20-26.

[11] Giannico AT, Garcia DAA, Lima L, et al. Determination of Normal Echocardiographic, Electrocardiographic, and Radiographic Cardiac Parameters in the Conscious New Zealand White Rabbit[J]. J Exot Pet Med, 2015, 24(2):223-234.

[12] 孫安會(huì),谷捷,吳濤,等.四種常用實(shí)驗(yàn)麻醉藥物對(duì)大鼠心血管系統(tǒng)的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào),2016,24(2):120-126.

[13] 陸葉,殷泉忠,崔俊友.QT離散度在預(yù)測(cè)急性心肌梗死患者室性心律失常的臨床分析及應(yīng)用價(jià)值[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)刊,2013(9):1380-1381.

[14] Tan MY, Xia B, Xiao Z, et al. Development of a new model for acute myocardial infarction in rabbits[J]. J Vet Med Sci, 2017，79(3):467-473.

[15] Meedech P, Saengklub N, Limprasutr V, et al. Transmural dispersion of repolarization and cardiac remodeling in ventricles of rabbit with right ventricular hypertrophy[J]. J Pharmacol Toxicol Methods, 2015,71:129-136.