于新友,張 穎,李天芝,李 峰
(1.山東綠都生物科技有限公司,山東 濱州 256600;2.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院,山東 濱州 256600)
豬瘟(CSF)是由豬瘟病毒(CSFV)引起的豬一種熱性、高度接觸性傳染病[1]。其主要特征是急性呈敗血性變化,實(shí)質(zhì)器官出血、壞死和梗死,慢性呈纖維素性壞死性腸炎。CSF流行廣泛,發(fā)病率、死亡率均很高,即能水平傳播又能垂直傳播,給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[2]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其確定為A類(lèi)傳染病,我國(guó)將其列為一類(lèi)動(dòng)物傳染病[3]。近年來(lái),我國(guó)豬瘟的流行形勢(shì)發(fā)生變化,從頻發(fā)的大流行轉(zhuǎn)變?yōu)橹芷谛?、波浪形的地區(qū)性散發(fā)性流行,出現(xiàn)了所謂非典型豬瘟、溫和型豬瘟和無(wú)名高熱綜合征等[4]。綜合國(guó)內(nèi)外臨床防控經(jīng)驗(yàn),豬瘟的凈化是控制該病的最終方向。我國(guó)要求到2020年全國(guó)所有種豬場(chǎng)達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。本文論述了豬瘟商品化疫苗研究現(xiàn)狀及科學(xué)防控措施,以期為該病防控工作提供參考。
CSFV屬于黃病毒科、瘟病毒屬成員。病毒粒子呈圓形,直徑為34~50 nm,有囊膜。CSFV有1個(gè)血清型。CSFV對(duì)外界環(huán)境抵抗力弱,60℃10 min病毒喪失致病力,在日光直射下5~9 h可殺滅病毒[5]。病死豬尸體、血液或尿液腐敗3 d后,病毒即能被滅活。病毒適宜存活的pH為5~10,超出此范圍病毒也可迅速滅活。CSFV不能凝集紅細(xì)胞。病毒對(duì)脂類(lèi)溶劑醚及氯仿敏感,2%氫氧化鈉、5%~10%漂白粉、3%來(lái)蘇水對(duì)CSFV具有很好殺滅效果。CSFV為線狀單股正鏈RNA病毒,基因組大小為12.3 kb,含一個(gè)開(kāi)放閱讀框,編碼4種病毒結(jié)構(gòu)蛋白(C、Erns、E1和E2)和8種非結(jié)構(gòu)蛋白。在結(jié)構(gòu)蛋白中,最具有免疫防制研究?jī)r(jià)值的是E2,新型豬瘟疫苗大多數(shù)是基于E2蛋白。
疫苗接種是防控CSF的重要措施,目前市場(chǎng)上有56個(gè)廠家生產(chǎn)的14種CSF疫苗可供選擇,主要種類(lèi)有:豬瘟活疫苗(兔源),豬瘟活疫苗(細(xì)胞源),豬瘟活疫苗(乳兔源),豬瘟活疫苗(傳代細(xì)胞源),豬瘟耐熱保護(hù)劑活疫苗(細(xì)胞源),豬瘟耐熱保護(hù)劑活疫苗(兔源),政府采購(gòu)專用豬瘟活疫苗(細(xì)胞源),政府采購(gòu)專用豬瘟活疫苗(脾淋源),豬瘟、豬丹毒、豬多殺性巴氏桿菌病三聯(lián)活疫苗,豬瘟、豬丹毒、豬多殺性巴氏桿菌病三聯(lián)活疫苗(細(xì)胞源+GC42株+EO630株),政府采購(gòu)專用豬瘟活疫苗(脾淋源),豬瘟、豬丹毒、豬多殺性巴氏桿菌病三聯(lián)活疫苗(兔源+G4T10株+EO630株),豬瘟、豬丹毒、豬多殺性巴氏桿菌病三聯(lián)活疫苗(細(xì)胞源+G4T10株+EO630株),豬瘟、豬丹毒、豬多殺性巴氏桿菌病三聯(lián)活疫苗(豬瘟兔化弱毒株+G4T10株+EO630株),高致病性豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟二聯(lián)活疫苗(TJM-F92+C株)。所有疫苗全部均為活疫苗,且豬瘟病毒選用的毒株相同,均為我國(guó)豬瘟兔化弱毒C株,C株可同時(shí)誘導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫,具有良好的免疫效力。豬瘟脾淋源苗免疫原性強(qiáng),免疫效果較好,但生產(chǎn)工藝落后,成本比較高,只取用脾臟和淋巴結(jié)制苗,質(zhì)量控制困難,容易污染,對(duì)仔豬應(yīng)激較大,一般不用于哺乳仔豬的基礎(chǔ)免疫。豬瘟乳兔苗與脾淋苗的特點(diǎn)相近,其成本比脾淋苗低,但用于制苗用乳兔來(lái)源的限制,很難大規(guī)模推廣應(yīng)用。豬瘟細(xì)胞苗一般是采用犢牛睪丸或羊腎原代細(xì)胞生產(chǎn)的豬瘟疫苗,可大量生產(chǎn),生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單,價(jià)格便宜,但常有BVDV等外源病毒的污染,且牛睪丸或羊腎來(lái)源很難保證,不適合規(guī)模化生產(chǎn)。豬瘟傳代細(xì)胞源活疫苗由C株病毒接種豬睪丸傳代細(xì)胞,收獲后凍干而成。病毒在可實(shí)現(xiàn)高滴度增殖,不引起細(xì)胞病變,可多次收獲培養(yǎng)液,可實(shí)現(xiàn)疫苗大規(guī)模生產(chǎn),且受外源病毒污染幾率較低。豬瘟聯(lián)苗要根據(jù)自己豬場(chǎng)的實(shí)際情況選擇,要制定合理的免疫程序,否則可能達(dá)不到預(yù)期效果。
已經(jīng)獲得新獸藥臨床試驗(yàn)審批的疫苗有豬瘟病毒E2蛋白亞單位疫苗、豬瘟基因工程活疫苗(rAdv-SFV-E2株)、豬瘟、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征二聯(lián)耐熱保護(hù)劑活疫苗(C株+GDr180株)、豬瘟基因工程亞單位疫苗(293T-E2株)、豬瘟活疫苗(C株,懸浮培養(yǎng))、豬瘟活疫苗(C株,PK/WRL傳代細(xì)胞源)、豬瘟病毒E2重組桿狀病毒載體滅活疫苗(WH-09株)、豬瘟、豬偽狂犬病二聯(lián)活疫苗(C株+HB2000株)、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟、豬偽狂犬病三聯(lián)活疫苗(TJM-F92+C株+Bartha-K61株)。
堅(jiān)持自繁自養(yǎng)、全進(jìn)全出的飼養(yǎng)模式。應(yīng)盡量減少引種,禁止從疫區(qū)引種,引種時(shí)應(yīng)加強(qiáng)隔離檢疫工作,最好隔離飼養(yǎng)>1個(gè)月,并檢測(cè)豬瘟抗體情況及是否攜帶病毒,種公豬要檢測(cè)精液。對(duì)抗體不合格豬只,進(jìn)行補(bǔ)免豬瘟疫苗,直到檢測(cè)合格后,再并入大群飼養(yǎng),抗原陽(yáng)性豬堅(jiān)決淘汰。做好豬舍衛(wèi)生清理工作,及時(shí)清除糞尿,糞便堆積發(fā)酵處理,以殺滅其中病毒。豬舍1周至少消毒1次。豬舍設(shè)置遠(yuǎn)離生產(chǎn)區(qū)的賣(mài)豬專區(qū),車(chē)輛進(jìn)入場(chǎng)區(qū)時(shí)一定要做好消毒工作,人流和物流要定向(單向)流動(dòng)。對(duì)病死豬進(jìn)行深埋、焚燒等無(wú)害化處理,嚴(yán)防病死豬傳播疫情。定期場(chǎng)內(nèi)滅鼠、滅蚊蠅等工作,減少豬場(chǎng)內(nèi)病原微生物。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,不飼喂霉變、變質(zhì)飼料。減少豬群應(yīng)激,做好豬藍(lán)耳病,豬圓環(huán)病毒病等免疫抑制病的防控。豬舍提供適宜的溫度、濕度,尤其是冬天做好通風(fēng)和保暖工作。
對(duì)豬瘟尚無(wú)特效治療藥物,疫苗免疫是最有效的防控措施。當(dāng)前豬瘟疫苗只有活疫苗,可分為脾淋苗和細(xì)胞苗兩大類(lèi)。一般來(lái)說(shuō)豬瘟脾淋苗含免疫促進(jìn)劑,容易產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng),<1月仔豬不建議接種,其見(jiàn)效快,適合做緊急接種,細(xì)胞苗質(zhì)量更穩(wěn)定,抗原成分含量高,成本低,適合成年豬普免[6]。但在疫苗免疫過(guò)程中也需要注意一些問(wèn)題,影響豬瘟疫苗免疫的原因很多,有豬體自身的因素,免疫豬只要健康,無(wú)免疫耐受及藍(lán)耳、圓環(huán)等免疫抑制性疾病。選擇正規(guī)廠家生產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)疫苗,疫苗-20℃冷鏈運(yùn)輸、保存,定期檢修冰箱。夏季注射疫苗時(shí)能用常溫保存的稀釋液直接稀釋冷凍保存的疫苗,因溫差太大,易造成疫苗失活,需提前將稀釋液或疫苗冷藏保存,使二者溫度差減小后,再稀釋。通常采取頸部肌肉注射免疫,注射時(shí)操作要規(guī)范,注射部位準(zhǔn)確,劑量充足,做好消毒工作,盡量保證一豬一針頭,避免豬只交叉感染。
隨著技術(shù)的發(fā)展,目前,市場(chǎng)上有無(wú)針頭注射的器具,由于某些原因還沒(méi)有大規(guī)模推廣應(yīng)用。相信隨著技術(shù)的發(fā)展,豬的無(wú)針頭注射給藥方式將替代針頭注射??蒲腥藛T對(duì)豬瘟疫苗的免疫途徑進(jìn)行了一些探索,雖有報(bào)道后海穴免疫較肌肉注射效果好,但免疫操作不如肌肉注射方便,沒(méi)有得到普遍的認(rèn)可[7]??蒲腥藛T也嘗試了豬瘟疫苗的噴霧免疫操作,但由于多種原因未能大規(guī)模推廣。免疫技術(shù)已經(jīng)發(fā)展成熟,隨著技術(shù)的革新,有必要進(jìn)行豬瘟噴霧免疫途徑的再次探索,目前,豬支原體活疫苗噴霧免疫途徑已經(jīng)得到認(rèn)可,如果采用先進(jìn)的儀器及相應(yīng)豬瘟活疫苗佐劑的添加,能使其免疫效果達(dá)到肌肉注射免疫的效果,必將引發(fā)豬瘟免疫的革命,其優(yōu)點(diǎn)是省時(shí)、省工,減少豬群應(yīng)激反應(yīng)。
豬飼料中霉菌毒素污染也會(huì)造成免疫抑制,免疫疫苗期間應(yīng)用磺胺類(lèi)藥物、卡那霉素及地塞米松等也會(huì)造成豬的免疫抑制。豬瘟疫苗的免疫程序影響豬瘟疫苗免疫后抗體的產(chǎn)生,有條件的豬場(chǎng)要檢測(cè)豬瘟抗體情況,制定合理的免疫程序,一般在仔豬母源抗體中和效價(jià)降至為1∶32時(shí)進(jìn)行首免,對(duì)不便檢測(cè)豬瘟抗體的豬場(chǎng),通常25日齡首免,1月加強(qiáng)免疫1次[8]。種豬一般普免,一年4次,母豬妊娠1個(gè)月內(nèi)及產(chǎn)前1個(gè)月應(yīng)避免免疫豬瘟疫苗,根據(jù)報(bào)道母豬產(chǎn)前10 d內(nèi)免疫豬瘟,所產(chǎn)仔豬發(fā)生震顫的比率高達(dá)60%。不建議仔豬做超前免疫,因“超免”后,仔豬攝入的母源抗體會(huì)中和大部分的疫苗抗原;新生仔豬的免疫器官發(fā)育不完善,對(duì)抗原的應(yīng)答不充分;養(yǎng)殖場(chǎng)一般往往在超免后2 h才供應(yīng)初乳,不能及時(shí)獲得母源抗體,影響對(duì)其他疾病的抵抗力。不同疫苗免疫間隔7~10 d,避免相互影響。對(duì)因豬瘟疫苗免疫過(guò)敏的豬只,立即耳后肌肉注0.1%腎上腺素1 mL,豬群免疫后定期監(jiān)測(cè),抗原抗體情況,當(dāng)有效免疫率>85%能降低豬瘟發(fā)病率。抗體不達(dá)者及時(shí)補(bǔ)免,再不合格就考慮可能是免疫耐受,堅(jiān)決淘汰,杜絕傳染源。定期監(jiān)測(cè)抗原,堅(jiān)決淘汰亞臨床感染豬只。
豬群發(fā)病后,病豬及可疑病豬,立即隔離飼養(yǎng),特別是貴重的種豬,在備有抗豬瘟血清的單位,可用于治療。豬群緊急接種豬瘟脾淋苗,5頭份·頭-1,控制疫情發(fā)展,豬舍每周消毒2次。全群飼喂電解多維、VC、葡萄糖等提高機(jī)體抗病能力。同時(shí)飼喂抗生素,控制繼發(fā)感染。對(duì)病死豬、流產(chǎn)胎兒和其他污染物要進(jìn)行深埋或焚燒等無(wú)害化處理[9]。
我國(guó)擁有世界上最好的豬瘟疫苗,國(guó)外很多國(guó)家利用我國(guó)的疫苗已經(jīng)成功消滅了豬瘟。但因我國(guó)生豬飼養(yǎng)者中散戶居多,雖然國(guó)家強(qiáng)制免疫推行了較長(zhǎng)時(shí)間的豬瘟強(qiáng)制免疫策略,對(duì)我國(guó)大面積爆發(fā)豬瘟有了很好的控制,但是由于養(yǎng)殖戶尤其是小的散養(yǎng)戶不能科學(xué)選擇疫苗,正確使用疫苗,難以達(dá)到預(yù)期的效果。疫苗免疫后可用間接血凝試驗(yàn)等檢測(cè)抗體產(chǎn)生情況,從而科學(xué)評(píng)估疫苗免疫效果。