江 斌 蔡 羲 林 琳 黃梅清 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 福建福州 350013
卵黃性腹膜炎是由多種病因?qū)е路N禽或蛋禽腹腔出現(xiàn)黃白色干酪樣滲出以及腹膜出現(xiàn)不同程度炎癥的一種常見病癥。引發(fā)該病的有原發(fā)性病因和繼發(fā)性病因。原發(fā)性病因是多種血清型的致病性大腸桿菌;繼發(fā)或誘發(fā)病因有禽流感(如H5、H7、H9亞型禽流感)、支原體(包括敗血支原體和滑液囊支原體)、傳染性喉氣管炎、飼養(yǎng)管理不良等[1]。以往由致病性大腸桿菌引起的蛋雞卵黃性腹膜炎都是采用藥物(如氟苯尼考、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、阿莫西林等)進行治療,但目前我國規(guī)定蛋雞在產(chǎn)蛋期間禁止使用各種抗生素和磺胺類藥物,所以在臨床上如何治療產(chǎn)蛋雞的大腸桿菌性卵黃性腹膜炎是養(yǎng)殖場和獸醫(yī)們要面臨的棘手問題。2018年4月中旬,我們接診1例來自福州市羅源縣的初產(chǎn)蛋雞卵黃性腹膜炎病例,根據(jù)臨床癥狀、病理變化觀察和實驗室檢查確診為致病性大腸桿菌引起的卵黃性腹膜炎,采用雞新城疫活疫苗(L系)進行緊急免疫后16 d,疫情得到有效控制。該方法對蛋雞場防控大腸桿菌性卵黃性腹膜炎具有借鑒作用。
2018年4月中旬,福州市羅源縣某蛋雞養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的7 000羽150日齡海蘭褐蛋雞發(fā)病,每天死亡15~28羽,已持續(xù)4~5 d,雞群的采食與產(chǎn)蛋率無明顯異常。據(jù)了解,該批蛋雞曾接種了雞新城疫、傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎、傳染性法氏囊病、禽流感包括(包括H5、H7及H9亞型)、傳染性鼻炎等病的疫苗。在育雛期間曾發(fā)生過滑液囊支原體病,近期的氣溫變化較大。應(yīng)養(yǎng)殖戶要求,筆者前往該場進行現(xiàn)場診療。
該雞群整體精神狀況尚好,采食也基本正常(每羽雞平均日采食飼料110 g),產(chǎn)蛋率約80%,蛋殼質(zhì)量無明顯改變。個別患雞精神沉郁,雞冠呈暗紅色,不吃料或少吃料,體況消瘦,腹部膨大,糞便偏稀呈黃綠色。患雞出現(xiàn)癥狀后2~3 d內(nèi)死亡,病程已持續(xù)4~5 d,每天死亡15~28羽,患雞死亡多集中在晚上。
病死雞膘情中下、偏瘦,雞冠發(fā)紫,肛門口輕度外翻。剖檢5羽病死雞,可見喉頭有少量黏液附著;心包膜增厚,并有纖維素性干酪樣物滲出,有的心包膜與胸骨黏連;卵巢上的濾泡變性,有的出現(xiàn)破裂;氣囊壁渾濁變厚;腹腔內(nèi)有大量變性卵黃,呈干酪樣或油脂樣;肝臟、脾臟、腎臟不同程度腫大、變黑,表面覆蓋一層干酪樣滲出物,病情嚴(yán)重的病例可聞到一股惡臭味;輸卵管有不同程度的充血腫脹,切開輸卵管可見黏膜充血、糜爛,管腔內(nèi)積有黃白色沉積物;泄殖腔充血出血。
4.1 抗體檢測 取16枚該批蛋雞產(chǎn)的雞蛋進行新城疫、H5、H7及H9亞型免疫抗體測定,4項抗體的血凝抑制試驗平均值分別為log27.2、log28.5、log27.5、log29.1,均超過規(guī)定的免疫抗體標(biāo)準(zhǔn)。
4.2 病毒檢測 取病死雞的肝臟、脾臟、肺臟,采用北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)的新城疫病毒(通用型)、禽流感病毒(通用型)實時熒光定量RT-PCR,傳染性喉氣管炎病毒實時熒光定量PCR試劑盒進行檢測,結(jié)果3個病原檢測結(jié)果均為陰性。
4.3 細(xì)菌培養(yǎng) 無菌采集3羽病死雞的肝臟、脾臟等病變組織接種于麥康凱培養(yǎng)基和伊紅美藍培養(yǎng)基進行細(xì)菌培養(yǎng),經(jīng)18~24 h培養(yǎng)后,在麥康凱培養(yǎng)基上長出光滑濕潤、圓形隆起的粉紅色大菌落;在伊紅美藍培養(yǎng)基上長出黑色帶金屬閃光的菌落。挑取菌落進行涂片和革蘭氏染色,鏡檢可見單個散在的革蘭氏陰性、兩端鈍圓、無芽孢的小桿菌,大小約為1.5 μm×4.0 μm。
4.4 細(xì)菌生化鑒定 將培養(yǎng)的菌落接種于葡萄糖、乳糖、果糖、麥芽糖、甘露醇等生化管進行培養(yǎng)。結(jié)果該菌能分解葡萄糖、乳糖、果糖、麥芽糖、甘露醇并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,甲基紅試驗呈陽性,VP試驗呈陰性,不產(chǎn)生H2S,不液化明膠,不分解尿素,MR試驗呈陽性[2]。
根據(jù)發(fā)病雞的臨床癥狀、病理變化、抗體檢測以及病毒PCR檢查結(jié)果,結(jié)合細(xì)菌形態(tài)以及細(xì)菌生化鑒定,確診該病為致病性大腸桿菌引起的卵黃性腹膜炎。
6.1 加強雞群的飼養(yǎng)管理 雞群按每噸飼料添加1 000 g強力拜固舒(四川拜耳動物保健品有限公司生產(chǎn)的復(fù)合多種維生素),連用5 d,同時每天做好雞舍的環(huán)境衛(wèi)生,并采用正典雙殺消毒水(佛山正典生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的戊二醛癸甲溴銨溶液)按1∶400 稀釋后消毒,連用 5 d。
6.2 疫苗免疫 采用雞新城疫活疫苗 (L系)(齊魯動物保健品有限公司生產(chǎn)),按5羽份量用山泉水稀釋后,對全群雞進行飲水免疫,稀釋后的疫苗控制在2 h內(nèi)飲完。
免疫后幾天,每天仍死亡15~20羽患雞,到第10 d死亡數(shù)降到10羽,以后逐日減少,到第16 d雞群停止死亡,采食量、產(chǎn)蛋率、糞便均恢復(fù)正常。
7.1 發(fā)病原因分析 大腸桿菌病在臨床上有許多病癥,如卵黃性腹膜炎、“三炎”、眼炎、臍炎等,總的來說可分為原發(fā)性大腸桿菌病和繼發(fā)性大腸桿菌病。原發(fā)性大腸桿菌病的原因主要是飼養(yǎng)管理不良引起,包括飼料不新鮮或霉變、營養(yǎng)不均衡、水源不清潔、光照時間過長、飼養(yǎng)環(huán)境衛(wèi)生條件差、各種不良應(yīng)激等,這類大腸桿菌病的發(fā)病過程慢,持續(xù)時間長且血清型種類多,只有當(dāng)飼養(yǎng)管理條件得到改善后,才能得到有效控制。繼發(fā)性大腸桿菌病多見于某些急性傳染?。ㄈ缜萘鞲?、傳染性喉氣管炎、支原體病等)之后,發(fā)病較急,病死率高低與疫病種類有關(guān),這類疫病的診斷,除了檢出致病性大腸桿菌外,還能檢測出相應(yīng)的傳染病病原。該病例中初產(chǎn)母雞發(fā)生大腸桿菌病,分析其原因有2個方面:第一,初產(chǎn)母雞的體質(zhì)相對虛弱,加上近期天氣變化劇烈。第二,該批雞在育雛期間曾感染過滑液囊支原體病,造成雞體抵抗力下降。
7.2 治療 一般來說,大腸桿菌病都通過使用抗生素或抗菌藥物進行治療,包括使用氟苯尼考、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、硫酸新霉素、硫酸黏菌素、硫酸安普霉素以及抗菌中藥等,必要時可分離大腸桿菌進行藥敏試驗,篩選出敏感藥物進行治療[3-7]。但鑒于食品安全和藥物殘留問題,蛋雞在產(chǎn)蛋期間禁止使用各種抗生素。在該病例中,筆者采用雞新城疫活疫苗進行緊急免疫來治療雞大腸桿菌病取得很好的治療效果。該方法之所以有效,分析可能與雞群使用新城疫活疫苗后雞體會產(chǎn)生局部的細(xì)胞免疫功能有關(guān),這方面的工作有待進一步深入研究。
7.3 預(yù)防 大腸桿菌是一種條件致病菌,當(dāng)飼養(yǎng)管理不良或雞群發(fā)生某些傳染病后,均易發(fā)生或繼發(fā)大腸桿菌病。在預(yù)防上,首先要加強雞場的飼養(yǎng)管理,搭配好飼料營養(yǎng),防止飼料霉變或變質(zhì),保證飲水清潔衛(wèi)生,做好雞舍環(huán)境衛(wèi)生,調(diào)整好雞群的飼養(yǎng)密度,注意雞舍通風(fēng),降低舍內(nèi)粉塵,在天氣驟變時及時調(diào)整室內(nèi)溫度。第二,做好相關(guān)疫病的疫苗免疫,包括H5、H7、H9亞型禽流感、傳染性鼻炎、傳染性喉氣管炎、支原體病等,防止雞群因發(fā)生上述疫病后繼發(fā)感染大腸桿菌病,從而間接預(yù)防雞大腸桿菌病。第三,疫苗免疫。對雞大腸桿菌病較嚴(yán)重的雞場,可采用大腸桿菌病滅活疫苗,或用自場分離菌株制作滅活疫苗進行預(yù)防,對于控制該病也有一定的幫助。第四,把控雞苗質(zhì)量,防止購進的雞苗垂直攜帶大腸桿菌或支原體,從而減少雞苗大腸桿菌的來源以及大腸桿菌病的發(fā)病率。