李冰
(長春科技學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院,吉林長春 130600)
紫外光譜是分子最外層價電子在不同能級軌道上躍遷而產(chǎn)生的[l],是一種常見的光譜分析方法。紫外光譜法具有原理簡單、操作方便、使用面廣、靈敏度高、準確度高等特點[2]。目前,紫外光譜較多的應(yīng)用于中藥定性分析方面,對于外形相近的中藥材,其可迅速進行真?zhèn)舞b別;對于不同產(chǎn)地的中藥材,亦可迅速進行產(chǎn)地鑒別[3,4]。另外,紫外光譜也廣泛應(yīng)用于中藥材的質(zhì)量控制方面,其可迅速測定中藥有效成分的含量[5,6]。
傳統(tǒng)的中藥鑒別方法有性狀鑒別、顯微鑒別和理化鑒別等,但存在著較大的局限性。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,在中藥鑒別中應(yīng)用到越來越多的現(xiàn)代分析技術(shù)。利用紫外光譜法對中藥摻偽品種、易混品種進行鑒別的研究與應(yīng)用越來越多,因其具有簡便靈敏、快速可靠、實用性強等特點,適合推廣使用。
近年來,市場上逐漸出現(xiàn)了很多以次充好、假冒偽劣的中藥,所以建立檢測精度高、操作方便、快捷的檢測方法勢在必行,應(yīng)用紫外光譜研究鑒別中藥材真?zhèn)我苍絹碓狡毡椤?/p>
傅黎春等[7]多次發(fā)現(xiàn)市面存在以茉莉花充當(dāng)槐花入藥的情況,利用紫外全波長掃描發(fā)現(xiàn)槐花醇提液有3個最大吸收波長值(λmax),即204、255、360 nm,而茉莉花的λmax只有202 nm,為茉莉花的真?zhèn)舞b別提供了依據(jù)。易毅仁等[8]對佛手及其偽品的醇提物紫外光譜進行研究時發(fā)現(xiàn)二者具有明顯差異。陳代賢等[9]通過紫外光譜法對市售18種土茯苓樣品進行分析,通過多品種、多批次大量的測定數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)其吸收光譜有明顯差異。經(jīng)分析只有7個樣品為正品土茯苓,其他樣品均為土茯苓的偽品。
王宏軍等[10]將貴州五味子及南五味子和北五味子對照藥材分別用石油醚、氯仿、甲醇和水為溶劑,進行超聲波提取,提取物進行紫外光譜測定。結(jié)果表明,這3種藥材均具有很好的光譜特征,根據(jù)其紫外譜線組圖譜可以鑒別南、北五味子,且貴州五味子的紫外譜線組圖譜與南五味子對照藥材更相近。用紫外光譜法測定結(jié)果顯示該研究中的五味子可能屬南五味子屬。
一般的理化分析方法難以鑒別中藥摻偽現(xiàn)象。隨著現(xiàn)代儀器分析技術(shù)的不斷提高,繼GC-MS和HPLC指紋圖譜等主流分析手段后,紫外分析技術(shù)也逐漸被廣泛使用在中藥鑒別中。
郭生挺等[11]通過對UV和所得的具體數(shù)據(jù)進行分析與探討,結(jié)果顯示,國產(chǎn)沉香和進口沉香的UV圖譜最大吸收峰值分別可以達到223 nm和227 nm,而摻偽沉香最大吸收波長為224 nm。選擇使用UV法對沉香摻偽現(xiàn)象進行鑒別,在實際操作中不僅簡單可行,而且檢測結(jié)果能夠達到較高的準確性,值得業(yè)內(nèi)人員大力推廣使用。
左旭等[12]利用紫外指紋圖譜相似度來確定某苦蕎粉的閾值,通過摻假試驗看出,當(dāng)苦蕎粉摻假物質(zhì)量分數(shù)大于5%時,紫外指紋圖譜能在一定程度上反映苦蕎粉所含成分的差異,可以作為鑒別苦蕎粉質(zhì)量穩(wěn)定性的快速、簡便的方法。
目前,中藥材市場上的假藥識別難度大、識別要求高,應(yīng)用紫外光譜法對中藥進行分析,可以避免色譜法、指紋圖譜法等較為復(fù)雜的分析手段,進而實現(xiàn)大批量藥材的快速鑒別。
應(yīng)用傳統(tǒng)的性狀鑒別、顯微鑒別和理化鑒別法鑒別不同產(chǎn)地的同種中藥難度較大,但不同產(chǎn)地的同種中藥在化學(xué)成分上的微小變化可以通過紫外光譜反映出來,紫外光譜法也越來越廣泛的應(yīng)用在中藥產(chǎn)地鑒別上。
楊天偉等[13]建立了云南9個不同地區(qū)絨柄牛肝菌的紫外指紋圖譜,紫外光譜結(jié)合現(xiàn)代分析法能夠快速鑒別不同產(chǎn)地絨柄牛肝菌。
劉省存等[14]研究發(fā)現(xiàn),不同溶劑在微波條件下對4種不同產(chǎn)地丹參進行快速提取,用紫外分光光度計對相同溶劑的提取物進行對比研究,發(fā)現(xiàn)其紫外光譜存在差異,可用于不同產(chǎn)地丹參的鑒別。陳先良等[15]采用同樣的方法,研究發(fā)現(xiàn)此方法可用于不同產(chǎn)地杜仲的鑒別。該方法可以推廣應(yīng)用于其他同種中藥材的產(chǎn)地鑒別。
紫外光譜分析技術(shù)具有靈敏度高,重現(xiàn)性好的特點,在中藥中有效成分含量測定方面被廣泛應(yīng)用。
郭珍[16]以鬼燈擎素作為標(biāo)準物質(zhì),應(yīng)用紫外光譜法測定鬼燈擎中鬼燈擎素的含量,該方法簡單快速、準確、可靠,適合快速分析。紀娟等[17]采用紫外光譜法,以新藤黃酸為對照品,在360 nm處對藤黃樣品中的總藤黃酸進行含量測定,結(jié)果顯示新藤黃酸濃度在5.304~26.520 mg/L范圍內(nèi),與吸收度的線性關(guān)系良好。該方法簡便、準確、重現(xiàn)性好,可用于藤黃藥材的質(zhì)量控制。
邢麗紅等[18]應(yīng)用紫外光譜快速測定金銀花提取物中5種有機酸的含量。以HPLC法為參照,測定金銀花提取物中綠原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡??鼘幩?、3,5-二咖啡??鼘幩?、4,5-二咖啡酰奎寧酸的含量。在220~400 nm范圍內(nèi)掃描金銀花提取物溶液的紫外吸收光譜,分別建立了樣品紫外吸收光譜與上述5種有機酸含量之間的校正模型,考察了各模型的預(yù)測能力。結(jié)果表明預(yù)測結(jié)果準確,紫外光譜法可快速測定金銀花中有機酸的含量。
紫外光譜選擇性好,有較高的精密度和準確度,在保證中藥材質(zhì)量的一致性方面有望得到廣泛應(yīng)用。
紫外光譜是一種常見的光譜分析方法,因具有操作簡單、快速、重現(xiàn)性好、用量少等優(yōu)點,故目前應(yīng)用十分廣泛。但是使用紫外光譜對中藥材進行鑒定和含量測定時,常先用溶劑對藥材進行提取,就會造成提取物的紫外光譜存在吸收峰較寬、重疊嚴重等問題;相似度極高的中藥材其紫外光譜吸收相似,會出現(xiàn)鑒別不準確的現(xiàn)象。隨著計算機技術(shù)及化學(xué)計量學(xué)的發(fā)展,如人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、主成分分析及最小二乘法等,紫外光譜在中藥領(lǐng)域會有更廣闊的應(yīng)用前景,將對中藥的規(guī)范化和現(xiàn)代化進程起到巨大的推動作用。