于鳳艷

現(xiàn)階段，黑龍江已經(jīng)成為我國主要的馬鈴薯生產(chǎn)基地，隨著馬鈴薯種植面積的增加，對馬鈴薯病蟲害的防治也成為確保馬鈴薯產(chǎn)量的重要途徑。早疫病是馬鈴薯種植過程中的常見病蟲害。調(diào)查統(tǒng)計結(jié)果顯示，早疫病在馬鈴薯種植過程中的發(fā)病率高達90%以上，部分發(fā)生馬鈴薯早疫病的產(chǎn)區(qū)，其葉片大部分枯死，嚴重降低了馬鈴薯的產(chǎn)量?，F(xiàn)階段，針對馬鈴薯早疫病的生物學研究和侵染過程已經(jīng)有了大量的研究結(jié)果。但對于馬鈴薯早疫病的遺傳多樣性研究卻鮮有涉足?；诖?，本次研究探究了黑龍江省馬鈴薯早疫病菌遺傳多樣性，現(xiàn)將研究結(jié)果作如下報道。

1.一般資料與方法

1.1一般資料

于黑龍江省馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)隨機選取2016年-2017年感染早疫病的馬鈴薯葉片作為研究樣本，對其進行分析純化和致病菌檢驗，提取出完成的70株早疫病菌株。

1.2方法

對所有馬鈴薯菌株進行活化處理，采用直徑為5mm的打孔器打取菌碟，將菌株接種至100ml的培養(yǎng)液中，置于25℃的環(huán)境下保存，對其振蕩培養(yǎng)5天后，濾除菌絲體，采用無菌濾對菌株進行吸干，稱取0.15g菌絲并提取DNA。

1.3觀察指標

觀察菌株的擴增結(jié)果和聚類分析結(jié)果。

1.4統(tǒng)計學方法

采用統(tǒng)計學軟件SPSS20.0處理數(shù)據(jù)，當p<0.05時，認為數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

2.1擴增結(jié)果

本次研究結(jié)果顯示，在53條擴增出的譜帶中，平均每1條引物擴增出譜帶10.68條，經(jīng)過對擴增譜帶進行深入分析可知，多態(tài)性條帶占據(jù)擴增譜帶綜述的4/5，擴增條帶的數(shù)目在8--14之間，由此可見，黑龍江省馬鈴薯早疫病菌具有遺傳多樣性的特征。

2.2聚類分析結(jié)果

本次研究結(jié)果顯示，可將相似系數(shù)=0.81作為劃分依據(jù)，將本次研究提取的70株馬鈴薯菌株劃分為7個不同的小組，1組：菌株數(shù)量為27株，來源地點為9個。2組：菌株數(shù)量為27株，來源地點為9個。3組：菌株數(shù)量為27株，來源地點為8個（海倫）。4組：菌株數(shù)量為10株，來源地點為4個。5組：菌株數(shù)量為2株，來源地點為2個。6組：菌株數(shù)量為2株，來源地點為1個。7組：菌株數(shù)量為1株，來源地點為9個（綏化）。表明黑龍江省不同產(chǎn)區(qū)來源的馬鈴薯早疫病菌具有較為明顯的遺傳多樣性特征。

3.討論

鏈格孢屬茄鏈格孢是馬鈴薯早疫病的主要誘發(fā)因素，馬鈴薯早疫病多發(fā)于葉片部位，偶發(fā)于塊莖部位。一旦馬鈴薯感染該疾病，其葉片會呈現(xiàn)黑褐色的圓形病斑，具有3-4mm的同心紋，在土壤的濕度較大時，病斑會逐漸發(fā)育成為黑色，并衍生出孢子梗和分生孢子。在馬鈴薯病情較為嚴重的情況下，其葉片會發(fā)生干枯和脫落，植株由于缺乏必要的營養(yǎng)支持，會正片枯黃，對馬鈴薯的產(chǎn)量產(chǎn)生了嚴重的不良影響。一旦馬鈴薯的塊莖染病，會形成圓形的褐色病斑，其邊緣棱角分明。隨著馬鈴薯種植面積的日漸擴大，早疫病的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年升高的發(fā)展趨勢，且其發(fā)病率日趨逼近晚疫病。馬鈴薯早疫病的發(fā)病機制為：早疫病菌菌絲在帶病薯塊上越冬，馬鈴薯種子在發(fā)芽過程中受到病菌侵染，在種子破土后，其分生孢子借助風的力量進行傳播，使得早疫病的蔓延范圍不斷擴大，實現(xiàn)對老葉片的侵襲。早疫病在空氣濕度高于70%的環(huán)境下較容易發(fā)作。分生孢子最適宜生長的溫度為26～28℃，如果馬鈴薯的葉片上結(jié)有露水，生孢子在半小時左右即可萌發(fā)，并經(jīng)由葉面氣孔對葉片進行侵染，潛育期2—3天。調(diào)查研究結(jié)果顯示，瘠薄地塊和肥力不足的馬鈴薯天感染早疫病的幾率較高。

葉片上的癥狀最明顯，葉柄、莖、塊莖、果實等部位也都可發(fā)病。葉片上初生黑褐色、形狀不規(guī)則的小病斑.直徑1～2毫米，以后發(fā)展成為暗褐色至黑色，直徑3～12毫米，有明顯的同心輪紋的近圓形病斑，有時病斑周圍褪綠。潮濕時，病斑上生出黑色霉層。通常植株下部較老葉片先發(fā)病，逐漸向上部葉片蔓延。嚴重發(fā)生時大量葉片枯死，全株變褐死亡。發(fā)病塊莖上產(chǎn)生黑褐色的近圓形或不規(guī)則形病斑，大小不一，大的直徑可達2厘米。病斑略微下陷，邊緣略突起，有的老病斑表面出現(xiàn)裂縫。病斑下面的薯肉變紫褐色，木栓化干腐，深度可達5毫米。

本次研究結(jié)果顯示，將相似系數(shù)=0.81作為劃分依據(jù)，能夠?qū)⒈敬窝芯刻崛〉?0株馬鈴薯菌株劃分為7個不同的小組，平均每1條引物擴增出譜帶10.68條，多態(tài)性條帶占據(jù)擴增譜帶綜述的4/5，擴增條帶的數(shù)目在8--14之間，表明黑龍江省不同產(chǎn)區(qū)來源的馬鈴薯早疫病菌具有較為明顯的遺傳多樣性特征。

因此，針對馬鈴薯早疫病的遺傳多樣性特征，應(yīng)采取針對性的早疫病防治措施，實現(xiàn)對早疫病的有效防范。第一，應(yīng)培育壯苗，合理設(shè)置苗床的溫度和濕度，做好分苗工作，防止馬鈴薯苗徒勞生長。在苗期為馬鈴薯田噴施奧力克—霜貝爾500倍液，實現(xiàn)對馬鈴薯早疫病的有效預防。第二，應(yīng)實行輪作倒茬制度，防止早疫病菌產(chǎn)生耐藥性。第三，做好田間管理工作，實行高壟栽培，做好馬鈴薯田的施肥工作。針對溫室生長的馬鈴薯，應(yīng)合理控制溫室大棚的溫度和濕度，定期摘除下部病葉并燒毀，防止早疫病的大范圍蔓延。

（作者單位：163521 黑龍江省大慶市大同區(qū)老山頭鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心）