蔡春榮

結(jié)核病的發(fā)生與機(jī)體的免疫反應(yīng)有著密切的關(guān)系, 患病后, 機(jī)體內(nèi)IL和TNF等多種細(xì)胞因子起到了重要的作用［1］。細(xì)胞因子在一定程度上反映的是機(jī)體免疫狀態(tài), 對(duì)患者治療情況的評(píng)估具有重要的意義［2］。為分析菌陽(yáng)肺結(jié)核患者治療前后細(xì)胞因子變化的特點(diǎn), 本文以2016年1月～2017年1月本院收治的46例菌陽(yáng)肺結(jié)核患者為例進(jìn)行分析, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年1月～2017年1月本院收治的46例菌陽(yáng)肺結(jié)核患者為研究對(duì)象, 入選患者經(jīng)臨床、X線、細(xì)菌檢測(cè)、經(jīng)皮肺穿刺涂片檢查均為痰菌陽(yáng)性, 確診為菌陽(yáng)肺結(jié)核。其中男26例, 女20例, 年齡46～78歲, 平均年齡(60.2±5.9)歲。所有患者均對(duì)本次研究知情, 在參與研究同意書上簽字。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 患者入院后實(shí)施常規(guī)抗結(jié)核治療, 使用0.3 g異煙肼, 0.45 g利福平, 0.75 g乙胺丁醇, 1.25 g吡嗪酰胺,0.75 g氧氟沙星治療, 上述藥物均1次/d。根據(jù)患者對(duì)藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果調(diào)整給藥方案, 在治療的同時(shí), 所有患者均進(jìn)行保肝治療, 連續(xù)治療30 d。

1.2.2 試驗(yàn)過程 ①人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)。抽取患者靜脈血, 肝素抗凝, Hank’s液等體積稀釋, 在22℃密度梯度離心20 min, 充分洗滌后, 得到PBMCs, 再使用RPMI1640完全培養(yǎng)液, 將PBMCs濃度調(diào)整成2×106細(xì)胞/ml。②淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)。將PBMCs濃度調(diào)整成2×106細(xì)胞/ml在96孔培養(yǎng)板中培養(yǎng), 200 ml/孔, 加入或不加入anti-CD和anti-CD28, 設(shè)置3個(gè)副孔, 培養(yǎng)板放在37℃, 5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng), 時(shí)間為72 h, 然后收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 觀察治療后病灶吸收好轉(zhuǎn)及痰菌轉(zhuǎn)陰情況, 對(duì)比治療前后患者細(xì)胞因子的變化。治療后X線片檢查, 病灶吸收好轉(zhuǎn)標(biāo)準(zhǔn)：胸部影像檢查肺部空洞縮小＞30%或閉合, 病灶范圍縮小, 病灶密度增加或鈣化；痰菌轉(zhuǎn)陰標(biāo)準(zhǔn)：痰抗酸染色3次連續(xù)試驗(yàn)均為陰性, 或者1次痰菌培養(yǎng)結(jié)果為陰性。實(shí)驗(yàn)室檢查使用流式細(xì)胞儀檢查外周血中T細(xì)胞亞群, 包括CD3、CD4、CD8。使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血液中的IL-4、IL-6、IL-8和TNF-α水平,試劑盒為Singa公司提供, 檢測(cè)方法按照試劑盒說明書操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示, 采用t檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療后病灶吸收好轉(zhuǎn)率和痰菌轉(zhuǎn)陰率 46例患者經(jīng)過治療病灶吸收好轉(zhuǎn)44例, 好轉(zhuǎn)率為95.7%；痰菌轉(zhuǎn)陰41例,轉(zhuǎn)陰率為89.1%。

2.2 治療前后外周血中T細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果比較 治療后,CD3、CD4、CD4/CD8高于治療前, CD8低于治療前, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

2.3 治療前后IL和TNF水平比較 治療后, IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α水平均低于治療前, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表1 46例患者治療前后外周血中T細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果比較

表1 46例患者治療前后外周血中T細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果比較

注：與治療前比較, aP＜0.05

時(shí)間 CD3(%) CD4(%) CD8(%) CD4/CD8治療前 0.55±0.09 0.46±0.07 0.35±0.02 1.31±0.12治療后 0.69±0.08a 0.68±0.09a 0.24±0.01a 1.76±0.15a t 7.885 13.087 33.365 15.888 P 0.000 0.000 0.000 0.000

表2 46例患者治療前后IL和TNF水平比較, ng/L)

表2 46例患者治療前后IL和TNF水平比較, ng/L)

注：與治療前比較, aP＜0.05

時(shí)間 IL-4 IL-6 IL-8 TNF-α治療前 0.87±0.21 0.82±0.15 243.5±46.8 48.5±6.1治療后 0.53±0.16a 0.46±0.12a 165.8±20.5a 41.3±4.7a t 8.735 12.711 10.314 6.341 P 0.000 0.000 0.000 0.000

3 討論

結(jié)核病是結(jié)核桿菌引起的慢性傳染性疾病, 是一種全球性疾病, 近年來, 結(jié)核病的發(fā)病率呈現(xiàn)出升高的趨勢(shì), 給全球結(jié)核病的防治提出了新的挑戰(zhàn)。由于感染結(jié)核桿菌后沒有明顯的癥狀或體征, 僅結(jié)核菌素試驗(yàn)(PPD)試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性［3］, 因此, 結(jié)核桿菌在進(jìn)入機(jī)體后, 潛伏在肺部或其他器官,當(dāng)機(jī)體免疫機(jī)制處在低水平遏制狀態(tài)中, 對(duì)抵御結(jié)核桿菌起到了免疫保護(hù)作用, 誘導(dǎo)免疫反應(yīng)和病理變化［4］。

細(xì)胞因子是機(jī)體都中細(xì)胞分泌的小分子蛋白質(zhì), 與細(xì)胞表面的相應(yīng)受體結(jié)合后發(fā)揮出生物學(xué)作用［5-7］。菌陽(yáng)肺結(jié)核患者的體內(nèi)細(xì)胞因子水平在一定程度上反映出患者的免疫狀態(tài), 通過其變化特點(diǎn)能夠作為藥物治療效果和患者預(yù)后的判斷依據(jù)。本次研究對(duì)菌陽(yáng)肺結(jié)核患者治療前后細(xì)胞因子變化進(jìn)行了分析, 發(fā)現(xiàn)治療后CD3、CD4、CD4/CD8高于治療前,CD8低于治療前, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。治療后,IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α水平均低于治療前, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與仲維高等［8］的同類研究結(jié)果具有相似性。

分析原因, 肺結(jié)核細(xì)胞免疫主要是T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫, 當(dāng)菌陽(yáng)肺結(jié)核患者的外周血CD3、CD4下降, CD8上升, CD4/CD8比值下降, 就會(huì)減弱肺結(jié)核T細(xì)胞功能, 抑制T細(xì)胞過度活化, 進(jìn)而降低了肺結(jié)核患者的免疫功能。而IL和TNF因子在治療前后的變化提示抗結(jié)核藥物能夠調(diào)節(jié)機(jī)體免疫系統(tǒng)細(xì)胞因子的分泌水平, 改善機(jī)體的免疫功能［9, 10］。

綜上所述, 菌陽(yáng)肺結(jié)核患者治療前后細(xì)胞因子變化明顯,檢測(cè)細(xì)胞因子變化可對(duì)菌陽(yáng)肺結(jié)核治療和預(yù)后的判斷提供依據(jù)。

［1］ 周小妮.胸腺五肽聯(lián)合常規(guī)化療治療復(fù)治菌陽(yáng)肺結(jié)核的療效及對(duì)患者呼吸功能和免疫功能的影響.海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2016,22(4):343-345.

［2］ 盛宇超, 袁立, 蔣偉利, 等.肺結(jié)核患者血清Th1/Th2細(xì)胞因子濃度變化及影響因素研究.上海預(yù)防醫(yī)學(xué), 2016, 28(3):157-160.

［3］ 李丹, 杜德兵, 何建, 等.烏體林斯對(duì)初治菌陽(yáng)肺結(jié)核患者血清IFN-γ、IL-10水平的影響及療效觀察.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2011, 21(2):216-219.

［4］ 張錦萍.初治肺結(jié)核患者外周血T淋巴細(xì)胞IL-4、IL-10、IL-18、IL-23及IFN-γ表達(dá)的研究.哈爾濱醫(yī)藥, 2013, 33(4):271-273.

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［8］ 仲維高, 陳愛琴, 劉冰.菌陽(yáng)肺結(jié)核患者治療前后細(xì)胞因子變化研究.中國(guó)急救醫(yī)學(xué), 2015(s1):41-42.

［9］ 楊宇翔, 柯鵬, 曾洪波, 等.初治肺結(jié)核患者強(qiáng)化治療前后血清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ水平變化的臨床意義研究.數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志, 2015(3):334-335.

［10］ 張錦萍.細(xì)胞因子在初治肺結(jié)核患者血液中表達(dá)的研究.社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志, 2014, 12(6):24-26.