程鏡霖
摘 要:農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀與氣相色譜法比較雖然只能做定性分析,但由于其操作簡(jiǎn)單、成本較低、檢測(cè)速率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣相色譜法等優(yōu)點(diǎn),而得到廣泛應(yīng)用。同時(shí)此方法可對(duì)蔬菜和水果進(jìn)行粗篩,從而保障人們食菜安全。本文主要介紹GDYN-106SD農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)儀的原理及操作過(guò)程。
關(guān)鍵詞:農(nóng)藥殘留;快速檢測(cè)
一、農(nóng)藥快速檢測(cè)原理
如果蔬果中沒(méi)有農(nóng)藥或者殘留量低,乙酰膽堿酶活性不被抑制[1]可與乙酰硫代膽堿水解成硫代膽堿和乙酸,其與二硫雙對(duì)硝基苯甲酸產(chǎn)生顯色反應(yīng),使溶液呈黃色。酶活性被抑制的程度即抑制率,就是通過(guò)顏色變化來(lái)體現(xiàn)的。我們檢測(cè)的就是這個(gè)黃色的變化,從而確定蔬果中農(nóng)藥殘留情況。
二、農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀
采用吉大小天鵝GDYN-106SD農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)儀,為測(cè)量波長(zhǎng)在407~413nm之間的分光光度計(jì),反應(yīng)后的淺黃色溶液在410nm處有最大的吸收峰。
三、檢測(cè)試劑
使用上海瑞鑫農(nóng)藥殘留試劑盒,生產(chǎn)批號(hào)2017-4-11,包含試劑如下:
提取液:pH為8的磷酸溶液,加入510ml蒸餾水。
酶液:膽堿酯酶,加入3.1ml提取液。
顯色劑:二硫雙對(duì)硝基苯甲酸,在棕色瓶中加入32ml提取液。
底物:乙酰硫代膽堿,加入3.1ml蒸餾水。
四、校準(zhǔn)及空白測(cè)量
選擇校準(zhǔn)菜單,按確認(rèn)鍵。用移液器提取1.0ml提取液到比色瓶中,再用微量移液器取50ul酶液和50ul顯色劑到比色瓶中,蓋好瓶塞后搖勻,將比色瓶插入1號(hào)比色槽中放置3min,按↑鍵進(jìn)行校準(zhǔn)。按↓進(jìn)行空白測(cè)量,當(dāng)儀器顯示“請(qǐng)加試劑4”,取出校準(zhǔn)后的比色瓶,加入50ul底物,蓋上瓶塞搖勻,將其放入1號(hào)比色槽內(nèi)按確認(rèn)鍵,倒計(jì)時(shí)3min,空白測(cè)量結(jié)束吸光度A1=0.042、A2=0.449,?A=0.407≧0.1。若?A<0.1說(shuō)明酶活性不夠,需要配制新的酶液重新校準(zhǔn)及空白測(cè)量。
五、實(shí)驗(yàn)步驟
1、取樣:用取樣器分別扎取生菜、油麥菜和小白菜葉片1.0g于提取瓶中,將豆角、青茄子和蘋果切成1cm左右,稱取1.0g于提取瓶中。
2、浸提:在提取瓶中加入5ml提取液,超聲提取3min。
3、測(cè)量:分別取1ml提取液于6個(gè)連體比色瓶中,各加入50μl酶液與50μl顯色劑,37℃培養(yǎng)15min,取出比色瓶,各加入50μl底物進(jìn)行測(cè)量,3min后顯示測(cè)量結(jié)果。一臺(tái)儀器每組可進(jìn)行6個(gè)樣品檢測(cè)。
六、檢測(cè)結(jié)果的判定
1、初次檢測(cè)結(jié)果≦50%為合格樣品[2]。
2、檢測(cè)結(jié)果﹥50%的樣品,需要復(fù)檢2次以上,檢測(cè)結(jié)果﹥50%且重復(fù)率≧80%的樣品判定為不合格,重復(fù)率<80%判定為合格。
根據(jù)檢測(cè)結(jié)果判定,以上6個(gè)樣品的農(nóng)藥殘留為合格。
參考文獻(xiàn)
[1]中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn).SY/T488-2001蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)方法、
[2]中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn).GB/T5009.199.2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)、
(作者單位:遼寧省沈陽(yáng))