王燕清 陳嘉璐 羅灼輝 曾華哲*

（1 麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司，廣東 珠海 519020；2 麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠，廣東 珠海 519020）

替加環(huán)素由惠氏（Wyeth）公司研發(fā)，美國(guó)FDA于2005年6月至2006年7月批準(zhǔn)惠氏的替加環(huán)素（Tigecycline，商品名Tygacil注射用替加環(huán)素）為治療復(fù)雜腹腔內(nèi)感染和復(fù)雜皮膚感染的一線藥物[1]，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1。該品種是甘氨酰四環(huán)素類抗生素中獲得批準(zhǔn)的第一個(gè)產(chǎn)品。替加環(huán)素對(duì)G+菌、G-菌、厭氧菌有廣譜抗菌活性, 包括多重耐藥性的G+菌，如MRSA、MRSE、抗青霉素的肺炎鏈球菌、VRE。對(duì)不同耐藥機(jī)制的耐四環(huán)素致病菌同樣有效[1-3]。

圖1 替加環(huán)素結(jié)構(gòu)式

注射用替加環(huán)素在儲(chǔ)存過(guò)程中會(huì)因?yàn)楫a(chǎn)品中存在水分而使其差向異構(gòu)體增加的比例增加，要控制產(chǎn)品中的差向異構(gòu)體的量小于3%，必須嚴(yán)格控制產(chǎn)品的水分在留樣過(guò)程中始終不能超過(guò)2%，條件極其苛刻。但實(shí)際產(chǎn)品在留樣過(guò)程中會(huì)因?yàn)槟z塞本身含有水分等各種因素，很難保證產(chǎn)品在兩年的留樣過(guò)程中始終保持在2%以內(nèi)，從而導(dǎo)致產(chǎn)品的差向異構(gòu)體超標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)擬在生產(chǎn)工藝中增加pH值回調(diào)技術(shù)，可使產(chǎn)品的差向異構(gòu)體在40 ℃加速留樣6個(gè)月內(nèi)增加不超過(guò)0.5%，絕對(duì)值不超過(guò)1.0%，而且水分可控制在4%以內(nèi)，在提高產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)使生產(chǎn)更具有可控性。

表1 不同pH處方工藝40 ℃加速穩(wěn)定性情況

表2 不同pH起點(diǎn)返調(diào)的處方40 ℃加速穩(wěn)定性情況

表3 不同pH返調(diào)終點(diǎn)的處方40 ℃加速穩(wěn)定性情況

表4 不同原料廠家制備成的制劑40 ℃加速穩(wěn)定性數(shù)據(jù)

1 材 料

1.1 實(shí)驗(yàn)器材：冷凍干燥機(jī)、pH計(jì)、水分儀、高效液相色譜儀。

1.2 原料藥：替加環(huán)素、購(gòu)自。

1.3 試劑：NaOH、HCl、注射用水、2M的NaOH溶液、2M的HCl溶液。

2 方法與結(jié)果

2.1 反調(diào)工藝的初步考察：按處方量配制溶液四份，取兩份，以2M鹽酸分別調(diào)pH至4.0、4.8；另取2份，以2M鹽酸調(diào)pH至4.0，再以2M氫氧化鈉分別返調(diào)溶液pH至4.8、5.2，凍干，考察加速實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性變化情況。結(jié)果詳見(jiàn)表1。

由以上數(shù)據(jù)可見(jiàn)，在一定pH范圍內(nèi)，藥液經(jīng)返調(diào)處理，產(chǎn)品穩(wěn)定性明顯高于未經(jīng)返調(diào)的產(chǎn)品，pH4.8與pH4.0返調(diào)至4.8處方相比，加速6個(gè)月內(nèi)，返調(diào)處理可降低EPI增長(zhǎng)率達(dá) 0.9%，且返調(diào)幅度越大，EPI增長(zhǎng)率越低，穩(wěn)定性越高。另外，普通生產(chǎn)工藝下，如果不將產(chǎn)品的水分始終控制在2.0%以下，產(chǎn)品的差向異構(gòu)體無(wú)法達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的3%以下；但是，經(jīng)過(guò)反調(diào)的生產(chǎn)工藝，即使水分最終達(dá)到4.0%，產(chǎn)品仍然合格。

2.2 返調(diào)起點(diǎn)的考察：按處方量配制溶液若干份，取三份，以2M鹽酸分別調(diào)pH至4.0、3.5、3.0，再以2M氫氧化鈉返調(diào)pH至5.2，凍干，考察加速實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性變化情況。結(jié)果詳見(jiàn)表2。

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得出結(jié)論，返調(diào)起點(diǎn)對(duì)產(chǎn)品的穩(wěn)定性有明顯的影響，在一定的pH范圍內(nèi)，返調(diào)前pH值越低，返調(diào)幅度越大，雜質(zhì)EPI越小，產(chǎn)品越穩(wěn)定。因此試探著往更低的考察。

研究數(shù)據(jù)表明，把返調(diào)起點(diǎn)控制在pH 2.0～2.5，加速實(shí)驗(yàn)6個(gè)月內(nèi)，能把EPI增長(zhǎng)控制在0.5%以內(nèi)。因而處方工藝返調(diào)起點(diǎn)可定在pH 2.0～2.5。

2.3 返調(diào)終點(diǎn)的考察：由2.1可知，當(dāng)返調(diào)起點(diǎn)相同時(shí)，不同的返調(diào)終點(diǎn)對(duì)產(chǎn)品的穩(wěn)定性也會(huì)產(chǎn)生一定的影響，因此，我們繼續(xù)考察不同返調(diào)終點(diǎn)的影響情況。

按處方量配制溶液若干份，取兩份，以2M鹽酸調(diào)pH2.5，再以2M氫氧化鈉分別返調(diào)pH至5.2、6.0。凍干，考察加速實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性變化情況。結(jié)果詳見(jiàn)表3。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，以pH2.5為返調(diào)起點(diǎn)時(shí)，返調(diào)至pH5.2與返調(diào)至6.0，加速6個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定性差異較小，返調(diào)至6.0，成品EPI略優(yōu)約0.1%；另一方面，考慮到替加環(huán)素進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)中制劑以5.3 mL生理鹽水復(fù)溶后pH要求在4.5～5.5，故把返調(diào)終點(diǎn)定在pH4.8～5.4。

2.4 生產(chǎn)工藝適應(yīng)性驗(yàn)證：為了驗(yàn)證確定后的生產(chǎn)工藝，選擇了市場(chǎng)上獲得的其他三個(gè)不同廠家的小試原料，按照確定的生產(chǎn)工藝進(jìn)行小試生產(chǎn)，并留樣考察其穩(wěn)定性情況，結(jié)果見(jiàn)表4。

由以上數(shù)據(jù)可知，該生產(chǎn)工藝適合于該產(chǎn)品其他廠家原料用于制劑生產(chǎn)，且研究表明該工藝下，即使產(chǎn)品的水分高于進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的2%達(dá)到4%時(shí)，產(chǎn)品穩(wěn)定性沒(méi)有發(fā)生明顯的變化。

3 討 論

3.1 注射用替加環(huán)素在生產(chǎn)過(guò)程中，如果采用普通工藝，必須嚴(yán)格控制產(chǎn)品的水分，保證留樣過(guò)程中始終小于2%，方可保證產(chǎn)品質(zhì)量。

3.2 采用pH反調(diào)工藝，可提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性，可大大降低產(chǎn)品差向異構(gòu)體的產(chǎn)生，保證產(chǎn)品的差向異構(gòu)體有效期內(nèi)小于1%。

3.3 采用pH反調(diào)工藝，大大提高了注射用替加環(huán)素的生產(chǎn)可控性，在產(chǎn)品的水分達(dá)到4.0%以內(nèi)，產(chǎn)品穩(wěn)定性良好。

參考文獻(xiàn)

[1] Wyeth Pharmaceutics Tygacil (Tigecycline) for Injection [package insert] [M].Philadelphia, PA: Wyeth Pharmaceuticals Inc,2005.

[2] Athwan ID.Tigecycline clinical evidence and formulary positioning[J].Int J Antimicrob Agents,2005,25(3):185-192.

[3] Zhanel GG,Homenuik K,Nicholk,et al.Eglycy lcyclines a comparative review with the tetracyclines[J].Drugs,2004,64(1):63-88.