謝鵬，蔣洪梅

(1.內(nèi)江職業(yè)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)江 641100；2.四川恒通動(dòng)物制藥有限公司，內(nèi)江 641000)

0 引言

微量元素是動(dòng)物生長發(fā)育過程中必不可少的營養(yǎng)元素，雖然動(dòng)物對其需求量較少，但是當(dāng)飼料中缺乏時(shí)，將會(huì)對動(dòng)物的生長發(fā)育造成極大的危害，因而在動(dòng)物日常飼養(yǎng)管理中，我們都要補(bǔ)充一定量的微量元素。生產(chǎn)實(shí)踐中補(bǔ)充微量元素的方法多種多樣，如加入飼料或飲水中混飼、灌服、舔食等，這些方法目前在眾多大中型養(yǎng)殖場中廣泛使用，但它們存在浪費(fèi)大、補(bǔ)充效果不確實(shí)等一些列弊端。為了更好地控制養(yǎng)殖成本，提高微量元素制劑的使用效率，我們考慮把動(dòng)物所需的各種微量元素混合、溶解，制成針劑，利用注射的途徑來補(bǔ)充動(dòng)物對微量元素的需要，這樣不僅最大限度的提升了微量元素及其制劑的使用效率，同時(shí)其補(bǔ)充量精確到了每一頭畜禽，效果確實(shí)。下面將這種注射液的制備工藝報(bào)道如下。

1 試驗(yàn)材料

1.1 藥品與試劑

檸檬酸鐵（分子式C6H5FeO.5H2O）、硫酸鋅（分子式ZnSO4.7H2O）、硫酸銅（分子式CuSO4·5H2O）、硫酸錳（分子式MnSO4·H2O）、硫酸鈷（分子式CoSO4·7H2O）、亞硒酸鈉（分子式Na2SeO3·5H2O），純度均為AR級，購自上海天齊生物科技有限公司；注射用水；氫氧化鈉（NaOH）緩沖液。

1.2 儀器

分析天平；1000 mL容量瓶；布氏漏斗；2 mL 曲頸易折安瓿，購自濮陽市魯蒙玻璃制品有限公司；1000 mL燒杯；玻棒；pH試紙；單針豎式灌注器，RFJ安瓿熔封機(jī)，購自吉首市中誠制藥機(jī)械廠；高壓滅菌鍋；YZ1/20型安瓿印字、包裝機(jī)，長沙中南制藥機(jī)械廠。

2 制備工藝[1-2]

2.1 原輔料及容器、設(shè)備的前處理

2.1.1 生產(chǎn)環(huán)境的清潔消毒

由于注射劑是直接注入動(dòng)物體內(nèi)的，因而對生產(chǎn)環(huán)境和設(shè)備的要求較高。要求整個(gè)生產(chǎn)區(qū)域在靜態(tài)條件下檢測到的塵埃粒子數(shù)、浮游菌數(shù)或沉降菌數(shù)必須符合國家標(biāo)準(zhǔn)。一般生產(chǎn)環(huán)境用0.1%的新潔爾滅噴霧消毒，按先上后下、先物后地、先折后洗、先零后整的原則進(jìn)行。而后用帶有消毒劑的拖把、抹布擦洗地板、墻壁，半小時(shí)后用注射用水沖洗干凈，使生產(chǎn)環(huán)境達(dá)到萬級潔凈區(qū)。此外，生產(chǎn)環(huán)境的濕度應(yīng)控制在45%～65%，最大不超過75%。

2.1.2 原料的準(zhǔn)備

依據(jù)配方，利用分析天平準(zhǔn)確稱取檸檬酸鐵（C6H5FeO7·5H2O）8.0 g、硫酸鋅（ZnSO4·7H2O）3.5 g、硫酸銅（CuSO4·5H2O）1.8 g、硫酸錳（MnSO4·H2O）0.8 g、硫酸鈷（CoSO4·7H2O）0.8 g、亞硒酸鈉（Na2SeO3·5H2O）0.1 g置于潔凈的燒杯中備用。

2.1.3 注射容器的處理

注射劑（尤其是小容量注射劑）的盛裝容器主要是安瓿，試驗(yàn)中選擇2 mL曲頸易折安瓿，要求所選擇的安瓿為棕色，質(zhì)量符合國家標(biāo)準(zhǔn)，用離子交換水灌瓶蒸煮，而后用注射用水沖淋，而后置于180 ℃的烘箱中干熱滅菌1.5 h。

2.1.4 其他容器設(shè)備的處理

主要包括燒杯、容量瓶、漏斗、單針豎式灌注器等的清洗、消毒。燒杯、容量瓶等先用蒸餾水清洗3～5次，再用注射用水沖洗2～3次，并置于烘箱中烘干后備用。布氏漏斗、單針豎式灌注器先用2%～4%的NaOH消毒，再用蒸餾水清洗3～5次，最后用注射用水沖洗2～3次，烘干備用。

2.2 藥液的配制與過濾

將準(zhǔn)確稱量的藥品倒入潔凈的燒杯中，向燒杯中倒入600 mL注射用水，將燒杯及其內(nèi)容物置于80℃的恒溫水浴鍋中加熱溶解，并不斷用玻棒攪拌，直至燒杯中藥品完全溶解為止。過濾裝置選用布氏漏斗，粗濾時(shí)先用紗布墊在漏斗底部，在紗布上鋪一層活性炭，而后再鋪上一層紗布，將配制好的藥液倒入漏斗中過濾。粗濾完成后，將漏斗中的紗布和活性炭取出，在漏斗中放入直徑為1 um的多孔塑料，將粗濾后的濾液再次倒入漏斗中精濾。將精濾后的濾液倒入1000 mL的容量瓶中，再緩慢倒入注射用水，直至藥液的總?cè)莘e達(dá)到1000 mL時(shí)止。

2.3 藥液的pH調(diào)整[3-4]

依據(jù)《中國藥典》2000年版規(guī)定，注射劑的pH值為4.0～9.0之間。用氫氧化鈉（N a O H）緩沖液（0.1 mol·L-1）調(diào)節(jié)制劑的pH值，觀察調(diào)整后制劑的顏色（與標(biāo)準(zhǔn)比色劑比較）和澄明度，確定出藥液的pH為4.5～6.5。結(jié)果表1：

表1 pH對畜禽用多種微量元素注射液澄明度與顏色的影響

2.4 藥液灌封

選用單針豎式灌注器進(jìn)行手工灌注。首先將配置好的藥液倒入豎式灌注器內(nèi)，利用定位螺絲和微調(diào)螺絲將灌注體積調(diào)整為2 mL。上提灌注器的唧筒，使筒內(nèi)壓力減小，下活塞開放，上活塞關(guān)閉，將藥液吸入；而后再下壓灌注器唧筒，增大筒內(nèi)壓力，使上活塞開放、下活塞關(guān)閉，將藥液注入準(zhǔn)備好的安瓿瓶內(nèi)。如此反復(fù)，進(jìn)行灌注。在灌裝時(shí)一定注意不要將藥液噴灑在安瓿瓶壁上，灌裝結(jié)束后向安瓿內(nèi)通入氮?dú)庖淮巍?/p>

灌裝好的安瓿要及時(shí)熔封。熔封時(shí)首先連接好熔封機(jī)的燃?xì)夤艿?，插好電源，打開電源開關(guān)，而后慢慢開啟燃?xì)忉樞烷y，直到點(diǎn)著針頭，慢慢開啟助燃?xì)忉樞烷y，直到兩個(gè)針頭發(fā)出細(xì)長藍(lán)色火焰為止，此時(shí)熔封機(jī)處于工作狀態(tài)，藍(lán)色火焰越長越好。調(diào)整火焰的位置和高度，使火焰處于托盤中心和安瓿拉絲位置處，把灌好藥液的安瓿放置于托盤上，并徐徐放入火焰中心，左手勻速轉(zhuǎn)動(dòng)瓶子，等燒到煅紅色時(shí)右手用鑷子把上截拉掉即可。安瓿熔封時(shí)應(yīng)嚴(yán)密，無縫隙、不漏氣，頸端應(yīng)圓整光滑，無尖頭及小泡。

2.5 藥物的滅菌與檢漏

將分裝好的安瓿置于滅菌柜中，向滅菌柜通入100 ℃飽和蒸汽30 min，即可達(dá)到滅菌效果。

滅菌完成后，立即對安瓿進(jìn)行檢漏。向滅菌后且溫度較高的滅菌鍋內(nèi)加入有顏色的水，使鍋內(nèi)安瓿突然遇冷，瓶內(nèi)壓力減小，當(dāng)熔封效果不好時(shí)，顏色水即從漏氣的毛細(xì)孔中進(jìn)入瓶內(nèi)而被檢出。

2.6 藥液的質(zhì)量檢查

為確保注射劑的質(zhì)量，在分裝完成后，常常要對藥液進(jìn)行質(zhì)量抽查。注射液的質(zhì)量檢查主要包括以下幾個(gè)方面的內(nèi)容：

2.6.1 澄明度檢查

注射劑的澄明度檢查常選用24 in青光日關(guān)燈作為光源，其燈管直徑為3.8 cm，20 w，做成傘棚式裝置。背景用不反光的黑色絨布，并在背部面?zhèn)?/3處和底部為不反光的白色（供檢有色物質(zhì)）。檢查時(shí)先抽樣200支，擦凈安瓿外表面，每次取6支，在距光源20 cm處輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)試劑瓶進(jìn)行檢查，檢查時(shí)間為18 s。當(dāng)發(fā)現(xiàn)安瓿瓶內(nèi)無異物或僅帶少量白點(diǎn)時(shí)判定為合格。經(jīng)檢查，本試驗(yàn)抽檢的200支安瓿瓶內(nèi)無異物，因而判定本批試劑澄明度合格。

2.6.2 熱原檢查[5-7]

利用鱟試驗(yàn)法進(jìn)行檢測，其原理是利用鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生的膠凝反應(yīng)來判斷細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定。具體操作為：取裝有0.1 mL鱟試劑的安瓿5支，其中2支加入0.1 mL供試品溶液作為供試管，1支加入0.1 mL細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)工作液作為陽性對照管，1支加入0.1 mL細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水作為陰性對照管，1支加入0.1 mL供試品陽性對照液（供試品中加入細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)液）做為供試品陽性對照管，將安瓿中溶液輕輕混勻后密封，垂直放于37 ℃的恒溫器中，保溫60 min，然后觀察結(jié)果。

結(jié)果判斷：將安瓿輕輕取出，緩緩倒轉(zhuǎn)180°時(shí)，管內(nèi)凝膠不變形，不從管壁脫落為陽性（+），凝膠不能保持完整，或脫滑者為陰性（-）。2支供試品管均為陰性（-）則認(rèn)為供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查合格，否則不合格。陽性對照管或供試品對照管為陰性（-），陰性對照管為陽性（+），則試驗(yàn)無效。如2支供試品管1支為陽性（+），1支為陰性（-），則需按上述方法另取4支供試品進(jìn)行復(fù)試，4支供試品中有1支為陽性（+），則供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查不合格。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 用鱟試驗(yàn)法檢查試驗(yàn)品熱原

從上述測定可以看出，本批次的注射劑熱原含量符合國家標(biāo)準(zhǔn)。

2.6.3 無菌檢查

主要利用直接接種法進(jìn)行檢查?；静僮鞣椒ㄊ菍⒐┰嚻啡芤航臃N于培養(yǎng)基上，培養(yǎng)數(shù)日后觀察培養(yǎng)基上是否出現(xiàn)渾濁或沉淀，并與陽性及陰性對照品比較。經(jīng)檢查本試驗(yàn)品細(xì)菌含量符合國家標(biāo)準(zhǔn)。

2.7 印字、包裝

注射劑經(jīng)質(zhì)量檢測合格后方可印字與包裝。每支注射劑均須印上品名、規(guī)格、批號等。印字方法主要選用手工印字法，所印字跡應(yīng)清晰可見，且不易抹掉。

裝安瓿的紙盒內(nèi)應(yīng)襯有瓦楞紙，并應(yīng)放有割頸用小砂石片及使用說明書。盒外應(yīng)貼標(biāo)簽，標(biāo)簽上須注明下列內(nèi)容：（1） 注射劑名稱（中文、拉丁文全名）；（2）內(nèi)裝支數(shù)；（3） 每支容量與主藥含量；（4） 批號、制造日期與失效日期；（5） 處方；（6） 制造廠名稱和地址；（7） 應(yīng)用范圍、用法、用量、禁忌；（8） 貯藏方法與條件。

3 討論

（1）為確保注射液中各成分的含量，原料在溶解時(shí)一定要充分，溶解過程中的加熱時(shí)間要短，否則在高溫條件下可能會(huì)引發(fā)各種元素的衰減。同時(shí)在稱量時(shí)可酌情增加投料量，具體投料量可選用以下公式進(jìn)行計(jì)算：原料（附加劑）實(shí)際用量=原料（附加劑）理論用量×成品標(biāo)示量百分?jǐn)?shù)/原料（附加劑）實(shí)際含量；原料（附加劑）用量=實(shí)際配液量×成品含量%，實(shí)際配液量=實(shí)際灌注量+實(shí)際灌注時(shí)的損耗量。

（2）微量元素的保存受溫度、光照等條件的影響較大，因而在分裝藥品一定要選擇適當(dāng)?shù)氖⒀b容器。其盛裝容器的選擇一定要參考藥品的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。本試驗(yàn)品選擇棕色安瓿瓶盛裝。

（3）試劑的pH值偏高或偏低均不利于注射液的吸收，同時(shí)還會(huì)影響藥品性狀和增加動(dòng)物疼痛感，因而合理的藥液pH對于藥物的療效也是十分重要的，同時(shí)藥液的pH對微量元素的穩(wěn)定性也會(huì)造成極大影響，，本品的pH定在4.5～6.5之間。

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