張瓊
(商丘市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,河南 商丘476100)
中草藥添加劑芪參散是由黃芪、黨參等按一定比例組成補(bǔ)中益氣增強(qiáng)機(jī)體抵抗力的中草藥添加劑,該添加劑用于肉仔雞的飼養(yǎng)試驗(yàn),探討中草藥添加劑芪參散對肉仔雞免疫功能和抗氧化能力的影響,為中草藥添加劑芪參散用于肉仔雞生產(chǎn)提供理論依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料與基礎(chǔ)日糧
中草藥添加劑芪參散組成:由黃芪、黨參、白術(shù)、山藥、麥芽、神曲、甘草七味中藥組成,配方比例為黃芪18%、黨參16%、白術(shù)18%、山藥20%、麥芽10%、神曲8%、甘草10%,把上述諸藥混合后用超微粉粉碎機(jī)粉碎成細(xì)末狀,試驗(yàn)備用。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì)
選擇1日齡出生體重相近體質(zhì)健康的1日齡AA肉雞200只,,隨機(jī)分成4組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10只,對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)1組、2組和3組分別飼喂在基礎(chǔ)日糧上添加1%、2%和4%的芪參散的日糧,試驗(yàn)期6周。
表1 日糧配方及營養(yǎng)水平
總磷/% 0.68 0.66賴氨酸/% 1.15 1.10蛋氨酸/% 0.54 0.49
1.3 飼養(yǎng)管理
試驗(yàn)前雞舍進(jìn)行消毒,采用三層籠養(yǎng),自由飲水、采食,光照通風(fēng)良好,定期清理糞便,消毒防疫按常規(guī)程序進(jìn)行。
1.4 血液和組織樣品采集制備
在第42d時(shí)空腹稱重后,每試驗(yàn)組取3只雞,翅下靜脈采血,離心制備血清置于冰箱于-30℃保存待測。按常規(guī)方法進(jìn)行屠宰,分離肝臟、胸腺、脾臟和法氏囊稱重。肝臟去脂濾紙吸干后取1.0g剪碎混勻加9倍生理鹽水,置玻璃勻漿器中制成10%的組織勻漿,3000r/min離心10min取上清液于-30℃保存待測。
1.5 測試項(xiàng)目和方法
免疫器官免疫指數(shù)(g/kg)=器官重/活體重。采用ELISA法測定IgA、IgM、IgG的含量,用黃嘌呤氧化酶法測定SOD活性,硫代巴比妥法測定MDA含量。試劑盒購自南京建成生物工程研究所,按照試劑盒操作說明書進(jìn)行測定。
1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)處理軟件的One-WayANOVA法進(jìn)行方差分析,用LSD法進(jìn)行多重比較各組間平均數(shù)的差異顯著性,以P<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn),試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示
2.1 對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響 見表2.
表2 芪參散對肉雞免疫器官指數(shù)的影響
試驗(yàn) 3 組 1.37±0.17b 3.31±0.22b 2.28±0.19b
注:數(shù)據(jù)同列肩標(biāo)相鄰小寫字母表示差異顯著(P<0.05),數(shù)據(jù)同列相同肩標(biāo)或未標(biāo)肩標(biāo)者表示差異不顯著(P>0.05)。以下各表同
由表2可見,添加芪參散的試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組較對照組脾臟指數(shù)分別提高28.45%、45.10%、34.31%,差異顯著(P<0.05),與對照組相比試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組胸腺指數(shù)較對照組分別提高24.26%、27.21%、21.69%,差異顯著(P<0.05),試驗(yàn) 1組、試驗(yàn) 2組、試驗(yàn)3組法氏囊指數(shù)分別比對照組提高20.11%、27.17%、23.91%,差異顯著(P<0.05)。由此表明添加芪參散能提高肉雞的免疫器官指數(shù),從而提高肉雞的免疫機(jī)能,其中芪參散添加量2%效果最好。
2.2 芪參散對血清免疫球蛋白含量的影響 見表3。
表3 芪參散對仔雞血清免疫球蛋白含量的影響 單位(g/L)
由表3可知,試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組與對照組相比IgA含量分別提高了15.96%、12.65%(P<0.05);試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組與對照組相比IgG含量分別提高了 22.12%和 16.28%(P<0.05),(P>0.05);試驗(yàn)1組、2組和3組較對照組IgM均有所提高,但差異不顯著(P>0.05)。
2.3 芪參散對肉仔雞血清中SOD活性和MDA含量的影響 見表4.
表4 芪參散對肉仔雞血清中SOD活性和MDA含量的影響
由表4可見,試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組SOD活性比對照組分別提高 22.50%、19.60%(P<0.05),試驗(yàn)1組、2組和3組MDA的含量有下降的趨勢,但差異不顯著(P>0.05)。
3.1 芪參散對免疫器官指數(shù)的影響
胸腺和脾臟是動(dòng)物的主要免疫器官,參與機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫;法氏囊是家禽特有的中樞免疫器官參與機(jī)體的體液免疫,胸腺、脾臟、法氏囊發(fā)育狀態(tài)和機(jī)能強(qiáng)弱對禽類免疫水平起決定作用。而免疫器官指數(shù)是衡量動(dòng)物機(jī)體免疫水平的重要指標(biāo)[1]。本試驗(yàn)結(jié)果表明添加芪參散能提高肉雞的免疫機(jī)能,其中2%的芪參散添加量效果較理想。
3.2 芪參散對血清免疫球蛋白的影響
免疫球蛋白是由動(dòng)物免疫系統(tǒng)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì),它是體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮免疫功能最重要的免疫分子。而參與粘膜免疫反應(yīng)的主要活性物質(zhì)即是免疫球蛋白,病毒特異性IgA抗體水平是評(píng)價(jià)機(jī)體免疫水平高低的重要標(biāo)志[2]。IgA、IgM、IgG三種免疫球蛋白是參與體液免疫的主要抗體,三者在血清中的含量可以代表血清免疫球蛋白的整體水平,其含量是動(dòng)物體液免疫的重要指標(biāo)[3]。本試驗(yàn)中添加芪參散提高了肉仔雞IgA、IgM、IgG的含量,試驗(yàn)2、3組IgA、IgG顯著提高,綜合各項(xiàng)指標(biāo)表明,添加2%芪參散效果最好。
3.3 芪參散對肉仔雞抗氧化能力的影響
超氧化歧化酶(SOD)在清除自由基,抗氧化損傷和維持細(xì)胞的結(jié)構(gòu)方面起著重要的作用,其活力的高低反應(yīng)了機(jī)體清除自由基的能力,丙二醛(MDA)是體內(nèi)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)鏈中終產(chǎn)物,含量高低可以反映該體系中脂質(zhì)過氧化自由基的存在及細(xì)胞膜過氧化的程度,SOD的活力常與MDA含量相結(jié)合,以反映機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度和機(jī)體清除氧自由基的能力[4]。本試驗(yàn)添加芪參散提高了肉仔雞血清和肝臟中SOD活性,并降低了血清和肝臟中MDA的含量,其中添加2%芪參散效果最好。
日糧里添加芪參散能提高肉仔雞的免疫器官指數(shù)、IgA、IgM和IgG免疫球蛋白的含量和肉仔雞血清中SOD活性,從而提高肉仔雞的免疫機(jī)能和抗氧化能力,且日糧里添加2%芪參散效果最好。
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