（河南省水產(chǎn)技術(shù)推廣站，鄭州 450008）

在水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的眾多疾病中，細(xì)菌、真菌、霉菌性疾病約占總發(fā)病率的50%以上，也是導(dǎo)致養(yǎng)殖生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)損失的主要原因。對于由致病微生物引起的水產(chǎn)動物疾病，抗生素治療是主要手段，而藥物敏感性試驗(yàn)是確定抗生素類藥物使用劑量的唯一依據(jù)。但是長期以來，由于我國沒有開展水產(chǎn)養(yǎng)殖動物藥物敏感性普查，沒有掌握其對各種抗菌藥物敏感性變化規(guī)律，導(dǎo)致水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者科學(xué)用藥沒有依據(jù)，漁藥濫用成了普遍現(xiàn)象，水產(chǎn)品質(zhì)量安全得不到有效保障，制約了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展。為了解河南省內(nèi)人工養(yǎng)殖魚類主要致病菌藥物敏感性情況，幫助我省執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師（水生）科學(xué)選擇和使用水產(chǎn)抗菌素類藥物，我站于2017年4月～10月，從河南省人工養(yǎng)殖黃河鯉和斑點(diǎn)叉尾鮰比較集中的區(qū)域選擇示范點(diǎn)，采集患病的魚并分離致病菌，測定其對水產(chǎn)用抗菌素類藥物的敏感性。具體分析情況如下：

1 材料與方法

1.1 供試藥物

測試所用藥物包括磺胺二甲嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、氟苯尼考、恩諾沙星、鹽酸環(huán)丙沙星、強(qiáng)力霉素、硫酸新霉素、鹽酸土霉素、硫氰酸紅霉素、氨芐西林鈉、甲砜霉素和交沙霉素，共計(jì)14種藥物。測試所用抗菌類藥物樣品均由全國水產(chǎn)技術(shù)推廣總站提供。

1.2 供試菌株

2017年4～10月，分別從河南省洛陽孟津縣白鶴鎮(zhèn)、鄭州滎陽王村黃河灘、鄭州中牟縣雁鳴湖鎮(zhèn)、開封水稻鄉(xiāng)回回寨村、新鄉(xiāng)延津縣胙城鄉(xiāng)龍祥養(yǎng)殖基地等12個(gè)養(yǎng)殖池塘飼養(yǎng)的黃河鯉魚和斑點(diǎn)叉尾鮰體內(nèi)，分離到57株菌株，其中27株維氏氣單胞菌(Aeromonas veronii)，1株未定種的氣單胞菌(Aeromonas spp.)、1株嗜水氣單胞菌 (Aeromonas hydrophila)、1 株豚鼠氣單胞菌(Aeromonas caviae)、8 株不動桿菌 (Acinetobacter spp.)、1株瓊氏不動桿菌(Acinetobacter junii)、1株沃氏不動桿菌(Acinetobacter lwoffii)、4 株芽孢桿菌（Bacillus spp.）、4 株其他桿菌、5株球菌和4株其他細(xì)菌。

1.3 供試菌株最小抑菌濃度的測定

將供試藥物采用適宜的溶媒溶解后，用滅菌生理鹽水分別稀釋至所需濃度。在無菌條件下，取96孔板，在第1～12孔分別加入100 μL的MH液體培養(yǎng)基，取100 μL的藥物原液加入第一孔中，混勻后吸取100 μL加入第二孔，混勻后吸取100μL至第3孔，以此方法稀釋至第11孔，吸取100 μL棄掉。分別在1～10孔、12孔加入100 μL濃度約為1.2*106cfu/mL的活菌液，其中11孔為不加菌液對照，12孔為不加藥物對照，每種藥物做兩個(gè)平行，置于28℃培養(yǎng)5d，通過肉眼判定，無菌生長孔對應(yīng)最低藥物濃度，即為藥物的最小抑菌濃度 (minimum inhibitory concentration，MIC)。

2 結(jié)果

2.1 維氏氣單胞菌對抗菌藥物的敏感性

27株維氏氣單胞菌對各種抗菌藥物敏感性如表1所示。

2.2 氣單胞菌對抗菌藥物的敏感性

表1 維氏氣單胞菌對各種抗菌藥物的敏感性

1株未定種的氣單胞菌、1株豚鼠氣單胞菌和1株嗜水氣單胞菌對各種抗菌藥物敏感性如表2所示。

2.3 不動桿菌對各種抗菌藥物的敏感性

表2 未定種的氣單胞菌、1株豚鼠氣單胞菌和1株嗜水氣單胞菌對各種抗菌藥物的敏感性

8株不動桿菌、1株沃氏不動桿菌和1株瓊氏不動桿菌對抗菌藥物的敏感性見表3。

2.4 芽孢桿菌及其他桿菌對各種抗菌藥物的敏感性

表3 不動桿菌對抗菌藥物的敏感性

4株芽孢桿菌及4株其他桿菌對抗菌藥物的敏感性見表4，其他桿菌包括1株棒狀桿菌、1株微小桿菌、1株弗氏檸檬酸桿菌和1株腸桿菌。

2.5 球菌對抗菌藥物的敏感性

表4 芽孢桿菌及其他桿菌對抗菌藥物的敏感性

5株球菌（1株葡萄球菌、1株耐輻射奇異球菌、2株糞腸球菌、1株微球菌）對抗菌藥物的敏感性如表5所示。

2.6 其他

表5 球菌對抗菌藥物的敏感性

表6 4株其他細(xì)菌對抗菌藥物敏感性

在試驗(yàn)過程中還分離到4株其他細(xì)菌，分別是1株歐文氏菌、1株分散泛菌、1株類志賀鄰單胞菌和1株克雷伯氏肺炎菌，對抗菌藥物的敏感性測定結(jié)果如表6所示。

3 分析與建議

3.1 關(guān)于水生動物致病菌藥物敏感性的分析

本次分離到的27株維氏氣單胞菌，對鹽酸環(huán)丙沙星、恩諾沙星和強(qiáng)力霉素MIC值在0.10～50 mg/L之間，在所測試的抗菌藥物中，為較敏感的藥物；對磺胺二甲嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺甲惡唑和磺胺間甲氧嘧啶MIC值均在100 mg/L以上，為敏感性最低的藥物；對氟苯尼考、硫酸新霉素、硫氰酸紅霉素和甲砜霉素具有相似的敏感度，MIC值位于0.39-50 mg/L之間；鹽酸土霉素、氨芐西林鈉和交沙霉素MIC值≥0.39 mg/L，敏感度相對氟苯尼考、硫酸新霉素、硫氰酸紅霉素和甲砜霉素的敏感度較低。其他30株菌株對各種抗菌藥物的敏感性與維氏氣單胞菌具有相似的結(jié)果，對四種磺胺類藥物敏感性最低，對鹽酸環(huán)丙沙星、恩諾沙星和強(qiáng)力霉素敏感性較高。

3.2 關(guān)于目前選擇用藥的建議

從目前的檢測結(jié)果表明，養(yǎng)殖戶在選擇用藥時(shí)，恩諾沙星和強(qiáng)力霉素為首選抗菌藥物，氟苯尼考、硫酸新霉素、硫氰酸紅霉素和甲砜霉素可以考慮選用，盡量不要選擇磺胺類藥物。在魚病發(fā)生，最科學(xué)、最有效的用藥方式還是測試致病菌的MIC值，確定治療藥物及用量。

[1]李愛華.水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用的抗菌藥物及細(xì)菌耐藥性[J].中國水產(chǎn)科學(xué)，2002，9(1):87-91.

[2]王小亮，王靜波，徐立蒲，等.2016年北京市魚類致病菌對抗菌藥物的敏感性監(jiān)測分析[J].中國水產(chǎn)，2017(1):110-113.

[3]田甜.魚源嗜水氣單胞菌的分離鑒定及耐藥性研究[J].武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

[4]胡元瑋，吳斌，陳志清，等.水產(chǎn)魚中致病性弧菌主動監(jiān)測及危險(xiǎn)分析[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2015(11):3726-3727.