周媛 ，朱萌 ，李志賽 ，曲偉杰 ，代飛燕 ，2，肖嘯 ，2

（1.云南農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院，云南 昆明 650201；2.云南農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)院，云南 昆明 650031）

小反芻獸疫是小反芻獸疫病毒引起的一種急性高度接觸性傳染病，主要感染小反芻動物，綿羊和山羊隨著年齡的增長感染率增高，幼畜發(fā)病后死亡率極高。該病為烈性傳染病，已被國際動物衛(wèi)生組織（OIE）列為A類動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。

羊支原體性肺炎是由絲狀支原體山羊亞種、綿羊肺炎支原體和山羊支原體山羊亞種等支原體引起的高度接觸性傳染病。病羊臨床特征為體溫升高、咳嗽、呼吸急促，懷孕母羊感染該病會發(fā)生流產(chǎn)。小反芻獸疫和支原體性肺炎在羊發(fā)生應激、免疫力下降時，可引起繼發(fā)、混合感染，導致病情復雜、免疫失敗及羊的死亡率明顯上升等。

小反芻獸疫和支原體肺炎可采用RT-PCR檢測方法檢測。

1 材料

1.1 試驗樣品 某羊場的送檢綿羊一只。

1.2 臨床癥狀 送檢綿羊食欲、精神不振，被毛無光澤，高熱，呼吸困難，流清亮鼻液，口內(nèi)、齒齦出現(xiàn)紅色潰瘍，伴發(fā)腹瀉，最后死亡。

1.3 病理解剖 患羊氣管和支氣管充血、出血，有大量瘀血塊；肺與胸部粘連，呈纖維素性壞死，部分發(fā)生肝變，肺小葉間質(zhì)增寬；瘤胃出血，腸管出血嚴重；脾臟邊緣腫大，內(nèi)部出血；心包積液，腎臟腫大，表面有出血點。

2 實驗

采集病死綿羊病料（肺臟1份，鼻腔棉拭紙3份，心臟1份，脾臟1份，血液1份）。經(jīng)模板提取、體系擴增、瓊脂凝膠電泳后，對觀察到的陽性結(jié)果進行統(tǒng)計和分析。

圖1 小反芻獸疫PCR檢測結(jié)果

2.1 小反芻獸疫PCR檢測結(jié)果 從圖1可以看出，從右往左，一個marker，一個陰性對照，一個陽性對照，五份樣品（按數(shù)字順序依次是心臟，肺，脾及兩份鼻腔分泌物）。陽性對照基因片段為351bp，其中肺臟和鼻腔分泌物呈陽性。

2.2 支原體檢測結(jié)果 從圖2可以看出，兩個marker，兩個對照（其中一個陽性，一個陰性），三個樣品（按數(shù)字順序依次為肺，血液，鼻腔分泌物）。陽性對照基因片段為500bp，其中肺和鼻腔分泌物呈陽性。

圖2 支原體PCR檢測結(jié)果

3 診斷

結(jié)合臨床癥狀、病理變化、實驗室診斷，確診本例綿羊為小反芻獸疫和支原體混合感染。