羅映月

摘 要：農(nóng)藥能有效地預(yù)防病蟲(chóng)害，提高糧食、蔬菜的產(chǎn)量。但如果使用過(guò)多的農(nóng)藥，就會(huì)使蔬菜中有大量的農(nóng)藥殘留，會(huì)對(duì)食用者的身體健康造成巨大損害。預(yù)防蔬菜病蟲(chóng)害的農(nóng)藥很多，主要以有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥為主。為了檢測(cè)上述農(nóng)藥在蔬菜中的殘留物，通常會(huì)采用乙酰膽堿酶活性檢測(cè)法。這種檢測(cè)方法簡(jiǎn)易快速，能夠定性、定量地檢測(cè)出蔬菜中有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的含量。在環(huán)境溫度為10℃到40℃的時(shí)候，檢測(cè)的精度最高，能將敵敵畏、辛硫磷、甲基對(duì)硫磷的檢測(cè)濃度降低到0.5mg/kg，將甲胺磷的檢測(cè)濃度降低到0.89mg/kg。本文具體研究了蔬菜農(nóng)藥殘留的檢測(cè)技術(shù)，對(duì)該技術(shù)的發(fā)展前景做出了展望。

關(guān)鍵詞：有機(jī)磷農(nóng)藥；氨基甲酸酯農(nóng)藥；酶活性檢測(cè)法

蔬菜中有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的檢測(cè)工作非常重要，是保障消費(fèi)者生命安全的有效措施。通常會(huì)采用火焰光度法來(lái)檢測(cè)有機(jī)磷，但這種方法檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、費(fèi)用高，很難迅速地鑒定出蔬菜中農(nóng)藥的殘留量。為了防止消費(fèi)者食用有機(jī)磷農(nóng)藥的蔬菜，我國(guó)應(yīng)該探索出一種簡(jiǎn)單、快捷、靈敏度高的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法。農(nóng)業(yè)科技人員通過(guò)多方面的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，乙酰膽堿酯酶能靈敏地檢測(cè)出有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的殘留量，該方法在蔬菜農(nóng)藥檢測(cè)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，能迅速地檢測(cè)出含有農(nóng)藥殘留的蔬菜，從而使消費(fèi)者放心食用安全綠色的蔬菜。

一、有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)材料與方法

1.檢測(cè)方法的基本原理

馬血清中含有乙酰膽堿酯酶，該酶能與氯化乙酰膽堿產(chǎn)生作用，生產(chǎn)醋酸，反應(yīng)的化學(xué)方程式為：

CH2COOCH2CH2N（CH3）5+H2O+ACHe→ CH3COOH+ HOCH2CH2N（CH3）3

從上述化學(xué)反應(yīng)方程式可以看出，醋酸產(chǎn)生的量越多，就說(shuō)明反應(yīng)進(jìn)行得越徹底。然而有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥會(huì)抑制乙酰膽堿的酶活性，導(dǎo)致醋酸的生成量減少，使反應(yīng)前后的PH值發(fā)生變化。根據(jù)這一特征，就可以準(zhǔn)確推算出蔬菜中有機(jī)磷、氨基甲酸酯農(nóng)藥的殘留狀況。為了更好地觀察反應(yīng)前后酸堿性的變化，常會(huì)加入PH指示劑來(lái)檢測(cè)溶液顏色的變化情況。

2.試驗(yàn)所用的材料和農(nóng)藥種類(lèi)

為了準(zhǔn)確驗(yàn)證蔥、蒜、蘿卜、韭菜、香菜、蘑菇、番茄等蔬菜中有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的殘留量，就采取乙酰膽堿酶活性檢測(cè)法。乙酰膽堿酯酶在馬血清中大量存在，馬血清可以從當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖場(chǎng)中抽取。試驗(yàn)中需要大量的農(nóng)藥，包括80%的敵敵畏，50%的甲基對(duì)硫磷、50%辛硫磷乳油、40%樂(lè)果、50%甲胺磷乳油、90%可溶性呋喃丹粉劑等農(nóng)藥。

3.有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的檢測(cè)方法

具體的檢測(cè)方法如下：首先，將葉菜剪成寬度為1cm左右的樣品，將塊根菜切成1cm的表皮樣品，取2g樣品放入三角瓶中，加入10ml緩沖液，振蕩1分鐘后過(guò)濾，過(guò)濾得到的溶液就是待測(cè)試液。

取1cm的比色皿，加酶20ul，再加入2.5ml的緩沖液，充分搖勻。靜置10分鐘之后，加入顯色劑，觀察溶液PH值的顏色變化情況。

PH酸堿性顏色變化情況如下表所示：

由上表可以清楚地看到，當(dāng)反應(yīng)后溶液指示劑的顏色變?yōu)樗{(lán)色、深藍(lán)、淺藍(lán)的時(shí)候，就有50%的乙酰膽堿酯酶活性受到了抑制，此時(shí)蔬菜中含有大量有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥；而當(dāng)指示劑的顏色變?yōu)闇\綠、黃綠、深綠時(shí)，就有15%到50%的酶活性受到抑制，此時(shí)蔬菜中含有少量的有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥；而當(dāng)指示劑的顏色變?yōu)闇\黃、淺棕、黃色時(shí)，就有不到15%的酶活性受到抑制，這時(shí)蔬菜中有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的含量已降到安全標(biāo)準(zhǔn)之下。

二、利用酶片快速檢測(cè)農(nóng)藥殘留狀況

1.酶片法與氣相色譜法的檢測(cè)結(jié)果對(duì)照

為了驗(yàn)證酶片檢測(cè)的準(zhǔn)確性，將對(duì)同一份待測(cè)樣品采取兩種檢測(cè)方式。除了乙酰膽堿酶活性檢測(cè)法，還將采用我國(guó)常用的氣相色譜檢測(cè)法。通過(guò)檢測(cè)蔬菜中甲胺磷、敵敵畏、甲基1059、樂(lè)果、辛硫磷等農(nóng)藥的殘留狀況，來(lái)綜合分析酶活性檢測(cè)法與氣相色譜檢測(cè)法的準(zhǔn)確性。檢測(cè)數(shù)據(jù)如下表所示：

從上表可以看出，利用氣相色譜法檢測(cè)甲基1059、敵敵畏、甲胺磷、樂(lè)果、辛硫磷等農(nóng)藥的殘留物，檢測(cè)結(jié)果均超出《食品蔬菜農(nóng)藥含量限量標(biāo)準(zhǔn)》，而利用酶片法檢測(cè)蔬菜中農(nóng)藥含量均在中輕度污染、高度污染范圍內(nèi)，說(shuō)明酶片法的檢測(cè)結(jié)果比較好，精確度比較高。

2.酶片法檢測(cè)的精確度分析

酶片法將以黃瓜、白菜為研究樣品，驗(yàn)證其殘存的農(nóng)藥含量。對(duì)每個(gè)樣品檢測(cè)8次，最終測(cè)得黃瓜的PH差值在1.0到1.2之間，平均PH值為1.175，它的標(biāo)準(zhǔn)差為0.07，變異系數(shù)為6.01；而白菜的PH差值在0.6到0.8之間，平均值為0.075，變異系數(shù)為12.34。由這組數(shù)據(jù)可以看出，白菜比黃瓜的變異系數(shù)更大，這可能是因?yàn)榘撞巳~片較大，導(dǎo)致農(nóng)藥殘存量增大。

在有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥中加入溴水，能夠大大提高農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制作用，使檢測(cè)精確度更加靈敏。比如在敵敵畏、辛硫磷、甲基1059、樂(lè)果、萬(wàn)靈等農(nóng)藥中滴入溴水，就會(huì)使檢測(cè)最低限度降低，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如下圖所示：

由上表可以看出，對(duì)辛硫磷、樂(lè)果、甲基1059進(jìn)行溴化處理之后，酶片檢測(cè)的濃度可以降低到0.50mg/kg、0.01mg/kg、0.13mg/kg，使乙酰膽堿檢測(cè)的精度大大提高。

三、結(jié)語(yǔ)

為了檢測(cè)出蔬菜中有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的含量，我國(guó)通常采用火焰光度法，但這種方法檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、費(fèi)用高，很難迅速地鑒定出蔬菜中農(nóng)藥的殘留量。馬血清中的乙酰膽堿能與氯化乙酰膽堿作用，生產(chǎn)醋酸。而有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥會(huì)抑制乙酰膽堿的酶活性，導(dǎo)致醋酸的生成量減少。利用反應(yīng)前后PH值的變化，來(lái)驗(yàn)證蔬菜中有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的殘留量，這種檢測(cè)方法精度高、方便快捷，使消費(fèi)者能放心食用綠色安全的蔬菜。

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