黃琳蕓 黃瑞松* 屈信成
(1.廣西國際壯醫(yī)醫(yī)院,廣西 南寧 530001; 2.廣西中醫(yī)藥研究院,廣西 南寧 530022)
腫柄菊Tithonia diversifolia A. Gray[1],別名假向日葵、金光菊、臭菊,為熱帶、亞熱帶特有植物,目前在廣東、廣西、云南和福建等地有大量分布,壯醫(yī)認(rèn)為其具有清熱毒,祛濕毒的功效,可用于治療屙瀉(泄瀉),唄膿(癰腫)等[2]。目前的研究結(jié)果表明,腫柄菊具有廣泛的藥理活性,如抗炎、抗病毒、抗瘧、抗腫瘤、降血糖等,腫柄菊主要化學(xué)成分為以下幾類:倍半萜類、黃酮、色原烯、二萜、蒽醌、神經(jīng)酰胺等[3]。原植物在《中國植物志》已有記載,但腫柄菊生藥學(xué)方面的研究報道不多,本文對腫柄菊葉進(jìn)行了比較系統(tǒng)的生藥鑒別研究,以期為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂及應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
腫柄菊藥材采集于廣西不同地區(qū)(來源見表1),原植物經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)韋松基教授、廣西中醫(yī)藥研究院賴茂祥研究員鑒定為Tithonia diversifolia A. Gray。
奧林巴斯 BH-2生物顯微鏡(日本);LY-HPCCD萬能視頻成像裝置(四川勵揚);奧林巴斯DP20照相系統(tǒng)(日本);KQ300DB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);XS205 電子天平(瑞士梅特勒公司);硅膠G薄層預(yù)制板(青島海洋化工廠);所用試劑均為分析純。
2.1性狀鑒別葉多皺縮或破碎,完整者展開后呈卵形或卵狀三角形或近圓形,長7~20cm,3~5深裂,裂片卵形或披針形,有的不分裂,邊緣有細(xì)鋸齒,葉面棕綠色,背面灰綠色,被短柔毛,基出三脈,有長葉柄。氣清香,味微苦。
2.2顯微鑒別葉表面觀:上、下表皮細(xì)胞垂周壁波狀彎曲。氣孔在下表皮較多,上表皮較少,為不定式,副衛(wèi)細(xì)胞4~8個。上、下表皮均有腺毛和非腺毛,下表皮較多,腺毛頂面觀類圓“日”字形,直徑15~53μm;非腺毛細(xì)胞2~7個,略彎曲,長86~390μm,直徑15~42μm。見圖1~圖3。
表1 腫柄菊藥材來源情況
粉末黃綠色。非腺毛多見,多碎斷.完整者2~7個細(xì)胞,長90~380μm,直徑15~45μm,基細(xì)胞膨大。腺毛側(cè)面觀倒圓錐形,長42~55μm,直徑18~42μm,頂面觀類圓“日”字形,頂部細(xì)胞有的膨大,頭部由4~5對細(xì)胞組成,柄部1對細(xì)胞。導(dǎo)管為螺紋和孔紋導(dǎo)管,直徑21~45μm。纖維多成束,細(xì)胞壁平直,直徑 18~25μm。葉組織碎片可見表皮細(xì)胞壁波狀彎曲,氣孔為不定式,副衛(wèi)細(xì)胞4~8個。見圖4。
2.3薄層色譜鑒別取樣品粉末2g,加80%乙醇30mL,超聲處理30min,濾過,濾液蒸干,殘渣加熱水10mL,置水浴上攪拌使溶解,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇1mL使溶解,作為供試品溶液。另取對照藥材2g,同法制成對照藥材溶液。按照2015年版《中國藥典》四部通則0502薄層色譜法進(jìn)行試驗,分別吸取上述供試品溶液和對照藥材溶液各2~4ul,點于同一硅膠G薄層板上,以二甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水(2.5∶8∶2.5∶3)的上層溶液為展開劑,預(yù)飽和15min,展開8cm,取出,晾干,噴以5%三氯化鐵乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,置于日光下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點。見圖5。
本實驗前期參考相關(guān)文獻(xiàn)[4~5],對腫柄菊葉供試品制備方法中提取溶劑(80%甲醇、甲醇、80%乙醇、乙醇)、提取方法(加熱回流、超聲)進(jìn)行了對比實驗,考慮到經(jīng)濟(jì)性和毒性,確定80%乙醇為提取溶劑,采用超聲提取。同時,對不同薄層板、溫度、濕度、點樣方式進(jìn)行了考察,保證建立的薄層鑒別方法具有良好的耐用性。腫柄菊葉的薄層色譜,供試品與對照藥材在相同位置上有相同顏色的斑點,特征明顯,專屬性強,可作為鑒別腫柄菊的參考依據(jù)。