王東

[摘要]：雜交構(gòu)樹(shù)是一種具有突出抗逆性、豐產(chǎn)速生的樹(shù)種，是中國(guó)科學(xué)院植物研究所以現(xiàn)代的生物技術(shù)和傳統(tǒng)的雜交育種方法為依托，利用光葉楮進(jìn)行培育而來(lái)的。無(wú)性扦插繁殖是當(dāng)前光葉楮苗木主要且常規(guī)的培養(yǎng)方法。但是受制于材料來(lái)源不足、費(fèi)時(shí)費(fèi)工、較低的扦插成活率等原因，難以滿(mǎn)足當(dāng)前大面積栽培和推廣的需要。構(gòu)樹(shù)組織培養(yǎng)快繁技術(shù)在近幾年發(fā)展非常快。本文將通過(guò)分析雜交構(gòu)樹(shù)莖段的離體培養(yǎng)、繁殖，從雜交構(gòu)樹(shù)莖段的萌發(fā)、分化、不定芽生長(zhǎng)分化和生根最佳培養(yǎng)基等方面進(jìn)行探討，希望這些有助于雜交構(gòu)樹(shù)的快速無(wú)性繁殖，從而使得種源生產(chǎn)得到擴(kuò)大，不斷保存優(yōu)良的品種，形成一種行之有效的方法，為以后雜交構(gòu)樹(shù)的遺傳轉(zhuǎn)化和改良轉(zhuǎn)基因品種提供一定的參考價(jià)值。

[關(guān)鍵詞]： 構(gòu)樹(shù)； 樹(shù)種；繁殖

1、雜交構(gòu)樹(shù)組培快繁技術(shù)的發(fā)展背景

雜交構(gòu)樹(shù)是?？茦?gòu)樹(shù)，屬于落葉喬木。光葉楮，又名日本構(gòu)樹(shù)，具有喜光、速生、適生性強(qiáng)的特點(diǎn)，有不少的保健、生態(tài)功能，同時(shí)也是一些錢(qián)幣紙等特殊用紙的原材料，是園林綠化的優(yōu)良樹(shù)種。而且在發(fā)展動(dòng)物和魚(yú)的優(yōu)質(zhì)飼料原料方面具有較為廣闊的前景，這是因?yàn)楣馊~楮的葉子中各種鈣、磷、鋅等微量元素和氨基酸含量較高，且樹(shù)葉中粗蛋白的含量也不低。最為世界上最大的紙產(chǎn)品消費(fèi)市場(chǎng)，我國(guó)對(duì)造紙?jiān)系男枨笫蔷薮蟮模貏e是木漿等纖維原料更是需要大量的進(jìn)口。為了緩解進(jìn)口需求的壓力，我國(guó)近年來(lái)專(zhuān)門(mén)從日本引進(jìn)光葉楮樹(shù)種，以作制漿造紙專(zhuān)用。但是，在移植栽培過(guò)程中，引進(jìn)的光葉楮畢竟數(shù)量資源有限，而且在種植了二至三代以后就會(huì)發(fā)生物種退化，材質(zhì)效果大不如前。無(wú)性扦插繁殖是當(dāng)前光葉楮苗木主要且常規(guī)的培養(yǎng)方法。但是受制于材料來(lái)源不足、費(fèi)時(shí)費(fèi)工、較低的扦插成活率等原因，難以滿(mǎn)足當(dāng)前大面積栽培和推廣的需要。

多年來(lái)，針對(duì)1997年從日本引進(jìn)的專(zhuān)用制漿造紙的樹(shù)種，即四倍體光葉楮的研究一直未斷，使得構(gòu)樹(shù)組織培養(yǎng)快繁技術(shù)得到快速的發(fā)展，取得了不少的技術(shù)突破。李際紅等人在研究過(guò)程中以光葉楮母株莖段作為外植體，分析消毒處理方法不同，對(duì)其離體培養(yǎng)影響不同時(shí)，發(fā)現(xiàn)將吐溫加入常規(guī)消毒劑中，能夠獲得良好的滅菌效果。孫天洲等探索了光葉楮快繁和生根的最佳培養(yǎng)條件，并利用側(cè)芽為外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)，繁殖系數(shù)達(dá)到6-7倍，郁蒙蒙等在初步建立以葉片和葉柄為高效再生體系的基礎(chǔ)上，研究了遏制光葉楮外植體褐化的問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)了光葉楮無(wú)性快繁、擴(kuò)大種源生產(chǎn)的途徑可能。但是，在各種科研報(bào)道中，涉及改良品種雜交構(gòu)樹(shù)的組培快繁的內(nèi)容很少，關(guān)注度不高。

2、雜交構(gòu)樹(shù)組培快繁技術(shù)概況

2.1獲取相關(guān)外植體及必要滅菌

區(qū)取雜交構(gòu)樹(shù)作為供試材料，將2-3厘米且?guī)а康那o段為外植體，將棉球在蘸取濃度75%的酒精后，輕輕擦拭兩遍莖段，之后在濃度75%的酒精中浸泡30秒，再取出用無(wú)菌水沖刷一遍，在接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基之前，還要在0.05%的升汞中處理長(zhǎng)達(dá)7分鐘，并用無(wú)菌水反復(fù)沖洗6次，每次的沖洗時(shí)間要1分鐘。

2.2 誘導(dǎo)雜交構(gòu)樹(shù)側(cè)芽

使用基本培養(yǎng)基MS，試驗(yàn)時(shí)要附加不同濃度的6-BA和NAA，確保PH值保持在5.8-5.9之間。采用16個(gè)處理，每個(gè)處理重復(fù)3次，6株為一個(gè)重復(fù)的正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，30天之后計(jì)算分析芽的分化率即分化出不定芽的外植體數(shù)與外植體總數(shù)的比和分化系數(shù)即外植體分化不定芽的總數(shù)與外植體總數(shù)的比，分析芽的生長(zhǎng)狀況。

2.3 繼代繁殖和擴(kuò)大繁殖

使用基本培養(yǎng)基MS，試驗(yàn)時(shí)要附加不同濃度的6-BA和NAA，確保PH值保持在5.8-5.9之間。采用16個(gè)處理，每個(gè)處理重復(fù)3次，6株為一個(gè)重復(fù)的正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，30天之后對(duì)一個(gè)外植體增殖芽數(shù)即芽的增殖系數(shù)和嫩梢的生長(zhǎng)狀況進(jìn)行調(diào)查分析。

2.4 生根壯苗

使用基本培養(yǎng)基1/2MS，保持5.8-5.9的PH值區(qū)間?？梢圆捎靡话闵?、浸蘸生根法、二步生根法這三種生根法。所采取的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)仍為16個(gè)處理，每個(gè)處理重復(fù)3次，6株為一個(gè)重復(fù)的正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

2.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析

利用專(zhuān)門(mén)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件SPSS，采用F檢驗(yàn)對(duì)獲取的數(shù)據(jù)加以分析和處理。

2.6 分析影響雜交構(gòu)樹(shù)離體快繁的因素及培養(yǎng)過(guò)程中常遇到的問(wèn)題

影響雜交構(gòu)樹(shù)離體快繁的因素有很多，例如組培苗被污染、材料變異、褐化、黃化、玻璃化、死亡，或是增殖率太低或太高，組培苗異常生根或是不生根，組培苗徒長(zhǎng)或瘦弱，因出瓶導(dǎo)致瓶苗死亡率較高等。在具體的生產(chǎn)實(shí)踐中，應(yīng)用雜交構(gòu)樹(shù)組培快繁技術(shù)這一理論時(shí)會(huì)遇到不少的問(wèn)題，如：怎樣選取各個(gè)環(huán)節(jié)的最佳條件；判斷組織培養(yǎng)中植株是否正常生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)是什么；在誘導(dǎo)培養(yǎng)物朝我們預(yù)期的方向發(fā)展時(shí)，怎樣克服各種不利因素等。這些因素都會(huì)時(shí)刻的影響組培技術(shù)的應(yīng)用效果。

3、雜交構(gòu)樹(shù)組培快繁技術(shù)的未來(lái)發(fā)展前景

我國(guó)各個(gè)科研機(jī)構(gòu)當(dāng)前對(duì)構(gòu)樹(shù)的研究方向，重點(diǎn)集中于藥理成分和造紙?jiān)?，?gòu)樹(shù)巨大的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益還遠(yuǎn)沒(méi)有得到應(yīng)有的開(kāi)發(fā)和利用。加大構(gòu)樹(shù)的科研開(kāi)發(fā)力度是未來(lái)的重要課題工作，可以從構(gòu)樹(shù)的良種引進(jìn)和選育及應(yīng)用研究?jī)蓚€(gè)方面出發(fā)。構(gòu)樹(shù)的良種引進(jìn)和選育，重點(diǎn)研究構(gòu)樹(shù)的組培快繁技術(shù)，以組培再生和遺傳轉(zhuǎn)化為出發(fā)點(diǎn)，利用各種現(xiàn)代的生物技術(shù)工具，逐步選育出優(yōu)良的品種，以適合在全國(guó)范圍內(nèi)進(jìn)行種植推廣。同時(shí)，對(duì)構(gòu)樹(shù)在生態(tài)應(yīng)用和抗逆性方面也要加強(qiáng)研究力度，在時(shí)間和空間上實(shí)現(xiàn)構(gòu)樹(shù)與其它植物的合理配置，為實(shí)現(xiàn)工礦區(qū)綠化和治理石漠化發(fā)揮重要的生態(tài)作用。

總結(jié)：在未來(lái)實(shí)現(xiàn)構(gòu)樹(shù)的大面積種植之后，可以形成造紙、飼料、營(yíng)林的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，甚至對(duì)構(gòu)樹(shù)進(jìn)行全樹(shù)利用，開(kāi)發(fā)藥品、食品、保健品、飲料、生物殺菌劑等。而且，將構(gòu)樹(shù)的優(yōu)良品種在全國(guó)進(jìn)行種植推廣，也符合當(dāng)前我國(guó)加快調(diào)整農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，促進(jìn)農(nóng)民增收的社會(huì)發(fā)展需求，經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會(huì)效益都是巨大的。

【參考文獻(xiàn)】：

[1]張偉.雜交構(gòu)樹(shù)組培快繁技術(shù)概況[J].農(nóng)業(yè)科技通訊，2016，6.

[2]徐凱南，楊笑如.雜交構(gòu)樹(shù)開(kāi)放式組培快繁技術(shù)研究[J].科技創(chuàng)新與應(yīng)用，2017，6.

[3]萬(wàn)文，劉忠華，魏會(huì)琴.雜交構(gòu)樹(shù)莖段組培快繁體系的建立[J].福建林業(yè)科技，2010，37.

[4]趙青華，陳永波，滕建勛等.開(kāi)放式組織培養(yǎng)下魔芋快繁技術(shù)研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2011，13.

[5]劉蕓，郭龍妹，任淼輝，田雙梅.雜交構(gòu)樹(shù)組培快繁體系的建立[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，44.