張 迪,張星辰,姜孟琪,劉兆輝,劉新元,鄭世英
(德州學院生態(tài)與園林建筑學院,山東德州 253000)
紫薯(Ipomoea batatas(L.)Poir.)旋花科(Convolvulaceae)番薯屬,又叫黑薯,薯肉呈紫色至深紫色。其富含蛋白質(zhì)、淀粉、果膠、纖維素、氨基酸、維生素及多種礦物質(zhì),同時還富含硒元素和花青素[1]。紫薯營養(yǎng)豐富具特殊保健功能,其中的蛋白質(zhì)氨基酸都是極易被人體消化和吸收的。其中富含的維生素A可以改善視力和皮膚的粘膜上皮細胞,維生素C可使膠元蛋白正常合成,防治壞血病的發(fā)生,花青素是天然強效自由基清除劑[2]。在實際生產(chǎn)中,影響紫薯品質(zhì)和產(chǎn)量的主要因素是病毒[3]。通過組培方法繁育脫毒紫薯苗是目前防治紫薯病毒的有效途徑。本試驗利用不同類別的培養(yǎng)基和植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對紫薯品種泰中11號(由泰安農(nóng)業(yè)科學研究院繁育)脫毒試管苗組培快繁進行研究,為泰中11號脫毒苗的生產(chǎn)提供理論依據(jù)。
供試紫薯為泰中11號,置于28±2℃溫室中進行培養(yǎng)。
1.2.1 試驗材料的處理。取紫薯泰中11號植株,除掉大部分葉片、葉柄,用0.1%的洗衣粉液洗滌后,再用蒸餾水清洗干凈,放置于超凈工作臺上進行滅菌處理。具體操作步驟是先在75%酒精中浸泡30 s,再用0.1%的HgCl2溶液消毒20 min,用無菌水進行清洗。在超凈工作臺上將泰中11號脫毒苗修剪成段,截成1~2 cm帶1-2個腋芽的小段,按形態(tài)學方向在設(shè)計好的培養(yǎng)基上進行接種。每瓶接種6個外植體,觀察其生長狀況。
1.2.2 培養(yǎng)基設(shè)計。根據(jù)配方培養(yǎng)基設(shè)計為3種:(1)基本培養(yǎng)基分別為:MS、N6和B5。(2)分別添加NAA 0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg/L 的 MS 培養(yǎng)基。(3)分別添加 6-BA 0.1、0.5、1.0、2.0、3.0mg/L 的 MS培養(yǎng)基。
所有培養(yǎng)基,pH值5.8~6.0,蔗糖含量3.0%,瓊脂0.7%。每處理接種10瓶,每瓶接種2株。接種后,置于28~30℃ ,光強 2000~2500Lx,光照 11h/d 條件下培養(yǎng)。每隔3d統(tǒng)計試管苗的生根和出芽,30d后測量株高、單株葉片數(shù),單株根長和根數(shù)。
由表1可以看出,不同培養(yǎng)基對紫薯脫毒苗的生根率、平均根長、單株平均根數(shù)、單株平均葉片數(shù)、株高等均有明顯影響。其中MS培養(yǎng)基有利于提高紫薯脫毒苗的成苗率。
表1 基本培養(yǎng)基對泰中11號脫毒苗生長的影響(30d)
2.2.1 NAA對脫毒苗生長的影響。從表2可以看出,隨著NAA處理濃度的不斷增加,在含有NAA的MS培養(yǎng)基中,試管苗的出芽時間、生根時間、生根數(shù)、根長、葉片數(shù)和株高均有不同的變化。當NAA濃度為0.50mg/L時,接種后5.8d產(chǎn)生根原基,8.5d開始出芽,30d株高可達5.2cm,葉片數(shù)達4片,新生根數(shù)9條,平均根長4.0cm,生根、出芽比平均7.91d和10.8d分別快2.11d和2.3d.。當NAA濃度高于1.0mg/L時,根和芽的誘導時間均延長,并且根數(shù)、根長及葉片數(shù)也降低。所以,當NAA濃度為0.5~1.0 mg/L時,能有效促進泰中11號紫薯脫毒試管苗的生長發(fā)育。
表2 不同濃度的NAA對泰中11號脫毒苗生長的影響(30d)
2.2.2 6-BA對脫毒苗生長的影響。由表3可以看出,MS培養(yǎng)基中加入6-BA的濃度對試管苗生根、生芽、根數(shù)、根長、葉片數(shù)、株高等均有影響。當6-BA濃度為1.0mg/L時,試管苗出芽時間為7.2d,比平均出芽時間縮短2.02d;生根時間4.5d,比平均生根時間縮短1.13d;單株根數(shù)3.8條,單株葉數(shù)4.3個。當6-BA濃度為0.1mg/L時,根長為5.5cm,當6-BA濃度為0.5 mg/L時,株高生長最快為5.3cm。當6-BA濃度為2.0mg/L或更高時,抑制了根的形成,所有處理均未產(chǎn)生幼根,莖葉影響較小。說明當6-BA濃度為0.1~1.0 mg/L時,更有利于泰中11號紫薯脫毒試管苗的快速生長。
表3 不同濃度的6-BA對泰中11號脫毒苗生長的影響(30d)
N6、B5、MS 培養(yǎng)基的生根株數(shù)分別是 10、9、18株,生根率分別為50%、45%、90%,根數(shù)分別為4.5、5.1和7.2條,根長分別為2.1、3.2和4.8cm,成苗數(shù)分別為10、8 和 19 個,片數(shù)分別為 4.5、4.1、和 7.8 片,株高分別為3.9、4.2和6.8cm,成苗率分別為 50%、40%和95%。MS培養(yǎng)基最有利于泰中11號紫薯試管苗的生長。
在含有NAA的MS培養(yǎng)基中,當NAA濃度為0.1和0.25mg/L時,出芽時間分別為9.8和9.7d;生根時間分別為7.8和7.6d;根數(shù)分別為5.4和3.6條;根長分別為4.7和4.5cm;葉片數(shù)分別為3.8片和2.片;株高分別為 6.4和 5.7cm。當 NAA濃度為 1.5、2.0和2.5mg/L時,出芽時間分別為11.5、12.3和14.6 d;生根時間分別為7.7、9.2和11.8d;根數(shù)分別為5.5、4.3和5.8條;根長分別為4.7和4.5cm;葉片數(shù)分別為3.8和2.7片;株高分別為6.4和5.7cm。所以,當NAA濃度為0.5~1.0mg/L時,能有效促進泰中11號紫薯脫毒試管苗的生長發(fā)育。
在含有6-BA的MS培養(yǎng)基中,當6-BA濃度為0.1、0.5、1.0mg/L 時,出芽時間分別為 9.8、8.2 和 7.2 d;生根時間分別為6.8、5.6和4.5 d;根數(shù)分別為2.8、3.0和3.8條;根長分別為5.5、4.8和4.5cm;葉片分別為3.2、3.5和4.0片;株高分別為5.0、5.3和5.2cm。
當6-BA濃度大于1.0mg/L時,不能生根。所以,6-BA濃度為0.1~1.0mg/L時,能促進泰中11號紫薯脫毒試管苗的生長發(fā)育。