朱婷婷 李晨晨 陸 游 金 敏 王學習 羅嘉翔 周歧存

(寧波大學海洋學院魚類營養(yǎng)研究室，寧波315211)

投喂策略由投喂頻率、攝食水平(或投飼率)和投飼方式等環(huán)節(jié)組成，是魚類集約化養(yǎng)殖管理的重要內(nèi)容之一[1]。投喂頻率為影響水產(chǎn)養(yǎng)殖的重要因素之一，不合理的投喂頻率會導致魚類生長速度緩慢，從而使個體間的規(guī)格分化差異變大[2]。投喂頻率過高往往會降低飼料效率，進而導致養(yǎng)殖成本升高并且造成養(yǎng)殖環(huán)境的惡化；而投喂頻率過低則會導致魚類生長性能的降低[3]。因此，適宜的投喂頻率對魚類的養(yǎng)殖有重要的意義。

虎斑烏賊(Sepiapharaonis)，隸屬于軟體動物門(Mollusca)，頭足綱(Cephalopoda)，十腕目(Decapoda)，烏賊科(Sepiidae)，烏賊屬(Sepia)，廣泛分布于我國南海海域[4]。虎斑烏賊個體較大，口味鮮美，具有抗病力強、生長快和適合高密度養(yǎng)殖等優(yōu)點，是一種具有養(yǎng)殖前景的經(jīng)濟頭足類[5]。目前國內(nèi)外學者對虎斑烏賊的研究主要集中在烏賊膜特性[6]、生態(tài)因子的耐受程度[7]以及烏賊不同組織的體成分、氨基酸、脂肪酸等營養(yǎng)成分[8]和胚胎發(fā)育[9]等，但有關(guān)投喂頻率對虎斑烏賊影響的研究還尚未見報道。本試驗旨在通過研究不同投喂頻率對虎斑烏賊生長性能、體成分、消化酶活性、組織氨基酸和脂肪酸含量的影響，確定適宜投喂頻率，為虎斑烏賊幼體階段的合理投喂和養(yǎng)殖、品質(zhì)調(diào)控和能量物質(zhì)轉(zhuǎn)換利用等提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設計

試驗用虎斑烏賊購自象山來發(fā)養(yǎng)殖場，并在寧波市海洋與漁業(yè)科技創(chuàng)新基地進行養(yǎng)殖試驗。試驗前，將虎斑烏賊幼體放在300 L的藍桶中馴養(yǎng)2周，養(yǎng)殖桶置于室內(nèi)自然光照下，室內(nèi)為透明塑料頂棚，水體每天充氣，馴養(yǎng)期間每日用冰鮮蝦(體成分和氨基酸組成、脂肪酸組成分別見表1和表2)投喂2次。馴養(yǎng)結(jié)束后，饑餓24 h，挑選大小均一、體表無外傷的初始體重為(13.08±0.01) g的虎斑烏賊幼體180只，隨機分成3組(投喂頻率分別為每天1、2和4次，分別命名為F1、F2和F4投喂組)，每組3個重復，每個重復20只。試驗期4周。

表1 冰鮮蝦體成分(濕重基礎(chǔ))和氨基酸組成(干物質(zhì)基礎(chǔ))

續(xù)表1項目 Items含量Content賴氨酸 Lys0.44 組氨酸 His0.14 精氨酸 Arg0.35 非必需氨基酸 NEAA天門冬氨酸 Asp0.57 絲氨酸 Ser0.23 谷氨酸 Glu0.87 甘氨酸 Gly0.28 丙氨酸 Ala0.30 胱氨酸 Cys0.04 酪氨酸 Tyr0.18 脯氨酸 Pro0.27 總氨基酸 TAA5.29 必需氨基酸 EAA2.56 非必需氨基酸 NEAA2.73 必需氨基酸/總氨基酸 EAA/TAA0.05

表2 冰鮮蝦脂肪酸組成(占總脂肪酸的百分比)

續(xù)表2項目 Items含量ContentC24∶00.05C22∶6n-3 (DHA)9.76飽和脂肪酸 SFA37.74單不飽和脂肪酸 MUFA31.91多不飽和脂肪酸 PUFA30.32n-3高不飽和脂肪酸 n-3HUFA27.29n-6高不飽和脂肪酸 n-6HUFA3.03n-3/n-69.01DHA/EPA0.63

EPA：二十碳五稀酸 eicosapentaenoic acid；DHA：二十二碳六稀酸 docosahexaenoic acid。表7、表8同。The same as
Table 7 and
Table 8.

1.2 飼養(yǎng)管理

3組虎斑烏賊隨機分在9個桶中，每個桶20只。在試驗中不同的投喂頻率和時間分別為：F1投喂組，每天1次(09:00)；F2投喂組，每天2次(09:00、18:00)；F4投喂組，每天4次(09:00、12:00、15:00和18:00)。每次投喂都為過量投喂，投喂前將冰凍蝦解凍，吸除表面水分并稱重，投喂后1 h吸出殘餌，吸去表面水分并稱重，攝食量為投喂重量減去殘餌重量，每天08:00以微流水方式換水，換水量為30%。養(yǎng)殖周期為4周，在此期間，水溫為29.0～34.9 ℃，溶解氧濃度為6.0 mg/L以上，鹽度為23.0‰～27.3‰。

1.3 樣品采集

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，饑餓24 h，將烏賊用0.15 mol/L氯化鎂(MgCl2)麻醉后[10]，稱重計數(shù)，計算增重率(weight gain rate，WGR)、成活率(survival rate，SR)和特定增長率(specific growth rate，SGR)等指標。在每個養(yǎng)殖桶中隨機取3只烏賊，分別稱重，測量其胴長，解剖取肝臟稱重，用來計算肥滿度(condition factor，CF)和肝體比(hepatosomatic index，HSI)。取10只烏賊，在冰袋上解剖，取其前腸、肝臟于2.0 mL離心管內(nèi)，用于消化酶活性及氨基酸、脂肪酸含量的測定，剝離腹部肌肉于4 mL離心管內(nèi)，用于肌肉組成成分、氨基酸及脂肪酸含量的測定，樣品于-80 ℃冰箱中保存。

1.4 分析方法

肌肉和肝臟常規(guī)營養(yǎng)成分含量測定參照AOAC(1995)[11]方法，其中水分含量測定用105 ℃恒重法；粗蛋白質(zhì)含量測定采用蛋白測定儀(Leco FB-528)，原理是熱導吸收法；粗脂肪含量的測定采用脂肪測定儀(SX360)，原理是索氏抽提法；粗灰分含量的測定采用馬弗爐550 ℃焚燒失重法。

脂肪酸含量分析：將肝臟和肌肉樣品冷凍干燥48 h，在鹽酸-甲醇溶液和氫氧化鉀-甲醇溶液中抽提脂肪進行前處理后，送到中國科學院寧波材料技術(shù)與工程研究所測試中心，使用氣相-質(zhì)譜儀(GCMS-QP2010 Plus，SHIMADZU公司，日本)進行脂肪酸的甲酯化，用面積歸一法求得各類脂肪酸的相對百分含量。

氨基酸含量分析：將肝臟和肌肉樣品用6 mol/L鹽酸沙浴24 h后，用50 mL容量瓶定容并吸取1 mL溶液進行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，將旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后的樣品加入0.02 mol/L的鹽酸后，使用氨基酸分析儀(L-8900)進行分析。

腸道消化酶活性和肝臟抗氧化酶活性分析：腸道胰蛋白酶(trypsin)、α淀粉酶(α-amylase，AMS)、脂肪酶(lipase，LPS)、肌酸激酶(creatine kinase，CK)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(γ-glutamyl transferase，γ-GT)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，AKP)、Na+，K+-ATP酶(Na+，K+-ATPase)活性，肝臟的丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)活性，均采用南京建成工程生物研究所試劑盒進行測定。

1.5 計算公式

成活率(%)=100×Nt/N0； 增重率(%)=100×(Wt-W0)/W0； 特定生長率(%/d)=100×(lnWt-lnW0)/t； 攝食量(feed intake，F(xiàn)I，g)=投喂量-殘餌量； 飼料效率(feed efficiency，F(xiàn)E，%)= 100×(Wf+Wd-Wi)/FI； 肥滿度(g/cm3)=100×W/L3； 肝體比(%)=100×Wh/W。

式中：Nt為試驗結(jié)束時烏賊數(shù)量(只)；N0為試驗初始烏賊數(shù)量(只)；Wt為試驗烏賊末均重(g)；W0為試驗烏賊初均重(g)；t為試驗天數(shù)(d)；Wf為終末烏賊總重(g)；Wd為死亡烏賊總重(g)；Wi為初始烏賊總重(g)；FI為攝食量(g)；W為烏賊體重(g)；L為烏賊胴長(cm)；Wh為肝臟重(g)。

1.6 數(shù)據(jù)處理及分析

數(shù)據(jù)先用Excel 2007處理，然后用SPSS 16.0軟件進行統(tǒng)計學分析。先對數(shù)據(jù)作單因素方差分析(one-way ANOVA)，差異顯著時，用Turkey程序進行多重比較，P<0.05表示差異顯著，結(jié)果用平均值±標準誤表示。

2 結(jié) 果

2.1 投喂頻率對虎斑烏賊生長性能及形態(tài)學指標的影響

投喂頻率對虎斑烏賊生長性能及形態(tài)學指標的影響見表3。試驗結(jié)果表明，各組虎斑烏賊的存活率和肥滿度沒有顯著性差異(P>0.05)。攝食量隨著投喂頻率的升高而顯著上升(P<0.05)。F2投喂組的餌料效率顯著高于F1和F4投喂組(P<0.05)，F(xiàn)1和F4投喂組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。F2和F4投喂組的增重率、特定生長率和肝體比顯著高于F1投喂組(P<0.05)，F(xiàn)2和F4投喂組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。

2.2 投喂頻率對虎斑烏賊肝臟和肌肉組成的影響

投喂頻率對虎斑烏賊肝臟和肌肉組成的影響見表4。試驗結(jié)果表明，各組虎斑烏賊的肝臟粗蛋白質(zhì)含量沒有顯著性差異(P>0.05)；F4投喂組的肝臟水分含量顯著低于F1投喂組(P<0.05)；F4投喂組的肝臟粗脂肪含量顯著高于F1和F2投喂組(P<0.05)，F(xiàn)2投喂組顯著高于F1投喂組(P<0.05)。F2和F4投喂組的肌肉水分含量顯著低于F1投喂組(P<0.05)，肌肉粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量顯著高于F1投喂組(P<0.05)，但F2和F4投喂組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。

表3 投喂頻率對虎斑烏賊生長性能及形態(tài)學指標的影響

同行數(shù)據(jù)肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表4 投喂頻率對虎斑烏賊肝臟和肌肉組成的影響(濕重基礎(chǔ))

2.3 投喂頻率對虎斑烏賊組織氨基酸組成的影響

投喂頻率對虎斑烏賊肌肉氨基酸組成的影響見表5。試驗結(jié)果表明，F(xiàn)2投喂組的肌肉必需氨基酸中蘇氨酸(Thr)、亮氨酸(Leu)和賴氨酸(Lys)含量顯著高于F1投喂組(P<0.05)，F(xiàn)4投喂組與F1和F2投喂組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。F2投喂組的肌肉非必需氨基酸中天門冬氨酸(Asp)、絲氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)和丙氨酸(Ala)含量顯著高于F1投喂組(P<0.05)，F(xiàn)4投喂組與F1和F2投喂組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。

表5 投喂頻率對虎斑烏賊肌肉氨基酸組成的影響(干物質(zhì)基礎(chǔ))

投喂頻率對虎斑烏賊肝臟氨基酸組成的影響見表6。試驗結(jié)果表明，F(xiàn)1投喂組的肝臟中Thr、纈氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、異亮氨酸(Ile)、Leu、苯丙氨酸(Phe)、Lys、組氨酸(His)、精氨酸(Arg)、Asp、Ser、Glu、甘氨酸(Gly)、Ala、半胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)、總氨基酸、必需氨基酸和非必需氨基酸含量均顯著高于F2和F4投喂組(P<0.05)，其中F2和F4投喂組之間的肝臟中Val、Met、His、Arg、Asp、Glu、Gly、Ala、Cys、總氨基酸和非必需氨基酸含量沒有顯著性差異(P>0.05)。

2.4 投喂頻率對虎斑烏賊組織脂肪酸組成的影響

投喂頻率對虎斑烏賊肌肉脂肪酸組成的影響見表7。試驗結(jié)果表明，各組肌肉中二十碳五稀酸(EPA)、飽和脂肪酸(SFA)、單不飽和脂肪酸(MUFA)、多不飽和脂肪酸(PUFA)和n-3高不飽和脂肪酸(n-3HUFA)含量沒有顯著性差異(P>0.05)；F1投喂組肌肉中二十二碳六稀酸(DHA)、n-6高不飽和脂肪酸(n-6HUFA)含量和DHA/EPA顯著高于F2和F4投喂組(P<0.05)，F(xiàn)2和F4投喂組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。F2投喂組的n-3/n-6顯著高于F1投喂組(P<0.05)，但與F4投喂組沒有顯著性差異(P>0.05)。

表6 投喂頻率對虎斑烏賊肝臟氨基酸組成的影響(干物質(zhì)基礎(chǔ))

表7 投喂頻率對虎斑烏賊肌肉脂肪酸組成的影響(占總脂肪酸的百分比)

續(xù)表7項目Items組別 GroupsF1F2F4C20∶3n-30.32±0.030.28±0.010.25±0.02C20∶5n-3 (EPA)12.86±0.5613.61±0.2113.34±0.23C22∶1n-90.19±0.030.20±0.030.11±0.01C22∶5n-61.16±0.06b0.87±0.06a0.93±0.08abC22∶5n-32.27±0.082.01±0.132.23±0.04C22∶6n-3 (DHA) 32.06±0.88b29.90±0.51a29.43±0.25a飽和脂肪酸 SFA39.33±1.4642.15±0.6542.18±0.28單不飽和脂肪酸 MUFA8.62±0.648.58±0.478.89±0.15多不飽和脂肪酸 PUFA52.05±1.4349.27±0.9748.93±0.25n-3高不飽和脂肪酸 n-3HUFA47.62±1.4445.86±0.7745.32±0.07n-6高不飽和脂肪酸 n-6HUFA4.44±0.38b3.41±0.21a3.61±0.19an-3/n-610.73±0.35a13.54±0.64b12.61±0.63abDHA/EPA2.50±0.06b2.20±0.01a2.21±0.06a

投喂頻率對虎斑烏賊肝臟脂肪酸組成的影響見表8。試驗結(jié)果表明，F(xiàn)2和F4投喂組的肝臟中EPA、MUFA含量和n-3/n-6均顯著高于F1投喂組(P<0.05)，而F2和F4投喂組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。F1投喂組的肝臟中DHA、SFA含量和DHA/EPA顯著高于F2和F4投喂組(P<0.05)，而F2和F4投喂組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。

表8 投喂頻率對虎斑烏賊肝臟脂肪酸組成的影響(占總脂肪酸的百分比)

續(xù)表8項目Items組別 GroupsF1F2F4C22∶1n-91.24±0.07a1.55±0.04b1.61±0.05bC22∶5n-60.17±0.01b0.11±0.02a0.13±0.01abC22∶5n-30.76±0.01a0.99±0.07b1.02±0.03bC24∶00.15±0.010.14±0.070.10±0.02C22∶6n-3 (DHA)22.70±0.76b19.80±0.56a19.83±0.16a飽和脂肪酸 SFA33.78±0.21b29.65±0.53a29.15±0.04a單不飽和脂肪酸 MUFA25.72±0.15a29.24±0.36b29.08±0.26b多不飽和脂肪酸 PUFA40.50±0.2541.11±0.8341.78±0.28n-3高不飽和脂肪酸 n-3HUFA36.47±0.2937.41±0.8137.95±0.27n-6高不飽和脂肪酸 n-6HUFA4.03±0.05b3.70±0.04a3.83±0.06abn-3/n-69.06±0.17a10.12±0.20b9.91±0.15bDHA/EPA1.84±0.13b1.26±0.04a1.23±0.04a

2.5 投喂頻率對虎斑烏賊肝臟抗氧化性能和腸道消化酶活性的影響

投喂頻率對虎斑烏賊肝臟抗氧化性能和腸道消化酶活性的影響見表9。試驗結(jié)果表明，各組肝臟超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量沒有顯著性差異(P>0.05)，F(xiàn)1投喂組的肝臟谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著高于F2投喂組(P<0.05)，與F4投喂組沒有顯著性差異(P>0.05)。

各組前腸的胰蛋白酶、肌酸激酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶和Na+，K+-ATP酶活性沒有顯著性差異(P>0.05)。F1投喂組的前腸α-淀粉酶、脂肪酶和堿性磷酸酶活性均顯著高于F2投喂組(P<0.05)，F(xiàn)2和F4投喂組之間沒有顯著性差異(P>0.05)。

表9 投喂頻率對虎斑烏賊肝臟抗氧化性能和腸道消化酶活性的影響

3 討 論

3.1 投喂頻率對虎斑烏賊生長性能的影響

在適宜的投喂頻率范圍內(nèi)，大多數(shù)魚類的生長速率會隨著投喂頻率的增加而增加[12]，林艷等[13]研究發(fā)現(xiàn)，每天投喂5次時，團頭魴(Megalobramaambycephala)的特定生長率和增重率都顯著高于每天投喂1和2次的。王武等[14]在瓦氏黃顙魚(Pelteobagrusvachellirichardson)幼魚的研究中也發(fā)現(xiàn)，隨著投喂頻率的增加，黃顙魚的特定生長率顯著升高。許氏平鲉(Sebastesschlegeli)幼魚的特定生長率在每天投喂4次時最高，比其他組(每天投喂1、3次和每2天投喂3次)高2.25%～15.43%[1]。本試驗同樣發(fā)現(xiàn)，當每天投喂2次(F2投喂組)時，虎斑烏賊的增重率和特定生長率都顯著高于F1投喂組，這可能是因為在適宜的較高投喂頻率下，虎斑烏賊每天接近或達到飽食的次數(shù)更多，使得自身獲得更多的營養(yǎng)與能量用于體重增加[15]，進而引起餌料效率的提高，這在團頭魴[13]里也有相同的結(jié)果，說明適當?shù)奶岣咄段诡l率有利于魚類的生長。本試驗中，F(xiàn)2投喂組的餌料效率顯著高于F4投喂組，可能是因為當投喂頻率過高時，一方面，由于虎斑烏賊增加了因攝食而需要消耗的能量，使其用于生長的能量減少，并且水生生物各種活動行為頻繁，能量消耗過快，不利于其自身生長，并且會增加餌料成本[16]；另一方面，因為烏賊是有胃動物，胃中可以容納較多的食物，反復多次飼喂會導致消化道內(nèi)含物反射性急速移動，在未消化的情況下被排掉，從而降低了食物的轉(zhuǎn)化效率，影響生長。

3.2 投喂頻率對虎斑烏賊肝臟和肌肉組成成分、形態(tài)學指標及組織氨基酸組成的影響

3.3 投喂頻率對虎斑烏賊組織脂肪酸組成的影響

海水魚靠自身合成EPA和DHA的含量不能滿足其自身生長的需要，必須要從食物中獲得[26]。缺乏EPA和DHA會對魚類的視覺系統(tǒng)和色素沉積產(chǎn)生不利影響，降低魚苗捕食能力，影響神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)發(fā)育，升高死亡率[27]?；ㄉ南┧?ARA，C20∶4n-6)作為高不飽和脂肪酸其中之一也影響著某些海水魚的正常發(fā)育[28]，在本研究中，隨著投喂頻率從每天1次升高到每天2次，烏賊肌肉和肝臟中的C20∶4n-6含量均顯著降低，而F2和F4投喂組之間沒有顯著性差異。隨著投喂頻率的升高，雖然肌肉中的EPA含量沒有顯著性差異，但是總體表現(xiàn)出上升趨勢，而肌肉中DHA含量和DHA/EPA顯著下降，這與肝臟中的EPA和DHA含量變化相一致，表明肌肉和肝臟中脂肪酸的含量和組成有一定的正相關(guān)性，這可能跟脂肪儲存及脂肪酸的選擇性保留相關(guān)。魚體脂肪酸n-3/n-6作為評價水產(chǎn)品質(zhì)量優(yōu)劣的重要因素之一，WHO/FAO推薦的水平是至少在0.1～0.2[29]，在虎斑烏賊試驗中，冰鮮蝦和虎斑烏賊的肌肉n-3/n-6為9.01～13.54，遠大于WHO/FAO的推薦值，表明冰鮮蝦作為虎斑烏賊的餌料，能夠滿足其脂肪酸的需要量。

3.4 投喂頻率對虎斑烏賊肝臟抗氧化性能和腸道消化酶活性的影響

肝臟是重要的代謝器官，是自由基產(chǎn)生的重要場所。自由基會導致脂肪酸的氧化[30]。丙二醛作為脂質(zhì)過氧化的最終產(chǎn)物，具有細胞毒性[31]，本研究中，虎斑烏賊肝臟丙二醛含量隨著投喂頻率的升高表現(xiàn)為升高的趨勢，這表明高頻率的投喂會引起肝臟氧化應激，這與團頭魴[32]肝臟丙二醛含量在每天投喂6次時達到最高的結(jié)果相一致。在魚類研究中，超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶是評價細胞抗氧化能力的重要指標[33]。本試驗中，F(xiàn)4投喂組肝臟超氧化物歧化酶活性最高，這會緩解由高頻投喂引起的氧化應激。F2投喂組谷胱甘肽過氧化物酶活性顯著低于F1投喂組，而F4投喂組與F1和F2投喂組沒有顯著性差異。然而，目前關(guān)于投喂頻率對虎斑烏賊氧化應激確切機制的研究還比較少，需要進一步深入研究。

消化酶活性被認為是評價魚類吸收消化食物的能力之一[34]。本研究中，3種消化酶(α-淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶)活性都是隨投喂頻率的升高表現(xiàn)為先降低后升高的趨勢，F(xiàn)1投喂組的虎斑烏賊的前腸α-淀粉酶、脂肪酶活性均顯著高于其他組，但各組間胰蛋白酶活性沒有顯著性差異，這與灰海馬(Hippocampuserectus)[35]、條石鯛(Oplegnathusfasciatus)[3]和奧尼羅非魚(Oreochromisniloticus×O.affreus)[36]的研究結(jié)果相似。這可能是由于在較低的投喂頻率下，虎斑烏賊攝入的食物不足，機體自身需要通過提高腸道消化酶活性，使食物中的營養(yǎng)物質(zhì)被充分吸收，進而滿足正常生長所需要的能量；而當攝入的食物增多時，虎斑烏賊用較低的消化酶活性就能獲得滿足正常生長需要的能量，這也進一步驗證了與F4投喂相比，F(xiàn)2投喂組的虎斑烏賊對餌料的利用率更高。最近研究發(fā)現(xiàn)，腸道肌酸激酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶和Na+，K+-ATP酶和消化酶的變化有相似的趨勢[37]，表明魚在最佳投飼頻率下吸收養(yǎng)分的能力增強。

4 結(jié) 論

綜合考慮生長性能、餌料利用、肝臟和肌肉體成分、肝臟抗氧化酶活性、腸道消化酶活以及組織脂肪酸和氨基酸組成，在本試驗條件下，虎斑烏賊幼體的適宜投喂頻率為每天2次。