李 芳，黃小武，覃周嵐，蘇益瓊，覃萬福，韋玉慶，余 波，覃光毅，梁麗娟，羅 生，嚴斯剛

（1. 鹿寨縣動物疫病預(yù)防控制中心，廣西鹿寨 545600；2. 柳州市動物疫病預(yù)防控制中心，廣西柳州 545005；

3. 鹿寨鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站，廣西鹿寨 545600；4. 中渡鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站，廣西鹿寨 545609；5. 平山鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站，廣西鹿寨 545612）

小反芻獸疫（Peste des petits ruminants，PPR）也稱羊瘟、假性牛瘟，是由小反芻獸疫病毒（PPRV）引起的，以發(fā)熱、口炎、腹瀉、肺炎為特征的一種急性、高度接觸性羊傳染病[1]。該病是世界動物衛(wèi)生組織（OIE）規(guī)定的須報告動物疫病[2]，也是我國的一類動物疫病[3]。2012年，國務(wù)院辦公廳發(fā)布《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012-2020年）》，將PPR列入重點防范外來動物疫病名錄。2013年11月底，PPR再次傳入我國并不斷蔓延，至2015年8月，共有22個省（直轄市、自治區(qū)）發(fā)生271起疫情，累計3.7萬只羊發(fā)病，1.7萬只死亡，對養(yǎng)羊業(yè)造成了巨大經(jīng)濟損失[4]。目前，疫苗免疫是最有效的PPR防控措施。2015年農(nóng)業(yè)部印發(fā)了《全國小反芻獸疫消滅計劃（2016-2020年）》（農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2015〕34號）[5]，要求做好PPR免疫工作。2016年農(nóng)業(yè)部將PPR列為強制免疫病種。為了解當?shù)孛庖吣秆蛩a(chǎn)后代的母源抗體動態(tài)，從而為制定合理的PPR免疫程序提供依據(jù)，2017年7-9月開展了本次母源抗體檢測。

1 材料與方法

1.1 血清樣品

采集廣西柳州市轄區(qū)內(nèi)6個山羊規(guī)模養(yǎng)殖場（圈養(yǎng)3個、放養(yǎng)3個，編號為A-F）的173只未免疫PPR疫苗的1～4月齡羔羊血樣，每份不少于3 mL，分離血清不少于1 mL，于-20 ℃以下保存?zhèn)錂z。生產(chǎn)這些羔羊的母羊均已免疫PPR疫苗，血清抗體檢測均為陽性。A場母羊的免疫時間為2015年4月；B-F場免疫時間為2016年4月，其中E場和F場在2017年1月又加強免疫1次。

1.2 診斷試劑

羊小反芻獸疫抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）：購自北京勤邦生物技術(shù)有限公司，批號為20170802。

1.3 儀器

Multiskan FC酶標儀，可調(diào)移液器，恒溫培養(yǎng)箱。

1.4 抗體檢測

具體操作步驟按試劑盒說明書進行。以O(shè)D450吸光值為判定標準。試驗正常情況下，陰性對照吸光值≥1.0，陽性對照吸光值≤陰性對照吸光值×50%。按照公式計算阻斷率（PI）：PI=（1-樣本值/陰性對照孔均值）×100%。根據(jù)PI進行結(jié)果判定：PI≥50%為陽性，PI＜50%為陰性。陰性結(jié)果表明，羊只抗體水平不足，需要補打相應(yīng)疫苗。該試驗僅定性檢測羊血清中PPR抗體，根據(jù)PI對抗體水平進行粗略評估。

2 結(jié)果

2.1 不同養(yǎng)殖場羔羊檢測情況

6個不同飼養(yǎng)條件養(yǎng)殖場的173份血清中，檢出陽性55份，陽性率為31.79%，樣品平均PI值為47.79%；F場抗體陽性率最高，為66.67%，A場最低，為3.33%；A、B、C場平均PI小于50%，D、E、F場平均PI大于50%（表1）。

表1 免疫母羊后產(chǎn)羔羊的抗體水平檢測結(jié)果

2.2 不同飼養(yǎng)條件羔羊檢測情況

圈養(yǎng)條件羔羊的抗體陽性率為21.69%，放養(yǎng)的為41.11%，差異顯著（P＜0.05）。

表2 不同飼養(yǎng)條件下的羔羊母源抗體檢測結(jié)果

2.4 不同日齡羔羊檢測情況

30～60日齡羔羊的抗體陽性率較高，達到62.00%，而61～90日齡、91～120日齡的羔羊抗體陽性率分別降低為15.00%和21.69%（表3）。

表3 不同年齡羔羊的母源抗體檢測結(jié)果

3 分析與討論

3.1 母羊免疫時間與次數(shù)對羔羊母源抗體有影響

檢測發(fā)現(xiàn)，E、F場的羔羊抗體陽性率較高，在50%以上，PI在55%以上，而A場陽性率和PI的最低，分別為3.33%和36.18%。導(dǎo)致差異較大的原因可能是，E、F場母羊已經(jīng)連續(xù)注射2次PPR疫苗，且羔羊又沒有及時斷奶，使其體內(nèi)的母源抗體維持在較高水平。A場的母源抗體陽性率僅為3.33%，這是由于其母羊的免疫時間已超過3年，抗體水平已經(jīng)較低，因而其所產(chǎn)羔羊體內(nèi)的母源抗體陽性率自然較低。

3.2 羔羊斷奶時間對母源抗體有影響

檢測發(fā)現(xiàn)放養(yǎng)模式下的羔羊母源抗體陽性率為41.11%，高于圈養(yǎng)模式（21.69%）。這是因為放養(yǎng)模式的羔羊還未斷奶，母乳中有PPR抗體，使得羔羊體內(nèi)的抗體水平維持時間較長。而圈養(yǎng)模式下的羔羊，出生后60日齡左右就要斷奶，這造成母源抗體在2月齡之后逐步轉(zhuǎn)陰，羔羊抗體陽性率僅為21.69%。

3.3 母源抗體在60日齡后顯著降低

檢測發(fā)現(xiàn)，1～2月齡羔羊的母源抗體仍維持在較高水平（62.00%），但2月齡后，母源抗體水平顯著降至30%以下，說明60日齡以內(nèi)羔羊受母源抗體影響較大。何世成等[6]研究發(fā)現(xiàn)：PPR母源抗體存在于大部分抗體陽性母羊的子代羊中；抗體陽性母羊所產(chǎn)羔羊母源抗體有86.4%的窩產(chǎn)陽性率，母源抗體的半衰期在21 d以上。本次檢測發(fā)現(xiàn)61～90日齡羔羊的抗體陽性率反而高于91～120日齡。這可能是由于所檢測羔羊來自不同飼養(yǎng)模式和不同日齡導(dǎo)致的。雖然大部分羔羊的母源抗體持續(xù)時間為1～2個月，但因影響母源抗體的因素有多種，也有個別2月齡以上羔羊的母源抗體仍保持在較高水平。因山羊從母羊中獲得的母源抗體對后天免疫抗體的產(chǎn)生有一定的干擾作用[7]，如果在羔羊母源抗體水平較高的時候接種活疫苗，不但不能激發(fā)機體產(chǎn)生保護抗體，反而會使機體內(nèi)抗體水平更低。同時，過晚則使抗體空檔期過長，會增加感染風(fēng)險。由于在生產(chǎn)實踐中，母源抗體的變化規(guī)律并不完全一致，因而需要根據(jù)監(jiān)測結(jié)果調(diào)整免疫程序，只有這樣，才能切實提高免疫效果，避免PPR發(fā)生。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果顯示，羔羊的PPR母源抗體水平受母羊免疫時間與次數(shù)，即免疫抗體水平有關(guān)，同時也與羔羊斷奶時間和日齡有關(guān)。大部分羔羊在2月齡以后，母源抗體水平顯著下降，因此建議羔羊的最早免疫時間為60日齡左右。鑒于羔羊母源抗體水平受多種因素影響，其母源抗體消長水平并不一致，因此需要根據(jù)監(jiān)測結(jié)果制定合理的免疫程序。只要堅持免疫方案完善及免疫后評估，就能有效控制PPR的發(fā)生與流行。