河南省平頂山市食品藥品檢驗所（467000）李華麗 王小龍 李梅榮 葉曉亞

婦炎康是一種中藥制劑，具有行氣止痛、逐瘀散結(jié)、益氣活血等功效，現(xiàn)已被臨床廣泛應(yīng)用于慢性盆腔炎的治療中，尤其適用于氣虛血瘀證的患者，效果確切，具有一定的臨床應(yīng)用價值[1]。本文筆者為了驗證高效液相色譜法在中藥復(fù)方制劑婦炎康有效成分含量測定的應(yīng)用效果，特選定指標(biāo)成分：丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷進(jìn)行查究，匯總?cè)缦隆?/p>

1 資料與方法

1.1 材料 丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷，所有的產(chǎn)品均來自于中國食品藥品檢定研究院。婦炎康片（生產(chǎn)企業(yè)：云南白藥集團(tuán)有限公司生產(chǎn)），色譜純選用的是甲醇、乙腈（生產(chǎn)企業(yè)：美國Fisher公司），分析純選用的是磷酸，屬于娃哈哈純凈水（生產(chǎn)企業(yè)：杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司）。

1.2 方法：①色譜條件：Kromasil C18，規(guī)格是 4.6×250 mm；5 um。流動相是A乙腈-B甲醇-0.1%磷酸溶液梯度洗脫。流速：每分鐘1ml，柱溫是25攝氏度。波長是285mm、230mm。進(jìn)樣量是10ul。②制備溶液：a.制備對照品溶液：精密稱取丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷對照品，甲醇用于溶解，將甲醇制備成3mg/ml、0.045mg/ml、0.5mg/ml、0.2mg/ml的對照品混合液，對照品的混合液精密地量取1ml，甲醇加入后定為4ml，對照品的溶液制備成功[2]。b.制備樣品溶液：本品精密地稱取0.5g，放置在10ml的容器瓶中，加入甲醇，超聲溶解30分鐘，而后冷卻至溫度接近于室溫，用甲醇補(bǔ)足，進(jìn)行微孔濾膜過濾，濾液取續(xù)，樣品溶液制備成功[3]。③制備陰性溶液：按照②的方法制備當(dāng)歸、赤芍、丹參的陰性樣品。

2 結(jié)果

2.1 試驗系統(tǒng)適用性 精密地吸取陰性溶液、樣品溶液、對照品溶液，按照色譜條件進(jìn)行進(jìn)樣，詳細(xì)記錄色譜圖。結(jié)果顯示：色譜圖下丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷的條件平穩(wěn)，理論塔板數(shù)在3000以上，具有較好的分離效果[4]。

2.2 試驗線性關(guān)系 精密吸取對照品混合液制備芍藥苷（0.2mg/ml、1mg/ml、0.05mg/ml、0.0025mg/ml、0.0013mg/ml）、丹酚酸（3mg/ml、0.15mg/ml、0.075mg/ml、0.038mg/ml、0.0019mg/ml）、原兒茶醛（0.045mg/ml、0.023mg/ml、0.0115mg/ml、0.0058mg/ml、0.0029mg/ml）、丹參素（0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.0125mg/ml、0.0625mg/ml、0.0313mg/ml）五種混合對照品溶液。按照色譜條件進(jìn)行進(jìn)樣，對峰面積進(jìn)行詳細(xì)記錄，以濃度以及峰面積進(jìn)行線性回歸。得到的丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷回歸方程為：Y=3.96X-7.21（r=0.8265）、Y=3.18X-8.06（r=0.9204）、Y=5.26X-6.35（r=0.9991）、Y=4.21X-9.26（r=0.9033）；濃度在峰面積以及上述范圍中線性關(guān)系良好。

2.3 試驗精密度 對照品混合液精密地抽取6次，丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷的峰面積的RSD值分別是1.26%、1.15%、1.06%、1.31%，說明儀器具有良好的精密度。

2.4 試驗穩(wěn)定性 對供試品溶液進(jìn)行精密的吸取，按照色譜條件進(jìn)行進(jìn)樣，分別在0h、2h、4h、8h、12h、24h進(jìn)樣，對峰面積進(jìn)行詳細(xì)的記錄，丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷的峰面積的RSD值分別是1.46%、1.39%、1.51%、1.49%，說明在24小時之內(nèi)樣品溶液的穩(wěn)定性較好。

2.5 試驗重復(fù)性 取婦炎康樣品，根據(jù)樣品溶液的制備方法制定樣品6份，對峰面積進(jìn)行記錄，峰面積的RSD值分別是1.02%、1.09%、1.14%、1.12%，說明該方法的良好性較好。

2.6 試驗加樣回收率 每份含量是0.25g的婦炎康片，一共取6份，加入適量的對照品。根據(jù)溶液的制備方法制備，RSD值分別是1.05%、0.96%、0.98%、1.01%，試驗加樣回收率分別是100.25%、102.14%、100.25%、100.08%，說明該方法具有較好的試驗加樣回收率，見附表。

2.7 分析樣品含量檢測結(jié)果 隨機(jī)取4批婦炎康樣品含量，根據(jù)溶液制備的方法予以制備，峰面積詳細(xì)記錄，批號為16030205的，丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷含量分別是4.0626、0.0625、0.6682、0.2351。1603182的分別是4.1214、0.0612、0.6725、0.2206。1603253的分別是4.0125、0.0611、0.6926、0.2415。

附表 試驗加樣回收率

3 討論

婦炎康是當(dāng)前被臨床廣泛應(yīng)用于治療陰道炎、盆腔炎、慢性附件炎等疾病的中藥制劑，具有軟堅散結(jié)、活血化瘀、消炎止痛、清熱解毒等功效，抗感染以及抗炎效果顯著。它由丹參、黃柏、莪術(shù)、赤芍等多種成分組成，對病原微生物、纖維化以及膠原活性均具有一定的抑制效果，具有較好的治療效果。高效液相色譜法具有高靈敏度、靈活性較強(qiáng)以及分離度較高等一系列優(yōu)點[5][6][7]。本研究中，高效液相色譜法測量了丹酚酸、原兒茶醛、丹參素、芍藥苷的含量，經(jīng)過試驗證明該方法在檢測婦炎康有效成分中的準(zhǔn)確性以及精密度均較高，并且所需要的樣品容量較少，在中藥制劑的質(zhì)量控制中具有一定價值，在臨床中具有較高的借鑒力度，值得推廣。