王翰華 呂計進(jìn)

摘要：三葉青（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg）藥效顯著，具有較大開發(fā)利用價值，但其野生資源瀕危且尚未完全實現(xiàn)人工產(chǎn)業(yè)化栽培。在總結(jié)三葉青藥材的藥用歷史與產(chǎn)品現(xiàn)狀分析的基礎(chǔ)上，系統(tǒng)分析了浙江省三葉青種質(zhì)資源、栽培環(huán)節(jié)、綜合開發(fā)等產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的關(guān)鍵問題，并提出了實施三葉青產(chǎn)業(yè)化過程中需關(guān)注的發(fā)展思路及對策。

關(guān)鍵詞：三葉青（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg）；產(chǎn)業(yè)化；發(fā)展思路；浙江省

中圖分類號：S567.23+9（255） 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：0439-8114（2018）14-0078-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.14.018 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Abstract： Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg has significant pharmacological effects as well as great development and utilization value， but its wild resources are endangered and artificial industrial cultivation has not yet been fully realized. On the basis of summarizing the medicinal history and product status analysis of T. hemsleyanum medicinal materials， it was systematically analyzed that the key issues of industrialization development of Zhejiang T. hemsleyanum germplasm resources， cultivation links and comprehensive development. Furthermore， the development ideas and countermeasures that should be paid attention to during the process of industrialization of T. hemsleyanum were put forward.

Key words： Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg； industrialization； development ideas； Zhejiang province

三葉青（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg）為多年生草質(zhì)攀緣藤本，中文學(xué)名三葉崖爬藤，又名金線吊葫蘆、蛇附子、石抱子、石猴子、石老鼠、攔山虎、雷膽子、破石珠，為葡萄科（Vitaceae）崖爬藤屬（Albertisia Becc.）崖爬藤亞屬（Tetrastigma Subgen.）植物，以干燥塊根入藥，是浙江、福建省傳統(tǒng)習(xí)用草藥，俗名“一粒珠”[1]。三葉青在《中藥志》、《中藥大辭典》、《全國中草藥匯編》中均有收載，其性味微苦，歸經(jīng)平，無毒，具有清熱解毒、活血散結(jié)、消炎止痛、祛風(fēng)化痰、理氣健脾等功效，被譽(yù)為“植物抗生素”，是中國特有的珍稀藥用植物。藥理學(xué)研究表明，三葉青具有抗腫瘤、抗病毒、抗炎、解熱、護(hù)肝等作用[2-4]。三葉青中的化學(xué)成分包括黃酮類、多糖類、酚酸類、三萜類、甾類、鞣質(zhì)類等，其中黃酮類化合物是其抗腫瘤的主要活性成分[5]。近年來，由于人為過度采挖，三葉青野生資源瀕臨滅絕[6]，2005年浙江省將三葉青列入瀕危保護(hù)植物[7]，2011年被列入“浙江省首批農(nóng)作物種質(zhì)資源保護(hù)名錄”[8]。由于種植三葉青經(jīng)濟(jì)效益顯著，因此很多地方開始引種栽培。

1 三葉青藥用歷史及產(chǎn)地

三葉青藥用記載最早見于《本草綱目》，稱“三葉崖爬藤，性味苦、辛、涼，清熱涼血、活血祛風(fēng)”[9]。民間用來治療小兒高熱、慢性咽喉炎、扁桃體炎、肝炎、肺炎、胃炎、淋巴結(jié)核及蛇咬傷等，如江西民間驗方記載，三葉青可治療肝炎：石老鼠根15 g，虎刺根、茜草根各30 g，水煎服，每日一劑[10]；浙江民間驗方記載，治療病毒性腦膜炎：取干燥三葉青塊根，成人15 g，兒童9 g，水煎服，每日一劑[11]；湖南民間驗方記載：石猴子（三葉青）全草或塊根，加冷水，內(nèi)服五錢，外涂擦傷處，此為主藥，再用葉上針煎水，冷卻后外洗，并內(nèi)服適量，服藥后只能飲冷水，不能飲熱水，可用于治療銀環(huán)蛇咬傷[12]。

三葉青主要分布浙江、福建、江西、湖南省等南方部分地區(qū)，生長于海拔300～1 300 m的陰濕山坡處，喜歡生長在腐殖質(zhì)豐富或石灰質(zhì)的土壤中，耐干旱，不喜積水，適應(yīng)于散光照射、涼爽氣候。野生三葉青主要有2個類型，一個是紫藤三葉青，成熟期靠近根部藤的表皮顏色為紫褐色，主要分布于北緯27.3°以北的浙江、江西省等地。另一個是青藤三葉青，藤的表面顏色為青白色，主要分布于北緯 27.3 °以南的福建、湖南、廣西、云南?。ㄗ灾螀^(qū)）等地。一般認(rèn)為紫藤三葉青屬正宗藥用種[8]，而青藤三葉青塊根性寒，藥用功效不及紫藤三葉青。

2 三葉青生產(chǎn)現(xiàn)狀

由于三葉青臨床療效顯著，2005年，浙江省食品藥品檢驗研究院將浙江三葉青列入中藥炮制目錄[7]。近年來，浙江省中醫(yī)藥管理局、浙江省經(jīng)濟(jì)貿(mào)易委員會等部門將大量科研基金資助于三葉青抗腫瘤機(jī)理及應(yīng)用研發(fā)、三葉青野生轉(zhuǎn)家種和種苗培育等項目，并聯(lián)合北京林業(yè)大學(xué)、浙江省中醫(yī)藥研究院、浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院、浙江省疾病預(yù)防控制中心、浙江大學(xué)、浙江理工大學(xué)等科研院校先后對三葉青的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、臨床應(yīng)用及制劑開發(fā)等方面進(jìn)行了深入研究。目前，杭州天惠醫(yī)藥科技有限公司已開發(fā)出以三葉青為主要原料的專利制劑“金苗片”（專利號：2005100506495），另有“三葉青膠囊”“三葉青顆?！薄叭~青粉”等產(chǎn)品。浙江艾克野生植物有限公司以三葉青塊根為原料研發(fā)了抗突變、治療免疫疾病的藥物“金絲地甲膠囊”，其對Lewis肺腫瘤細(xì)胞、SMMC-7721肝腫瘤細(xì)胞、SCG-7901胃腫瘤細(xì)胞、HCT-116結(jié)腸腫瘤細(xì)胞、HL-60人淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞生長有明顯抑制作用。在中藥臨床使用上，三葉青已列入浙江省可公費報銷的中藥名錄中。

省外如河南鈴銳制藥股份有限公司的“結(jié)石康膠囊”、廣西盈康藥業(yè)有限責(zé)任公司的“華倫風(fēng)痛寶膠囊”、陜西西安兆興制藥有限公司的“排石利膽膠囊”等產(chǎn)品都是以三葉青的塊根或藤葉為原料開發(fā)制成。

浙江省三葉青栽培技術(shù)以大田人工栽培和組織培養(yǎng)快速繁殖為主，選用野生道地三葉青扦插繁殖或組織培養(yǎng)的外植體植株，每年5月開花后結(jié)得綠豆大小果實作為三葉青繁殖材料；有性繁殖是野生三葉青在自然界中繁衍后代的主要方式，目前浙江省遂昌縣把三葉青作為浙西南山區(qū)道地藥材而大力發(fā)展[13]，已建成三葉青種苗繁育基地和標(biāo)準(zhǔn)化栽培示范基地若干；杭州三日農(nóng)業(yè)科技有限公司在富陽市進(jìn)行道地三葉青栽培品種篩選也有數(shù)十年時間，已選育出一個小葉、紫藤、紅果、白粘質(zhì)葫蘆形優(yōu)良道地三葉青新品種[7]。據(jù)統(tǒng)計，浙江省內(nèi)主要的種植地區(qū)有麗水、金華、寧波、杭州、臺州市等地，種植面積約120 hm2，年產(chǎn)量約32 000 kg（含全草）。

3 三葉青產(chǎn)業(yè)化存在的問題

3.1 種質(zhì)資源存在的問題

由于三葉青野生資源的過度挖掘，使之瀕臨滅絕，造成山區(qū)生態(tài)系統(tǒng)的嚴(yán)重破壞和生物多樣性的喪失；另一方面，三葉青種子產(chǎn)量少或無，且是多年生植物，有性繁殖慢，農(nóng)家生產(chǎn)歷來采用扦插與嫁接等無性繁殖方式，馴化程度不高，只種不選、自繁自用的狀況加重了性狀退化，嚴(yán)重影響了臨床療效。因此三葉青種質(zhì)資源分類、繁育、保存、鑒定及評價是三葉青生產(chǎn)及應(yīng)用上亟待解決的關(guān)鍵問題。

3.2 栽培環(huán)節(jié)存在的問題

三葉青對于生長環(huán)境要求嚴(yán)苛，其地下塊根生長慢，一般需要3～5年才能藥用，人工栽培難度大。而且相關(guān)人工栽培的研究起步較晚，還沒有依據(jù)三葉青地域特性而模擬生態(tài)人工栽培的技術(shù)。目前，三葉青野生馴化栽培中，僅對光、肥、水因子進(jìn)行了初步探索，栽培關(guān)鍵技術(shù)有待進(jìn)一步優(yōu)化，人工栽培技術(shù)體系還不成熟，無法進(jìn)行推廣應(yīng)用，導(dǎo)致三葉青人工栽培停滯不前，種植面積無法擴(kuò)大。

3.3 綜合開發(fā)有待加強(qiáng)

三葉青藥材傳統(tǒng)上只用塊根，大量的地上部分（全草、漿果等）被直接棄之。三葉青塊根生長慢，成藥時間長，這種使用方法造成較大的資源浪費。因此，需要對三葉青各部位開展綜合利用研究。目前，已發(fā)現(xiàn)三葉青地上部分含有黃酮類、氨基酸類、萜類、強(qiáng)心苷類、甾體類、油脂等成分[9]，亦證實三葉青地上部分提取物具有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用[14]。對三葉青的綜合開發(fā)，不但可以提高人工栽培的經(jīng)濟(jì)效益，更能促進(jìn)生物資源的有效綜合利用。

另外，浙江省內(nèi)缺少中藥飲片和中藥制藥龍頭企業(yè)，盡管有政策的大力支持，但部分企業(yè)市場開發(fā)能力和管理水平不高，高技術(shù)含量與高附加值產(chǎn)品仍然較少，研發(fā)投入有限，技術(shù)創(chuàng)新能力及新產(chǎn)品開發(fā)力度不足，缺乏具有自主知識產(chǎn)權(quán)的中藥新品種及市場盈利豐厚的明星產(chǎn)品，沒能有效帶動三葉青的深度開發(fā)和利用。

3.4 藥用廣泛性受到限制

三葉青目前仍屬民間草藥，雖然由于其明確的抗腫瘤活性而日益受到重視，但尚未列入中國藥典。藥典代表了藥材的法定性和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)范性。國家藥品標(biāo)準(zhǔn)對加強(qiáng)中藥材品質(zhì)的監(jiān)督管理、質(zhì)量保障、用藥規(guī)范、安全有效起到了重要保證作用。當(dāng)前三葉青的生產(chǎn)與加工標(biāo)準(zhǔn)只能依據(jù)地方標(biāo)準(zhǔn)實施，如《浙江省中藥炮制規(guī)范》已實施，這一處境使得三葉青的藥用開發(fā)及臨床應(yīng)用在全國推廣受到一定的限制。

4 三葉青產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的對策和建議

4.1 加強(qiáng)三葉青野生種群及棲息地保護(hù)

三葉青是一種多年生蔓性藤本植物，對生長環(huán)境要求苛刻、生長周期長、繁殖困難，但日益上升的市場需求，加劇了三葉青野生資源種群的枯竭與消亡。浙江省三葉青主要的野生種群多數(shù)殘存于海拔較高的山坡林下灌叢中或山谷溪邊林下的巖石縫中等交通不便的偏遠(yuǎn)區(qū)域，所以應(yīng)加大對這些區(qū)域的保護(hù)巡查力度，設(shè)立嚴(yán)格管控的禁采區(qū)域。對于有一定規(guī)模的資源種群，按照野生資源更新周期6年的前提條件，各分布區(qū)當(dāng)?shù)氐牧謽I(yè)主管部門應(yīng)嚴(yán)格管控每年的三葉青藥材采挖規(guī)模，同時要保留一定量的野生種子采摘種群，對這些種群嚴(yán)禁采挖植株全草。

4.2 加強(qiáng)三葉青種質(zhì)資源收集保存，加快生物技術(shù)在種質(zhì)資源評價和創(chuàng)新中的應(yīng)用研究

當(dāng)前急需在三葉青野生種質(zhì)資源尚未消失之前，全面收集和保存各居群野生種質(zhì)資源，為進(jìn)一步育種、藥材品種定向培育準(zhǔn)備遺傳材料。如果不及時收集野生種質(zhì)并加以保護(hù)，一旦野生種群消亡，造成的潛在損失不可估量。

目前，關(guān)于三葉青種質(zhì)資源的農(nóng)藝學(xué)評價和理化評價已經(jīng)較為成熟可靠[6]。而生物技術(shù)在植物種質(zhì)資源評價和創(chuàng)新中具有無可比擬的優(yōu)越性。如彭昕團(tuán)隊分別對三葉青ISSR[15]、SRAP[16]反應(yīng)體系和擴(kuò)增程序進(jìn)行了優(yōu)化，建立了穩(wěn)定可靠、多態(tài)性好、可用于三葉青遺傳多樣性分析的遺傳分子標(biāo)記體系，其研究結(jié)果顯示，三葉青種質(zhì)遺傳變異主要存在于地理居群間，群體間基因交流低，野生居群遺傳多樣性顯著高于人工栽培群體，遺傳相似性與地理距離有一定的相關(guān)性[17]。錢麗華[18]首次報道利用莖段的腋芽和試管不定芽作為起始外植體，通過叢生芽分化途徑實現(xiàn)三葉青的離體快速繁殖。但是，近幾年的栽培繁育過程中，出現(xiàn)了抗病抗寒性差、黃酮含量不穩(wěn)定、遺傳特征逐年退化等現(xiàn)象；因此開展特異遺傳性狀的分子水平深度評價，運(yùn)用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)實現(xiàn)分子輔助遺傳育種，篩選優(yōu)異種質(zhì)資源，將有利于三葉青種質(zhì)資源的高效利用。

4.3 推廣林下仿生栽培技術(shù)，加強(qiáng)藥材規(guī)范化種植基地建設(shè)

利用浙江省優(yōu)良的林業(yè)生態(tài)資源，尤其是利用林下優(yōu)越的自然生境，開展三葉青林下仿生培育，以獲得高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的三葉青藥材，這既是挽救三葉青資源的重要舉措，又是生產(chǎn)優(yōu)良抗腫瘤藥材、支撐醫(yī)藥事業(yè)發(fā)展的可行途徑。目前，已在平原果林、竹林及山區(qū)經(jīng)濟(jì)林開展了林下種植仿生研究，在種植基地、田間管理、光照度、病蟲害防治及采收等方面積累了有益的經(jīng)驗，取得了較好成效。研究表明，林下種植地光照度在2 000 lx以上，太陽光照射時有時無（但又不能長時間直射），將有利于三葉青塊根的生長[19]。

從國家需要、行業(yè)要求、野生資源現(xiàn)狀及市場供求關(guān)系來看，三葉青的產(chǎn)業(yè)化種植都是勢在必行。眾多研究表明，三葉青藥材具有鮮明的地域性和道地性的特色，浙江省是其道地產(chǎn)區(qū)[2]，其藥用價值高，市場潛力巨大，是發(fā)展區(qū)域特色藥材產(chǎn)業(yè)的優(yōu)質(zhì)資源。因此，為保障三葉青藥材的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，種源繁育基地、種苗基地、人工栽培基地及配套農(nóng)業(yè)基礎(chǔ)設(shè)施的建設(shè)落實必須引起產(chǎn)區(qū)相關(guān)部門的重視，應(yīng)著力構(gòu)建浙江省三葉青培育產(chǎn)業(yè)化體系，確保未來三葉青產(chǎn)業(yè)得以實現(xiàn)生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化、管理國際化，并走上真正意義的可持續(xù)發(fā)展道路。

4.4 加快三葉青衍生品的培育與研發(fā)

三葉青因其顯著的抗腫瘤活性受到關(guān)注，可重點研發(fā)以三葉青為主藥的抗腫瘤中藥新品種，也可從三葉青中提純、結(jié)構(gòu)改造得到抗腫瘤單體化合物。同時，應(yīng)利用三葉青“植物抗生素”的優(yōu)勢，大力開發(fā)衍生產(chǎn)品，如口腔和足浴用藥品、獸藥、飼料添加劑等，培育新興相關(guān)產(chǎn)業(yè)，延伸中藥產(chǎn)業(yè)鏈；利用優(yōu)質(zhì)的環(huán)境資源和旅游資源，開發(fā)中醫(yī)藥特色休閑養(yǎng)生等文化旅游項目，培育和促進(jìn)產(chǎn)區(qū)休閑養(yǎng)生經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。

4.5 以打造產(chǎn)銷平臺為紐帶，著力打響浙江省三葉青品牌

可考慮舉辦全國性三葉青高峰論壇等會議，有效提升浙江省三葉青在國內(nèi)外的知名度，著力打響浙江省三葉青品牌；充分發(fā)揮浙江省中藥材產(chǎn)業(yè)協(xié)會的作用，為浙江省三葉青與省內(nèi)外相關(guān)主體的產(chǎn)、加、銷深度融合作出更大貢獻(xiàn)。引導(dǎo)主體創(chuàng)新營銷思路，借助阿里巴巴、微信等新型電子商務(wù)交易平臺（媒介）開展便捷式營銷，促進(jìn)營銷信息化。

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