甘中偉 陳 雄
(1 云南師范大學(xué)附屬中學(xué) 云南昆明 650106 2 四川省綿陽中學(xué)實驗學(xué)校 四川綿陽 621000)
“胡蘿卜素的提取”是生物選修《生物技術(shù)實踐》專題6課題2的內(nèi)容,課程標(biāo)準(zhǔn)的要求是“研究從生物材料中提取某些特定成分”。本模塊強調(diào):以學(xué)生為主體,通過實驗設(shè)計和操作實踐,學(xué)習(xí)科學(xué)探究。但由于中學(xué)實驗室條件限制,高中教師幾乎不開展 “胡蘿卜素的提取”這一實驗。本課題通過興趣小組嘗試設(shè)計、安裝萃取實驗裝置提取胡蘿卜素,將探究實驗過程中錯誤的操作和正確操作流程整理成視頻,課上介紹探究過程,突出本節(jié)課的重、難點 “胡蘿卜素的提取”。本課題中還涉及到一種不同于教材的實驗儀器“旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀”,通過觀察、比較,學(xué)生加深了對于用萃取法提取植物有效成分的認(rèn)識,增進對實驗原理、流程的理解。
1)知識目標(biāo):①胡蘿卜素的性質(zhì);②寫出胡蘿卜素提取的實驗流程,并分析影響萃取效率的因素。
2)能力目標(biāo):①根據(jù)不同的實驗材料選擇恰當(dāng)?shù)奶崛》椒?;②根?jù)萃取法原理,設(shè)計提取胡蘿卜素的實驗操作過程。
3)情感態(tài)度與價值觀目標(biāo):①形成嚴(yán)謹(jǐn)、科學(xué)、務(wù)實的態(tài)度和精神;②關(guān)注生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展;③提高團隊合作意識。
1)重點:胡蘿卜素的提取,紙層析的操作。
2)難點:萃取法實驗設(shè)備的原理及使用,胡蘿卜素的提取。
4.1 導(dǎo)入新課 教師簡要介紹β-胡蘿卜素對人體的作用,提供胡蘿卜素圖片及理化性質(zhì):橘黃色晶體粉末;不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機溶劑;揮發(fā)性差。思考:根據(jù)胡蘿卜素的化學(xué)性質(zhì),提取胡蘿卜素能否用水蒸氣蒸餾法?原因是什么?
設(shè)計意圖:運用所學(xué)知識(水蒸氣蒸餾法)解決新問題。啟發(fā)引導(dǎo)學(xué)生思考,展開學(xué)習(xí),引出新課。
4.2 以視頻錄像創(chuàng)設(shè)探究情境,引發(fā)學(xué)生探究欲望 實驗過程由學(xué)生自行設(shè)計、操作,在云南大學(xué)生物資源保護與利用重點實驗室完成,視頻錄像、剪切等也由學(xué)生分工完成。整個實驗過程中有許多操作錯誤,學(xué)生利用“導(dǎo)學(xué)案”習(xí)得知識找出錯誤的地方并給予糾正。以下為部分錯誤的實驗操作流程,學(xué)生邊操作邊進行講述。
4.2.1 胡蘿卜的處理 取新鮮胡蘿卜500 g,用清水清洗后瀝干,再將胡蘿卜切成小塊烘干。烘干時溫度盡可能高、時間盡量長。
4.2.2 胡蘿卜素的萃取
1)儀器的組裝:按照從上到下的順序?qū)x器進行組裝。
2)萃取劑的選擇:現(xiàn)有石油醚,乙醇,乙酸乙酯,由于胡蘿卜素易溶于有機溶劑,所以選取上述任意一種化學(xué)試劑都可作為萃取劑。
3)正式萃?。簩⑦x取的萃取劑與干燥胡蘿卜隨意混合,直接用酒精燈加熱。30 min后完成萃取。
4.2.3 萃取液的濃縮 將萃取后的燒瓶固定在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上,通過真空泵使燒瓶內(nèi)處于負(fù)壓狀態(tài),燒瓶內(nèi)溶液在負(fù)壓狀態(tài)下,通過旋轉(zhuǎn)加熱蒸發(fā)掉萃取有機溶劑。濃縮結(jié)束后,得到胡蘿卜素粗品,用石油醚溶解。
4.2.4 胡蘿卜素粗品的鑒定
1)制備濾紙:在潔凈濾紙下端距底邊1 cm處用鉛筆做一基線,在基線上取A、B、C、D 4點。用滴管分別在B、C處緩緩滴入一滴萃取樣品;在A、D處緩緩滴入一滴標(biāo)準(zhǔn)樣品。用吹風(fēng)機將溶劑吹開,保持濾紙干燥。
2)層析:將濾紙卷成圓筒狀,使兩端靠近,并放置在裝有0.5 cm深石油醚的開放玻璃瓶中,色素完全分開后,取出濾紙使石油醚自然揮發(fā)。
3)觀察、比較提取液與標(biāo)準(zhǔn)液在濾紙上擴散的痕跡。
設(shè)計意圖:正確有效地回歸教材,是課堂教學(xué)的重要內(nèi)容。學(xué)生通過預(yù)習(xí)、辨析錯誤操作,培養(yǎng)自學(xué)能力、獨立觀察能力及語言組織、表達(dá)能力。
4.3 分析、解釋錯誤的實驗操作,自主構(gòu)建新知學(xué)生以小組為單位,以搶答形式指出上述操作中的錯誤之處。教師最后按照操作順序,通過設(shè)問幫助學(xué)生理解實驗流程及操作中的注意事項。
4.3.1 胡蘿卜的處理
1)實驗材料胡蘿卜應(yīng)該如何處理?粉碎、干燥的目的是什么?(實驗材料要進行粉碎,有利于原料與萃取劑充分接觸,增大溶解度;干燥的目的是減少胡蘿卜中水分含量,提高萃取效率。)
2)干燥的時間、溫度有無特殊要求?原因是什么?(干燥的溫度太高、時間太長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解。)
4.3.2 胡蘿卜素的萃取
1)實驗儀器應(yīng)該按照什么順序組裝?燒瓶上方還要安裝什么裝置?其目的是什么?(實驗儀器按照“從下到上”的順序組裝,燒瓶上方還要安裝“回流冷凝裝置”,防止加熱時有機溶劑揮發(fā)。)
2)萃取劑的選擇:本實驗中選擇石油醚,而不選另外2種有機溶劑的原因分別是什么?(乙醇是水溶性有機溶劑,因萃取中能與水混溶而影響萃取效果;乙酸乙酯沸點低于石油醚,加熱萃取時易揮發(fā),所以不選這2種有機溶劑。)
3)萃取劑的用量:選取的萃取劑與干燥胡蘿卜能否隨意混合?原因是什么?(萃取劑的使用量是影響萃取效率的主要因素之一,所以不能隨意混合。)
4)萃取過程:應(yīng)該如何加熱萃???萃取的時間、溫度有無要求?原因是什么?(有機溶劑都是易燃物,所以采用水浴加熱;一般來說,萃取溫度高、時間長,需要提取的物質(zhì)就能充分溶解,萃取效果就好。)
4.3.3 萃取液的濃縮 在萃取液濃縮之前,還要進行什么操作,其目的是什么? (濃縮之前,還要進行過濾,除去萃取液中的不溶物。)
4.3.4 胡蘿卜素粗品的鑒定
1)點樣時的注意事項是什么?能否用滴管點樣?如何正確操作?[點樣時要快速細(xì)致;滴管點樣加入的樣品過多,形成的圓點直徑過大,所以不能用滴管點樣;正確操作是:用毛細(xì)吸管(或最細(xì)的注射器針頭)點樣,形成直徑為2 mm左右的圓點,用吹風(fēng)機將溶劑吹干,保持濾紙干燥,再重復(fù)點樣3~4次。]
2)與較好層析結(jié)果(圖1)相比較,較差層析結(jié)果(圖2)中A,D處點樣色素為什么移動加快、移動方向朝中間靠攏?(紙層析裝置中濾紙筒的豎直邊緣相互接觸,因毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動加快,溶劑前沿不齊。)
圖1 胡蘿卜素紙層析結(jié)果(較好)
圖2 胡蘿卜素紙層析結(jié)果(較差)
3)層析容器是否需要密閉,原因是什么?(石油醚易揮發(fā),所以層析容器要密封。)
4.3.5 播放胡蘿卜素的提取與鑒定實驗正確操作錄像
設(shè)計意圖:創(chuàng)設(shè)問題的情境讓學(xué)生更多地參與到教學(xué)中,引導(dǎo)學(xué)生一步步分析實驗流程及注意事項,通過自己總結(jié),加深對知識的理解和記憶,提升認(rèn)知。學(xué)生在學(xué)習(xí)過程中體會到學(xué)習(xí)的成就感,找到學(xué)習(xí)的樂趣。
總結(jié)影響整個萃取效率的因素有哪些?通過思考影響萃取效率的因素,學(xué)生對知識進行梳理,進一步理解實驗流程及相關(guān)注意事項。
1)設(shè)計一個實驗,利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)胡蘿卜素;
2)設(shè)計實驗探究萃取劑的性質(zhì)和使用量對萃取效率的影響;
3)比較3種提取方法的優(yōu)、缺點。
本課題內(nèi)容受到教學(xué)條件的限制,所以實驗的準(zhǔn)備、實施工作在大學(xué)實驗室進行,興趣小組的學(xué)生做了大量準(zhǔn)備工作,提前開展實驗,充分發(fā)揮了學(xué)生的探究能力、動手組織能力和團隊協(xié)作能力。
學(xué)生以前在學(xué)習(xí)“胡蘿卜素的提取”時,很難理解性記憶實驗流程及相關(guān)操作的目的,有的學(xué)生甚至只能死記硬背。本節(jié)課通過播放、講解2個視頻錄像片段《胡蘿卜素提取的錯誤操作》、《胡蘿卜素提取的正確操作》,將課題中的關(guān)鍵性環(huán)節(jié)、畫面真實地帶到課堂,課上學(xué)生積極參與到實驗中,表現(xiàn)出高度的實驗熱情,有效地化解了實驗過程繁瑣的矛盾,極大提高了課堂教學(xué)的有效性,在發(fā)展和提高學(xué)生科學(xué)探究能力的同時,真正理解了知識的內(nèi)涵。例如:紙層析法結(jié)果(圖2)的解釋,只有通過實驗,才能更好理解紙層析裝置中濾紙筒的豎直邊緣為什么不能接觸。
本課題探究過程中,使用了一種特殊儀器“旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀”(圖3),通過控制實驗條件,用一種儀器既進行了萃取實驗,也能用真空泵使燒瓶內(nèi)處于負(fù)壓狀態(tài),完成萃取液濃縮過程,簡化了實驗的具體操作過程,促進了學(xué)生對“萃取法”實驗流程的理解和掌握。
圖3 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀