胡 恩 陳清容

（福建中醫(yī)藥大學第五臨床醫(yī)學院三明市第二醫(yī)院，福建 永安 366000）

毛冬青為冬青科冬青屬毛冬青（Ilex pubescens Hook. et Arn.）的根，具有活血通脈、清熱解毒、消腫止痛的功效。有研究表明毛冬青中含有三萜類、黃酮類、酚類、鞣質等多種成分[1]。在工作中，發(fā)現一種毛冬青飲片（安徽***中藥飲片公司，批號：150901，標注產地為湖北）可疑為偽品（以下簡稱可疑毛冬青）。原因：毛冬青在中國植物志所記載的產地中并未包含湖北[2]。而該批產地直接標注為湖北。所以有充分的理由懷疑為偽劣毛冬青。鑒別如下。

1 性狀鑒別

筆者自采毛冬青根呈圓柱形，有的分枝，長短不一，直徑1～4 cm。表面灰褐色至棕褐色，根頭部具莖枝及莖殘基；外皮稍粗糙，有縱向細皺紋及橫向皮孔。質堅實，不易折斷，斷面皮部菲薄，木部發(fā)達，土黃色至灰白色，有致密的放射狀紋理及環(huán)紋。氣微，味苦、澀而后甜。為塊片狀，大小不等，厚0.1～1 cm。

可疑毛冬青從外觀上看和正品毛冬青有顯著差別，正品直徑一般不超過4 cm。而該可疑毛冬青飲片（圖1）一般在4～15 cm，有的超30 cm以上。偽品外皮粗，部分可見細小的髓部（來源于莖，而非來源于根）。正品味苦澀微回甘，而可疑偽品味微苦?？梢蓚纹返脑参飦碓床幌?。

三明地區(qū)自采毛冬青藥材（圖2）。經原植物（圖3）基原鑒定確定為毛冬青（Ilex pubescens Hook. et Arn.），切制成的飲片直徑大小大部分分布在1～4 cm。外皮灰褐色，切面灰白或類白。質堅硬，木質部發(fā)達。射線相對明顯。味苦澀微回甜（鮮品更加明顯）。

根椐中國植物志記載，毛冬青原植物在3～4 m高[2]（筆者在三明實地考察發(fā)現大部分在1～2 m高，3 m以上少見）。以此推斷，毛冬青根的直徑難以超過8 cm，廣東省中藥材標準2011版也把毛冬青飲片直徑定為1～8 cm。有學者研究認為毛冬青直徑為1～4 cm[3-4]更加符合筆者自采毛冬青飲片的實際情況。從大小上看，湖北產毛冬青飲片（圖1）直徑不少達10 cm以上，遠超作者自采的毛冬青飲片，也不符合2011版廣東省中藥材標準，為偽品。

2 理化鑒別

分別取1、2號供試品藥材粉末各1 g，加乙醇25 mL加熱回流1 h，濾過，取濾液2 mL，分別滴加三氯化鐵試液5滴，二者均顯藍黑色。

3 薄層色譜

分別取毛冬青1、2藥材粉末各1.5 g，加甲醇15 mL，超聲60 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 mL使溶解，加水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次15 mL，合并正丁醇提取液，蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。供試品曾采用乙酸乙酯振搖提取，所得的薄層色譜雜質較多，分離不清晰；后改用正丁醇振搖提取，所得的薄層色譜雜質較少，斑點清晰。取以上二種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（10∶4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與毛冬青對照藥材色譜相應的位置上顯相同的藍色熒光斑點。因無顯著的鑒別意義，所以薄層色譜的熒光顯示圖片也就不附加圖片。

圖1 安徽***中藥飲片公司所產的毛冬青（標注產地：湖北，批號：150901）

圖2 作者采自三明地區(qū)的毛冬青

圖3 毛冬青原植物

圖4 2號供試品作者采于三明地區(qū)的毛冬青

圖5 1號供試品安徽***中藥飲片公司，批號：150901，標注產地為湖北

4 高效液相色譜檢測

4.1 儀器：CPA324S電子天平（塞多利斯公司）、KQ5200DE型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、Agilent Technologies1260高效液相色譜儀,二極管陣列檢測器（1260DAD）（美國安捷倫科技公司）、SJ-1031A紫外分析儀（島津公司）。

4.2 供試藥材：①毛冬青飲片1號（安徽***中藥飲片公司，批號：150901標注產地為湖北）；②毛冬青飲片2號（作者采于三明地區(qū)的毛冬青，經原植物鑒定為毛冬青（Ilex pubescens Hook. et Arn.），取其根洗凈切片曬干）。甲醇、乙腈為色譜純，液相用水為超純水，其余試劑均為分析純。

4.3 色譜條件：色譜柱：Ultimate XB-C18（5 μm，4.6 mm×250 mm）；流動相：乙腈（A）—0.1%磷酸溶液（B），梯度洗脫（0～10 min，30% A；10～13 min；30% A→40% A；13～25 min，40%A；25～30 min，40% A→60% A；30～35 min，60% A；35～40 min，30% A）；檢測波長：210 nm；柱溫：35 ℃；進樣量：10 μL。

4.4 對照藥材溶液：精密稱取毛冬青2號藥材粉末0.5 g，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，超聲60 min，放冷，用甲醇補足重量，濾過，取續(xù)濾液。

4.5 供試藥材溶液：精密稱取毛冬青1號藥材粉末0.5 g，如上法制備供試液。

4.6 實驗條件優(yōu)化[5]

4.6.1 檢測波長的選擇：采用紫外-可見分光光度法，在190～400 nm范圍內分別對對照藥材（2號藥材）溶液、供試品（1號藥材）溶液進行掃描，1號藥材在209 nm，2號藥材在211 nm分別有最大吸收，所以選擇210 nm為檢測波長。

4.6.2 提取條件的選擇：本文考察了甲醇超聲提取與回流提取兩種方法，結果超聲與回流提取率接近，超聲簡便，所以選用超聲提??；又比較甲醇與乙醇兩種溶劑的提取率，發(fā)現，甲醇提取樣品中各組分含量高于乙醇提取，因此選擇甲醇超聲提取。

4.6.3 流動相的選擇：對不同流動相的組成比例進行考察，采用乙腈-1%冰醋酸（60∶40）為流動相時，色譜分離效果不好，后采用乙腈-0.1%磷酸溶液組成的流動相系統進行梯度洗脫，能獲得理想的色譜圖，因此采用此流動相。

4.7 測定：分別精密吸取對照藥材溶液、供試品溶液各10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，見圖4、5。

5 討 論

綜合以上實驗，化學反應顯示相同的顏色，說明二者均含酚類物質。薄層色譜中，兩種藥材所顯斑點的位置和顏色相同，也表明二者的相似程度很接近。液相色譜圖中1、2號藥材峰形接近，但二者在15～20 min的出峰情況完全不同，2號藥材有明顯的幾個峰，而1號藥材在該區(qū)間內無明顯可見的出峰。表明1、2號藥材之間有些成分還是有差別的。另外，結合藥材性狀分析，1號藥材的大小明顯超出了廣東省中藥材標準2011版中規(guī)定的毛冬青 “直徑1～8 cm”的標準，且在味道上有區(qū)別，所標注的產地湖北在中國植物志上也查無毛冬青的分布記錄，可見1號藥材（安徽***中藥飲片公司，批號：150901標注產地為湖北）為偽品。偽品的植物來源不祥，但從理化、薄層色譜、高效液相色譜圖的相似性來判斷應當來源于和毛冬青同科屬的某種植物。

目前毛冬青中藥材的標準相對較低。湖南省中藥材標準（2009年版）、上海市中藥材標準（1994年版）、廣西壯藥質量標準（第二卷）、北京市中藥材標準、中國藥典（1977年版第一部）都未對藥材的直徑作出規(guī)定。僅廣東中藥材標準（2011年版）有對毛冬青藥材的直徑作出規(guī)定“直徑1～8 cm”，但也規(guī)定得過于寬泛。實際中基本難以采到5厘米以上直徑的毛冬青。希望有關部門在制定毛冬青藥材標準時應當對其直徑加以規(guī)定，建議標準中直徑定為1～4 cm較為切合實際。廣大中藥師在驗收毛冬青藥材時對于直徑超過“5 cm”大小的藥材時應保持警惕。也希望中藥飲片廠在產地收購毛冬青原藥材加強對植物基源的鑒別以防止偽品進入流通領域。