陳春秀， 尚曉迪， 馬 超， 戴媛媛， 賈 磊， 白東清

(1.天津渤海水產(chǎn)研究所，天津 300457； 2.天津農(nóng)學院水產(chǎn)學院/天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室，天津 300384)

半滑舌鰨(Cynoglossussemilaevis)屬于鰈形目舌鰨科舌鰨屬，俗稱龍利、鰨米、牛舌頭，為我國近海常見的暖溫性大型底層魚類，主要分布于渤海、黃海水域[1]。半滑舌鰨生長速度快，肉質(zhì)細膩，味道鮮美，是一種經(jīng)濟價值很高且有一定養(yǎng)殖推廣前景的名貴海水魚類[2]。

硒是動物體必需的微量元素之一，具有抗氧化、提高免疫力、促生長和提高肉質(zhì)等功能[3]。硒在最佳濃度和致毒濃度之間的安全限度非常狹窄，因此開發(fā)低毒、高效的硒源一直是硒營養(yǎng)研究的重點。納米硒是一種利用納米技術(shù)制備而成的新型研制品，以蛋白質(zhì)為核、紅色元素硒為膜和以蛋白質(zhì)為分散劑的納米級別的無機單質(zhì)硒，粒徑一般在80 nm以內(nèi)[4]。它具有安全濃度寬、吸收效率高、生物活性強、環(huán)境污染小等優(yōu)點，在動物養(yǎng)殖生產(chǎn)中的使用前景十分廣闊。目前研究表明，在飼料中添加納米硒對尼羅羅非魚[5]、鯉魚[6]、草魚[7]、團頭魴[8]、異育銀鯽[9]、青鳉[10]和中華絨螯蟹[11]等具有促進生長、降低餌料系數(shù)、提高蛋白質(zhì)合成效率、提高硒在體內(nèi)的沉積率、增強免疫力等作用。納米硒在海水魚中應用還未見報道，基于此，本試驗在飼料中添加納米硒，探討其對促進半滑舌鰨生長、體成分組成和硒含量等方面的作用，以期探討出納米硒在半滑舌鰨飼料中適宜的添加量，為配制半滑舌鰨用預混料提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗飼料 飼料原料采購及加工均在天津市天祥水產(chǎn)有限責任公司進行。原料經(jīng)粉碎機粉碎后，過60目篩，混勻加水，用江蘇牧羊集團牧羊MUZLM V4型飼料制粒機加工成粒徑為2 mm的沉性顆粒飼料，室溫下于通風處晾干2 h，保存于-20 ℃冰箱中待用。

基礎飼料配方為魚粉60%、血漿蛋白4%、豆粕11%、魚油1.5%、豆油1.5%、淀粉13%、酵母3%、蝦粉2%、黏合劑1%、維生素預混料1%、礦物質(zhì)預混料2%。飼料常規(guī)成分含量為粗蛋白55.99%、粗脂肪7.32%、水分7.23%、粗灰分14.43%。

礦物質(zhì)預混料為Ca(H2PO4)·H2O 14 673.37 mg/kg、ZnSO4·7H2O 65.97 mg/kg、CuSO4·5H2O 10.61 mg/kg、FeSO4·7H2O 109.54 mg/kg、KI 32.7 mg/kg、CoCl2·6H2O 0.2 mg/kg、MnSO4·H2O 24.61 mg/kg。

維生素預混料為維生素A 2 400 IU/kg、維生素C 2 700 IU/kg、維生素D 6 600 IU/kg、維生素E 675 IU/kg、維生素B255 mg/kg、維生素B615 mg/kg、維生素B14 mg/kg、維生素K 3 mg/kg、葉酸25 mg/kg、DL-泛酸鈣60 mg/kg、煙酸 220 mg/kg、維生素B120.27 mg/kg、肌醇1 000 mg/kg、生物素 13.5 mg/kg、膽堿10 g/kg。

納米硒由廣州博士奧集團提供，純度為0.5%。在基礎飼料中分別添加0、0.4、0.8、1.6、2.0、2.4 mg/kg的納米硒，從而配制出6種試驗飼料(基礎飼料組不添加納米硒)。試驗飼料中硒的總含量分別為1.38、1.67、2.09、3.56、4.23、4.62 mg/kg。

1.1.2 試驗魚 360尾半滑舌鰨購自天津市海發(fā)珍品實業(yè)發(fā)展有限公司，體質(zhì)健壯，規(guī)格整齊，平均體質(zhì)量為(120.45±0.45) g。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗魚分組及管理 將試驗魚隨機分為6組，每組3個重復，每個重復20尾。用基礎飼料馴飼5 d，待試驗魚能較好地攝食后，正式進行試驗。飼養(yǎng)于天津渤海水產(chǎn)研究所品字形控溫可循環(huán)系統(tǒng)中，試驗期間水溫為(20±0.5) ℃，鹽度2%，溶解氧含量大于8.00 mg/L，亞硝酸鹽含量小于 0.05 mg/L，氨氮含量小于0.10 mg/L。每日投喂2次(09：30、15：30)，投飼率1%左右。每天觀察試驗魚狀況，記錄死魚數(shù)目與攝食情況，依據(jù)攝食情況及時調(diào)節(jié)飼料投喂量。試驗周期為60 d。

1.2.2 樣品采集 連續(xù)喂食60 d后，將試驗魚饑餓24 h后稱質(zhì)量取樣，每箱隨機取10尾魚，MS-222麻醉后測量體長、體質(zhì)量。冰盤上解剖取其肝胰臟、背肌，其中3尾用于測定全魚營養(yǎng)成分，-80 ℃保存。

1.2.3 生長指標的測定 測量體長、體質(zhì)量，用于測定和計算增質(zhì)量率、特定生長率、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率、肥滿度、肝體比。

增質(zhì)量率(WGR，%)=(平均終末體質(zhì)量-平均初始體質(zhì)量)/平均初始體質(zhì)量×100%；

特定生長率(SGR，%/d)=100×(ln終末均質(zhì)量-ln初始均質(zhì)量)/養(yǎng)殖周期；

飼料系數(shù)(FCR)=攝取的飼料總質(zhì)量/(終末總體質(zhì)量+死亡魚總質(zhì)量-初始魚總體質(zhì)量)；

蛋白質(zhì)效率(PER)=(終末魚總體質(zhì)量-初始魚總體質(zhì)量)/總投飼量×飼料蛋白質(zhì)含量；

肝體比(HSI，%)=肝臟質(zhì)量/體質(zhì)量×100%；

肥滿度(CF，%)=體質(zhì)量/體長3×100%。

1.2.4 試驗魚、飼料常規(guī)成分測定 水分用105 ℃常壓恒溫烘干法(GB/T 5009.3—2010)測定，粗蛋白質(zhì)含量測定采用凱氏定氮法(GB/T 5009.5—2010)，粗脂肪含量測定采用索氏抽提法(GB/T 5009.6—2010)，粗灰分用550 ℃高溫灼燒法(GB/T 5009.4—2010)測定。

1.2.5 硒含量的測定 使用Agilent 7700x ICP-MS電感耦合等離子體質(zhì)譜儀測定飼料、肝胰臟、肌肉和全魚中的硒含量。

2 結(jié)果

2.1 納米硒對半滑舌鰨幼魚生長性能、形體指標及飼料利用的影響及納米硒的需要量

2.1.1 納米硒對半滑舌鰨幼魚生長性能、形體指標及飼料利用的影響 由表1可知，隨著飼料中納米硒含量的增加，半滑舌鰨幼魚末均體質(zhì)量、增質(zhì)量率和特定生長率均呈現(xiàn)先上升后下降再上升的變化趨勢，且均顯著高于對照組(P<0.05)，其中以0.8 mg/kg組最高，顯著高于其他納米硒添加組。當飼料中納米硒含量從0.4 mg/kg增加至2.4 mg/kg時，半滑舌鰨幼魚的飼料系數(shù)先下降后升高，0.8 mg/kg和1.6 mg/kg組飼料系數(shù)顯著低于對照組，其中最小值出現(xiàn)在0.8 mg/kg組。蛋白質(zhì)效率也隨著納米硒添加量的增加呈現(xiàn)先升高后下降再升高的變化趨勢，其中0.8 mg/kg和1.6 mg/kg組蛋白質(zhì)效率顯著高于對照組，最高值出現(xiàn)在0.8 mg/kg組，其余各組之間變化不大(P>0.05)。各組的肝體比和肥滿度無顯著差異?？梢?，從提高生長性能和飼料利用率方面來看，0.8 mg/kg 納米硒水平(總硒量為2.09 mg/kg)效果最好，1.6 mg/kg 納米硒水平(總硒量為3.56 mg/kg)次之。

2.1.2 納米硒的需要量 將飼料中納米硒添加量設為自變量(x)，每組增質(zhì)量率設為因變量(y)，進行折線回歸性分析(圖1)。增質(zhì)量率達到最佳值時，納米硒的最適添加量為 1.82 mg/kg。

2.2 納米硒對半滑舌鰨幼魚體組成的影響

由表2可知，各組半滑舌鰨幼魚全魚水分含量在77.97%～78.63%之間，粗蛋白質(zhì)占鮮樣的百分比在 15.96%～16.55%之間，粗脂肪占鮮樣的百分比在2.02%～2.25%之間，灰分占鮮樣的百分比在2.62%～2.76%之間，其中0.8 mg/kg組粗蛋白質(zhì)含量最高，2.4 mg/kg組粗脂肪含量最低，但各組之間體成分差異不明顯。

表1 納米硒對半滑舌鰨幼魚生長性能、形體指標及飼料利用的影響

注：同列數(shù)據(jù)后標有不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下同。

2.3 納米硒對半滑舌鰨幼魚肝胰臟、肌肉和全魚中硒含量的影響

由表3可知，半滑舌鰨肝胰臟、肌肉和全魚中的硒含量隨飼料中納米硒含量的增加呈上升趨勢，且最大值均出現(xiàn)在 2.4 mg/kg 組。納米硒添加量超過1.6 mg/kg后，半滑舌鰨肝胰臟中硒含量顯著高于對照組。納米硒添加量趨于2.0 mg/kg后，肌肉中硒含量顯著高于對照組。全魚中硒含量隨納米硒添加量增大而增大，納米硒含量超過1.6 mg/kg后全魚硒含量顯著高于對照組。硒在魚體各部位的沉積順序為全魚>肝臟>肌肉?？梢姡瑥捏w內(nèi)硒沉積的角度分析，飼料中納米硒添加量為2.0 mg/kg(飼料中總硒量為4.23 mg/kg)時效果最為明顯。

表2 納米硒對半滑舌鰨幼魚體組成的影響

表3 納米硒對半滑舌鰨幼魚肝胰臟、肌肉和全魚中硒含量的影響

3 討論

3.1 納米硒對半滑舌鰨幼魚生長性能、形體指標及飼料利用的影響

硒作為水產(chǎn)動物必需的微量元素之一，可以提高血漿中三碘甲腺原氨酸的水平，促進生長激素合成與分泌，從而加快動物的生長和蛋白質(zhì)合成[12]；還可以提高消化酶活性，提高食物的消化吸收率，從而促進生長[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加不同水平的納米硒投喂半滑舌鰨幼魚，對促進魚體的末均體質(zhì)量、增質(zhì)量率、特定增長率、降低飼料系數(shù)及提高蛋白質(zhì)效率均有一定的功效。其中，0.8 mg/kg納米硒組對半滑舌鰨幼魚生長性能和飼料利用率效果最佳。但添加不同水平的納米硒對肝體比和肥滿度無顯著影響。鄧岳松等研究發(fā)現(xiàn)，當飼料中硒含量為0.3 mg/kg時，亞硒酸鈉和蛋氨酸硒對尼羅羅非魚生長無促進效果，而納米硒可極顯著地促進尼羅羅非魚的生長[5]。黃小紅等發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加納米硒，提高了試驗組草魚末均質(zhì)量、增質(zhì)量率、肥滿度、特定生長率以及成活率，降低了餌料系數(shù)[7]。Ashouri等研究發(fā)現(xiàn)，在鯉魚日糧中添加1 mg/kg納米硒能顯著提高鯉魚的生長性能，包括最終體質(zhì)量和增質(zhì)量(WG)[6]。侍苗苗等研究發(fā)現(xiàn)，在中華絨螯蟹飼料中添加0.2 mg/kg納米硒時，特定生長率、存活率顯著增加，餌料系數(shù)達到最低，而且0.2 mg/kg納米硒組與1.0 mg/kg酵母硒組的養(yǎng)殖效果相近[11]。蘇傳福等研究發(fā)現(xiàn)，日糧硒含量對草魚的形體指標和肥滿度無顯著影響，說明硒對草魚魚體豐滿程度不產(chǎn)生影響[14]。本研究結(jié)果與這些研究結(jié)果相一致，說明在飼料中添加納米硒對水產(chǎn)動物的生長和維持正常生理功能是必要的。

3.2 納米硒對半滑舌鰨幼魚體組成的影響

魚類的營養(yǎng)價值主要取決于其肌肉中的蛋白質(zhì)和脂肪含量等[15]。本試驗發(fā)現(xiàn)，在基礎飼料中添加納米硒對全魚水分、粗蛋白質(zhì)含量、粗脂肪含量和灰分含量雖無顯著影響，但0.8 mg/kg組粗蛋白含量最高，2.4 mg/kg組粗脂肪含量達到最小值，一定程度上反映出硒可以提高蛋白質(zhì)合成，減少體脂沉積。蘇傳福等發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加0.66 mg/kg硒能顯著提高草魚蛋白含量，降低其脂肪含量，對草魚營養(yǎng)成分有優(yōu)化作用[14]。侍苗苗等研究發(fā)現(xiàn)，和不加納米硒的對照組相比，添加0.2 mg/kg納米硒組能顯著提高中華絨螯蟹的粗蛋白含量[11]。儲霞玲發(fā)現(xiàn)，在南美白對蝦飼料中添加適量硒能顯著提高對蝦的體蛋白含量，但對體脂含量影響不顯著[16]。龍萌等也發(fā)現(xiàn)，酵母硒和茶多酚均能夠通過提高粗蛋白含量改善團頭魴肌肉營養(yǎng)品質(zhì)[17]。本試驗結(jié)果與這些研究結(jié)果存在一定差異，這可能與試驗魚種類和規(guī)格、硒添加方式和水平、養(yǎng)殖環(huán)境不同有關(guān)，具體機制有待進一步研究。

3.3 納米硒對半滑舌鰨幼魚肝臟、肌肉和全魚中硒含量的影響

納米硒具有獨特的性能，它與動物機體細胞膜具有更高效的相互作用界面，使黏膜通透性增加，促進動物吸收[18]。半滑舌鰨幼魚組織的硒含量隨納米硒添加水平的升高而增加，當納米硒添加量達到1.6～2.4 mg/kg時，組織中硒含量提高趨于平緩。說明當硒達到一定濃度時，半滑舌鰨幼魚對硒的沉積率減弱。本試驗同時還發(fā)現(xiàn)，半滑舌鰨幼魚肌肉硒含量明顯低于全魚和肝胰臟硒含量，組織中肝胰臟硒含量最高，說明半滑舌鰨幼魚硒的主要蓄積部位在肝胰臟。Liu等研究發(fā)現(xiàn)，軍曹魚的脊椎骨和全魚硒含量隨著飼料硒添加量的增加而逐漸升高，當飼料硒水平分別達到0.793、0.811 mg/kg 時趨于穩(wěn)定[19]，本研究結(jié)果可以與Liu等的研究結(jié)果相互印證。Lin等發(fā)現(xiàn)，點帶石斑魚全魚硒含量隨飼料硒添加量的增加而逐漸升高，且當飼料硒含量為4 mg/kg時，肝臟中硒含量最高[20]。在其他魚類的研究中也發(fā)現(xiàn)了這種現(xiàn)象。Elia等對鯉魚的研究發(fā)現(xiàn)，在投喂硒含量為0.25、1 mg/kg 的飼料 60 d 后，硒含量為1 mg/kg的飼料對應鯉腎臟中有最高的硒累積量[21]。在腎臟、肝臟和肌肉這3個組織中累積硒的能力依次為腎臟>肝臟>肌肉。

4 結(jié)論

綜上所述，在半滑舌鰨幼魚飼料中納米硒最適宜添加量為1.6 mg/kg(總硒含量為3.56 mg/kg)。飼料中添加納米硒能夠促進半滑舌鰨幼魚生長，提高增質(zhì)量率、特定生長率和蛋白質(zhì)效率，降低餌料系數(shù)，加快蛋白質(zhì)合成效率。并且作為富硒產(chǎn)品，半滑舌鰨能夠為人體有效地補充硒和蛋白質(zhì)，促進人體生長發(fā)育。