云南省醫(yī)療器械檢驗研究院 云南昆明 650000

在體外診斷試劑的使用當中，試劑的穩(wěn)定性是非常重要的，也是試劑能夠投入使用的重要衡量標準。在醫(yī)學試劑穩(wěn)定性測試研究當中，有關于體外診斷試劑的實驗測試是比較少的，研究成果屈指可數(shù)。在進行體外診斷試劑穩(wěn)定性測試時可以借鑒的資料也比較少，加強對體外診斷試劑穩(wěn)定性測試的研究，對提高體外診斷試劑穩(wěn)定性判別有重要的作用，因而需要對體外診斷試劑穩(wěn)定性測試的要點進行重點分析。

1 一般資料

1.1 穩(wěn)定性測試試劑的選擇

根據(jù)體外診斷試劑的主要特點和穩(wěn)定性測試研究項目的要求，穩(wěn)定性測試試劑的選擇要保證穩(wěn)定性測試能夠有序的操作，穩(wěn)定性指標的測量數(shù)據(jù)變化明顯。簡單的來說就是要根據(jù)穩(wěn)定性測試的內容，來決定選用同一批次還是不同批次的體外診斷試劑。根據(jù)《新生物制品審評辦法》當中的規(guī)定，設立三組成品穩(wěn)定性研究測試，（1）長期穩(wěn)定性研究，選用連續(xù)3個批次的體外診斷試劑。（2）使用期間穩(wěn)定性研究，采用同一批次產品。（3）模擬運輸穩(wěn)定性研究，使用同一批次試劑[1]。

1.2 體外診斷試劑穩(wěn)定性測試的主要內容

（1）度量指標。度量指標就是指通過對試劑的某一特性或含量值的測量，就可以直接得出試劑穩(wěn)定性效果，對度量指標的測試是在試劑規(guī)定的使用期限內進行的。不同的試劑擁有的特性都是有差異的，因而只要掌握每種試劑的主要特征，就可以通過測量其中一項指標明確試劑的穩(wěn)定性是否良好。對于體外診斷試劑，度量指標是測量漂移。

（2）置信度。對醫(yī)學試劑的置信度進行測量，可以對試劑在儲存或使用期間的變化進行掌握，從而對試劑的穩(wěn)定性進行判定。對于體外診斷試劑穩(wěn)定性測試，一般是選用95%以上的置信區(qū)間進行測量，置信區(qū)間的百分比選擇要根據(jù)測試的具體情況而設定，95%是最低百分比值，先要提高測量的精準度，可以適量提高測量置信區(qū)間的百分比，如97%或99%都可以[2]。

（3）可接受標準。可接受標準是借鑒與測試試劑有相同之處的試劑穩(wěn)定性測試的數(shù)據(jù)，還有測量試劑所標注的一些信息。通過對這些信息的分析，可以對試劑的基本性能有大概的了解，在結合其它的測試數(shù)據(jù)，綜合分析就可以得出試劑穩(wěn)定性測試的結果。

（4）穩(wěn)定性研究的種類。

第一種是保存期穩(wěn)定性的研究，是對體外診斷試劑在儲存階段的一些表征進行測量，體外診斷試劑的儲存是有相應的規(guī)定的，在這種特定的保存條件下，通過穩(wěn)定性的測試可以明確測量試劑能夠保存的最長期限。

第二種是使用期穩(wěn)定性研究，就是對體外診斷試劑已經投入使用后，試劑活性能夠保持期限的研究，在進行使用期穩(wěn)定性研究時，可以對同一生產批次，同一型號的試劑進行統(tǒng)一的測試，它們的使用期穩(wěn)定性都是相對保持一致的。

第三種是運輸模擬研究，體外診斷試劑在進行運輸?shù)倪^程中會受到運輸方式和運輸環(huán)境等因素的影響，這些因素影響的作用下，就有可能會引起試劑的變化，因而運輸模擬研究方式就是對體外診斷試劑的常用的運輸形式進行模擬[3]。對運輸過程中試劑產生的變化進行觀察和分析，根據(jù)研究結果可以對體外診斷試劑的運輸方式進行優(yōu)化。

2 方法

2.1 體外診斷試劑穩(wěn)定性測試研究設計

本文采用的是穩(wěn)定性測試研究的經典設計類型，并且使用度量指標：測量漂移作為穩(wěn)定性性能測試指標。首先，要將要測試的體外診斷試劑樣品先放在特定的測試保存環(huán)境當中，然后在依次進行各組的實驗，得到穩(wěn)定性測試的結果。經典設計可以在穩(wěn)定性測試期間的任意時間節(jié)點，將待測的體外診斷試劑拿出，進行測試時都可以得到準確的數(shù)據(jù)結果，在待測期間體外診斷試劑不會受到外界因素的影響，但是在進行測試實驗的過程中容易受到一些因素的影響，包括儀器、環(huán)境等。

在設計階段要將穩(wěn)定性測試需要的三組產品按照批次進行分類保存，要求每一批次的體外診斷試劑都要多準備10%-20%的量，作為實驗測試的備用[4]。然后對測試設備進行準備，檢查各個設備操作、運行狀態(tài)是否正常，保證測量精準度。同時實驗操作者要研讀體外診斷試劑指導原則，保證穩(wěn)定性測試操作的規(guī)范性。最后，根據(jù)實驗的情況，提前將數(shù)據(jù)收集方法確定，并做好對失控數(shù)據(jù)處理的準備。

2.2 體外診斷試劑穩(wěn)定性測試操作

首先，將三組穩(wěn)定性測試項目進行分別儲存，在一天中從三組實驗產品當中，隨機挑選幾個產品，對每組實驗樣品當中的被測量漂移進行測量，將測量數(shù)據(jù)進行記錄，根據(jù)實驗設計每隔一段時間進行重復測量，并將數(shù)據(jù)進行記錄。其次，每天都要采取隨機的形式更換產品測試，再進行被測量漂移的數(shù)據(jù)測量和記錄。

最后，實驗結束后將實驗期間每天的數(shù)據(jù)測量結果進行對比，要求將三組進行分別的對比，將每組的測試數(shù)據(jù)進行整理，將對比或存在異常的數(shù)據(jù)進行標注。另外，經典設計方式在測量期間產品測量值可能會受到外界因素的影響，在試驗期間對影響因素進行控制，如果產品受到影響要明確其影響原因，然后針對其原因進行調整，重新選擇產品進行測量，作為當天的被測量漂移變化數(shù)據(jù)。

3 評價指標

3.1 數(shù)據(jù)分析

繪制一個以觀察的分析物平均值（Y軸）對時間（X軸）的線性回歸方程。大多數(shù)產品在他們的保存期只有輕微的降解（≤10），因此經常采用線性模型，如果圖形接近非線性，考慮使用轉換公式或非線性模型[5]。

3.2 統(tǒng)計學方法

如果回歸圖的斜率在統(tǒng)計學上無顯著性（P≥0.05），樣本的穩(wěn)定區(qū)間測試時間點的最大值。如果回歸圖的斜率在統(tǒng)計學上有顯著性（P＜0.05），通過測量樣本被測量漂移得出的穩(wěn)定區(qū)間可認為是可接受標準和線性回歸一側與置信區(qū)間相交的區(qū)間，這可以由統(tǒng)計軟件生成置信區(qū)間的線性回歸圖確定。第二種方法是，置信區(qū)間值以由研究期間內的相應的時間點的值估計出的值計算出，然后繪圖，得出與可接受標準相交的區(qū)間。

4 結果

針對第一組長期穩(wěn)定性研究，選用連續(xù)3個批次的體外診斷試劑，穩(wěn)定性測試研究時間為400天，本實驗每日重復觀測數(shù)據(jù)的次數(shù)為5次，對每天提取的不同產品的數(shù)據(jù)，利用統(tǒng)計學方式進行計算，所有樣本以分析結果平均值(Y軸)對測試日期(X軸)做標準線性回歸分析，觀察t統(tǒng)計的斜率可以看出，測試產品在特定環(huán)境當中儲存階段，相對穩(wěn)定的區(qū)間保持的時間為400天，因而實驗選擇該批次試劑的長期儲存保質期在400天之內[6]。

針對第二組使用期間穩(wěn)定性研究，采用同一批次產品穩(wěn)定性研究的時間為400天，將同一批次的產品進行使用，對使用期間的產品變化數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，由回歸擬合的統(tǒng)計量確定（斜率，Y截距）為：（允許漂移上限-Y截距）/斜率=穩(wěn)定性估計值[7]將數(shù)據(jù)套用在上述公式當中，得到的數(shù)據(jù)結果為450天，第二組研究的目的是確定體外診斷試劑在投入使用時的穩(wěn)定性區(qū)間，在計算的過程中，沒有對置信區(qū)間進行計算。

針對第三組模擬運輸穩(wěn)定性研究，使用同一批次試劑，使模擬不同運輸方式來觀察產品穩(wěn)定性變化，對各種運輸方式情況進行分析，發(fā)現(xiàn)影響產品穩(wěn)定性的因素主要有溫度、濕度、光照強度和震動強度等，在進行運輸時將這些影響因素進行控制，可以延長體外診斷試劑的穩(wěn)定性。

5 討論

體外診斷試劑的穩(wěn)定性性能與體外診斷試劑的質量是成正比的，穩(wěn)定性越高，質量越好，在進行醫(yī)療使用時，才能得出更加準確的診斷結果。體外診斷試劑穩(wěn)定性的變化就會導致體外診斷試劑的質量變化，例如血型反定型用紅細胞，由于穩(wěn)定性不僅影響紅細胞表面抗原的抗原性，而且可能影響其抗原表型[8]。

對體外診斷試劑的儲存階段、使用階段、運輸階段進行科學的穩(wěn)定性測試，可以及時掌握體外診斷試劑的穩(wěn)定性能和影響因素，提前做好應對措施，保證體外診斷試劑使用的效果和質量。但是，目前有關于體外診斷試劑穩(wěn)定性測試的研究，不光是可參考的資料比較少，在進行試驗的過程中也是存在很多問題的，包括研究內容的不完整、研究項目和指標設置不符合研究需要、研究的時間過短、研究結果表述不清晰等。

通過本文對體外診斷試劑的穩(wěn)定性測試的論述，可以發(fā)現(xiàn)如果按照相關的規(guī)范進行產品的儲存，產品的穩(wěn)定性是比較好的，在產品使用期間如果使用置信區(qū)間，就可以得到更加保守的穩(wěn)定性評估區(qū)間。而針對體外診斷試劑的運輸穩(wěn)定性來說，只要合理的控制影響穩(wěn)定性的因素，就能避免運輸期間產品穩(wěn)定性下降。