□ 張艷艷 黃玉舟 李 麗 韋 石 趙國帥 湯宏厚 考志強(qiáng) 遼寧通正檢測有限公司
一般情況下,提取出來的花色苷往往有很多的雜質(zhì),比如有機(jī)酸、糖,等等。為了提高花色苷的色價(jià)和穩(wěn)定性,就要求進(jìn)一步對(duì)其進(jìn)行純化。目前,關(guān)于花色苷應(yīng)用最多的純化方法主要可以分為以下幾大類。
目前,柱層析法是用來純化花色苷的最廣泛的一種方法,而其又因固定相的不同,又分為凝膠柱層析、硅膠層析、離子交換樹脂層析、聚酰胺層析以及大孔樹脂層析方法。其中,大孔吸附樹脂方法是近年來發(fā)展起來的一種方法,它是一類有機(jī)高聚物吸附劑,它的基本原理是利用大孔吸附樹脂從極稀水溶液中吸附微量的親水性酚類衍生物,再經(jīng)洗脫回收,除掉雜質(zhì),從而達(dá)到純化的目的。不同種類的大孔吸附樹脂的吸附能力也各不相同。
2008年,李穎暢[1]等人采用溶劑法和酶法研究了藍(lán)莓花色苷的提取工藝,研究AB-8型大孔樹脂對(duì)花色苷靜態(tài)和動(dòng)態(tài)純化條件,并采用聚酰胺和硅膠柱層析對(duì)花色苷進(jìn)一步純化,用硅膠薄層色譜對(duì)花色苷的組分成分進(jìn)行分離。結(jié)果表明:經(jīng)大孔樹脂純化后的藍(lán)莓花色苷為紫黑色粉末,再經(jīng)硅膠、聚酰胺柱層析,其色價(jià)分別為79.20和85.30。以硅膠G作為層析介質(zhì),通過用不同的展開劑分離藍(lán)莓花色苷,分離效果比較好的是正丁醇-乙酸-水(4∶1∶5)和水-乙醇-正丁醇-乙酸乙酯(12∶8∶24∶36)為展開劑。
2013年,Buran[2]等人采用大孔吸附樹脂對(duì)藍(lán)莓花色苷進(jìn)行了分離純化,并對(duì)大孔吸附樹脂進(jìn)行了篩選。結(jié)果表明:FPX66型樹脂的吸附能力和解析能力最高,XAD761型樹脂和XAD1180型樹脂的解析能力最低[3]。
高效逆流色譜法是一種沒有載體的液-液分配色譜,在分離株體內(nèi)不加入任何的固態(tài)載體或支持體,因而完全排除了載體對(duì)分離過程的影響,是目前應(yīng)用最為廣泛的一種方法。
2011年,陸英[4]等人采用高效逆流色譜法對(duì)紫甘藍(lán)進(jìn)行了分離純化,分離得到兩種花色苷,純度分別達(dá)到98.5%和96.7%。2012年,易建華[5]等人采用高效逆流色譜法對(duì)藍(lán)莓花色苷進(jìn)行了分離純化。結(jié)果表明:應(yīng)用高效逆流色譜法得到的高純度的紫甘藍(lán)花色苷。2014年,劉雪輝[6]等人采用高效逆流色譜法從玫瑰茄中分離純化得到5.3 mg純度為96.2%的花色苷。2014年,國內(nèi)學(xué)者占穎[7]等人對(duì)近年來高效逆流色譜對(duì)黃酮類成分的分離與純化的應(yīng)用研究進(jìn)行了歸納和總結(jié),其中包括高效逆流色譜技術(shù)分離和純化已知和未知的天然黃酮類成分。
目前,隨著科學(xué)的不斷發(fā)展進(jìn)步,關(guān)于花色苷的提取、純化及鑒定方法也在不斷地走向成熟。一些高新技術(shù)的發(fā)明也使花色苷的研究變得更加深入。本文對(duì)近些年花色苷的相關(guān)研究進(jìn)行了分析和總結(jié),從花色苷的提取、純化到花色苷的鑒定所用的方法都進(jìn)行了詳細(xì)的論述,希望能夠?yàn)橐院蟮目蒲泄ぷ髡咛峁┮恍├碚撘罁?jù)。當(dāng)然,現(xiàn)有的技術(shù)方法中也存在著一些不足,這將推動(dòng)科研工作者去進(jìn)一步研究、開發(fā),從而能夠發(fā)明更多的高新技術(shù),使花色苷等天然的、無毒害的自然色素能夠更好地應(yīng)用到食品和醫(yī)療的方方面面,從而能夠更好地為人們所用。