□ 王善鈺 山東理工大學(xué)農(nóng)業(yè)工程與食品科學(xué)學(xué)院
當(dāng)前在我國的食品生產(chǎn)及加工行業(yè)并沒有專門的針對姜黃素的測定標(biāo)準(zhǔn),相應(yīng)的測定方法和樣品提取步驟也沒有具體的規(guī)定,但是目前公認(rèn)高效液相色譜法是比較科學(xué)和準(zhǔn)確的測定方法,通過專業(yè)的成分分析,能夠更好的監(jiān)督姜黃素這種食品添加劑的使用,并為今后完善姜黃素的測定和制訂檢測標(biāo)準(zhǔn)奠定了技術(shù)基礎(chǔ)[1]。本文主要從高效液相色譜法的檢測運(yùn)用原理入手,對具體的檢測步驟和注意事項進(jìn)行分析。
姜黃素主要就是指從姜科植物中提取而來的一種天然色素,主要來源于姜類植物的根莖,在性質(zhì)上屬于一種酸性多酚物質(zhì),姜黃素有著比較重要的醫(yī)學(xué)用途,在食品生產(chǎn)加工領(lǐng)域主要是用于肉類、腸類、糖果、糕點(diǎn)、果凍以及飲品中,用以食品的著色,使用量必須要符合相應(yīng)的生產(chǎn)添加標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)規(guī)定,在糖果、飲品等食品中的含量不超過0.01 g/kg,在肉類食品中的含量不超過0.15 g/kg。
高效液相色譜法還可以稱為高壓液相色譜法或者高速、高分離液相色譜檢測法。該方法隸屬于色譜檢測法,主要是以液體作為檢測相,再利用高壓系統(tǒng)結(jié)合相應(yīng)的溶劑導(dǎo)入裝有固定相的色譜柱中,在色譜柱中實(shí)現(xiàn)各種成分的分離,之后再利用高壓液相儀對樣本進(jìn)行分析和檢測,之后根據(jù)色譜圖可以直觀的了解到某種成分的濃度及含量[2]。
運(yùn)用高效液相色譜法能夠更加快速、簡便的對食品中的姜黃素進(jìn)行提取以及濃度測定。在對一些藥物中的姜黃素進(jìn)行檢測時,一般只需要利用相應(yīng)的溶劑進(jìn)行藥物溶解就可以直接進(jìn)行觀察,但是在食品中,由于食品中的成分以及添加劑種類和含量都比較多,尤其是在固態(tài)食品中,無法使用過濾提取的方式進(jìn)行測定,而是需要經(jīng)過凈化、濃縮等步驟來獲得檢測樣本,這就需要利用到高效液相色譜法來進(jìn)行具體的操作[3]。
在利用高效液相色譜法進(jìn)行食品中的姜黃素測定時,第一步就是要實(shí)現(xiàn)樣本的提取,首先要準(zhǔn)備分散器、高效液相儀、蒸發(fā)儀等設(shè)備,同時將準(zhǔn)備甲醇、氨水、乙醇以及聚酰胺等化學(xué)試劑。具體的操作步驟如下:將食品如糕點(diǎn)、糖果等攪碎并進(jìn)行攪拌,之后選取1 g樣本置于離心管中,加入氨水、乙醇試劑,比例保持在1∶3的閾值內(nèi),之后利用分散器這一設(shè)備進(jìn)行高速離散,向分離出的上清液中加入相同比例的氨水和乙醇進(jìn)行二次提取,最后就可以用聚酰胺對上清液中的姜黃素進(jìn)行吸附。將吸附有姜黃素的聚酰胺進(jìn)行洗滌,加入適量的乙醇溶液和甲醇,之后將其導(dǎo)入到混合器中,利用高效液相儀進(jìn)行相應(yīng)的色譜檢測[4]。
利用高效液相儀進(jìn)行檢測的過程中,要對流動相和固定相進(jìn)行確定,流動相一般是甲醇和乙酸銨溶劑,將流速維持在0.25 mL/min,色譜的溫度要維持在30 ℃,在此條件下進(jìn)行色譜分析,并繪制相應(yīng)的檢測色譜圖和含量曲線,對食品中的姜黃素含量進(jìn)行計算。
用高效液相色譜法進(jìn)行姜黃素的測定,不僅要對姜黃素的測定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行觀察,還要針對實(shí)驗的具體情況對姜黃素的回收率、高效液相色譜法的檢測精密度、最佳的檢測波長等進(jìn)行總結(jié)和分析。根據(jù)多次實(shí)驗可知,將波長控制在200~800 nm能夠最為靈敏的檢測出食品中的姜黃素含量,同時在這一波長下,聚酰胺吸附姜黃素的回收率能夠達(dá)到85%~90%,相應(yīng)的濃度曲線也更為標(biāo)準(zhǔn),能夠得到一個較為合理的線性回歸方程,使得食品中姜黃素的檢測有定量計算的值域范圍,也提升了高效液相色譜儀的精密度。
綜上所述,利用高效液相色譜法對食品中的姜黃素進(jìn)行測定,能夠在樣品提取以及濃縮分離上簡化操作,同時對于得出的檢測結(jié)果也能利用線性方程進(jìn)行準(zhǔn)確的計算,能夠真正實(shí)現(xiàn)食品中姜黃素的定量分析,有助于食品檢驗檢疫部門進(jìn)行使用量的督查。