鴨呼腸孤病毒(Duck Reovirus,DRV)是呼腸孤病毒科正呼腸孤病毒屬的一員,基因組由10 個分節(jié)段的雙鏈RNA 構成;DRV 目前分為經(jīng)典型番鴨呼腸孤病毒(Classical muscovy duck reovirus,C-MDRV)和新型呼腸孤病毒(New duck reovirus,N-DRV)兩類。C-MDRV 病,又稱為番鴨肝白點病,俗稱“白點病”或“花肝病”,主要病變特征表現(xiàn)為肝臟和脾臟腫大、出血,并出現(xiàn)大量針尖大小的壞死點。N-DRV 病,又稱“鴨出血性壞死性肝炎”,以肝臟不規(guī)則出血、壞死,心肌出血、脾臟腫大斑塊狀壞死為主要特征的疫病。各種品種鴨(如番鴨、半番鴨、麻鴨、北京鴨等)均可發(fā)生。目前對C-MDRV和N-DRV 的分子致病機理還不清楚。禽(雞)呼腸孤病毒(Avian reovirus,ARV)病,即雞呼腸孤病毒病,又稱雞病毒性關節(jié)炎,感染雞主要表現(xiàn)為關節(jié)炎和腱鞘炎,也可引起呼吸道病、腸道病、矮小綜合征等。禽類呼腸孤病毒病是目前危害養(yǎng)禽業(yè)健康發(fā)展的一種重要的傳染病。
與ARV 和哺乳動物呼腸孤病毒(Mammalian reovirus,MRV)相似:DRV 的基因組也分為3 個群:L 組群(L1~3)、 M 組群(M1~3) 和 S 組群 (S1~4)基因,它們分別編碼 λ、μ 和 σ 組蛋白。盡管 DRV 和ARV 有很多相似性,但它們在抗原性、宿主特異性、致病機理、電泳類型和基因編碼蛋白的種類方面存在差異。例如DRV 外殼蛋白σC 是由S4 基因片段第二個開放閱讀框編碼(810 nt);而ARV 和MRV 是由S1 基因片段第三個開放閱讀框編碼(977 nt),并且DRV 與ARV 的σC 蛋白的相似性只有21 %。
近期, 《Pathogens》 發(fā)表了對 σA 蛋白表位的研究。σA 為呼腸孤的核衣殼蛋白,具有與dsRNA相結合的功能。σA 編碼基因組高度保守,例如,DRV 和ARVσA 基因同源性高達87 %~89 %。本研究以表達的DRVσA 為免疫原,免疫小鼠獲得抗σA 的5 株單克隆抗體;利用噬菌體展示和定點突變技術,鑒定兩個最小表位:56EAPYPG61 和341WVV/MAGLI/V347;其中第341 位的 V/M 和 347位的I/V 分別是可相互替換的必須氨基酸。斑點雜交技術、免疫熒光試驗技術和序列分析結果證明,EAPYPG 和 WVV/MAGLI/V 是 DRV 和 ARV 共有交叉表位。以表達的EAPYPG 和WVV/MAGLI/V 為包被抗原建立的ELISA 方法(Epitope-ELISA),DRV/ARV 感染的血清檢測結果為陽性,而SPF 鴨/ 雞陰性血清以及對其他禽類病原感染陽性血清檢測結果為陰性;該方法具有高度的特異性和敏感性。該表位Epitope-ELISA 技術可用于臨床DRV/ARV 感染的血清學監(jiān)測。總之,蛋白表位的研究不僅有助于對蛋白空間結構的解析,還為血清學診斷方法的建立提供技術支撐。