黃玉杰 天津市泰達(dá)醫(yī)院 （天津 300457）

內(nèi)容提要： 流式細(xì)胞術(shù)是借助于流式細(xì)胞儀對快速直線運(yùn)動(dòng)中的單列細(xì)胞以及生物顆粒進(jìn)行快速篩選或者定量分析的綜合性檢測技術(shù)。目前隨著流式細(xì)胞術(shù)發(fā)展的不斷成熟，其已經(jīng)在臨床醫(yī)學(xué)檢測中得到了廣泛應(yīng)用，比較典型的包括免疫學(xué)領(lǐng)域、微生物檢測領(lǐng)域、腫瘤疾病診斷領(lǐng)域以及血液疾病診斷領(lǐng)域等。流式細(xì)胞術(shù)的出現(xiàn)為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)提供了全新的醫(yī)學(xué)視角，因此近些年受到人們越來越多的關(guān)注，很多專家學(xué)者關(guān)于流式細(xì)胞術(shù)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)開展了大量的理論和實(shí)踐工作。本文將近些年關(guān)于流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

流式細(xì)胞術(shù)是近些年發(fā)展起來的一種新型醫(yī)學(xué)檢測技術(shù)，其綜合了細(xì)胞生物學(xué)、技術(shù)以及物理學(xué)技術(shù)等多種技術(shù)，是一種綜合性檢測技術(shù)[1-2]。其主要是在細(xì)胞快速流動(dòng)條件下對細(xì)胞或者細(xì)胞內(nèi)的生物粒子進(jìn)行檢測[3]。目前流式細(xì)胞術(shù)在生物細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)以及遺傳學(xué)中得到了廣泛應(yīng)用，其中在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用最為廣泛。

1.流式細(xì)胞術(shù)在免疫學(xué)中的應(yīng)用

在臨床檢測中將機(jī)體免疫系統(tǒng)是否處于正常工作狀態(tài)作為評(píng)價(jià)被檢測者是否患病的主要指標(biāo)之一[4]。隨著流式細(xì)胞術(shù)的不斷發(fā)展，其在機(jī)體免疫狀態(tài)檢測中的應(yīng)用越來越廣泛。采用流式細(xì)胞術(shù)可以對B細(xì)胞和T細(xì)胞進(jìn)行有效檢測。通常將B細(xì)胞以及T細(xì)胞作為評(píng)價(jià)機(jī)體免疫狀態(tài)的主要指標(biāo)，其中T細(xì)胞又可以進(jìn)一步細(xì)分為抑制性T細(xì)胞和輔助性T細(xì)胞，輔助性T細(xì)胞是T細(xì)胞中表面分化抗原簇標(biāo)記為CD4+的一種亞群，抑制性T細(xì)胞為CD8+[5]。此外，還可以通過對T細(xì)胞和B細(xì)胞的比例以及自然殺傷細(xì)胞等進(jìn)行測量來對機(jī)體的免疫狀態(tài)進(jìn)行監(jiān)測，并且將其作為臨床疾病診療的關(guān)鍵依據(jù)[6]。細(xì)胞免疫功能通常會(huì)受到機(jī)體生理以及病理狀態(tài)等多種因素的影響，因此在檢測中應(yīng)該結(jié)合臨床作出準(zhǔn)確判斷。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明細(xì)胞免疫參數(shù)異常與獲得性免疫缺陷疾病之間具有密切的關(guān)系，比如當(dāng)淋巴細(xì)胞CD4與CD8的比值下降，同時(shí)淋巴細(xì)胞CD4絕對值下降，表明患者很可能為獲得性免疫缺乏綜合征，但是也有其他疾病的可能，需要進(jìn)行進(jìn)一步的診斷；此外系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的淋巴水平與病情嚴(yán)重程度以及累積器官程度之間具有密切的關(guān)系，系統(tǒng)性紅斑狼瘡合并嚴(yán)重腎臟損害時(shí)CD4水平降低，而CD8水平會(huì)相應(yīng)升高[7]。

2.流式細(xì)胞術(shù)在微生物檢測中的應(yīng)用

微生物檢測在藥品以及食品領(lǐng)域具有重要的作用，人們對微生物檢測的關(guān)注程度越來越高。流式細(xì)胞術(shù)具有高效、靈敏的特點(diǎn)，同時(shí)可以開展多參數(shù)分析，因此在微生物檢測中得到了廣泛應(yīng)用。借助抗體熒光標(biāo)記技術(shù)，流式細(xì)胞術(shù)不僅可以對血清抗體、病原菌以及病毒等進(jìn)行檢測，還可以在抗生素敏感性試驗(yàn)中進(jìn)行應(yīng)用[8]。同時(shí)流式細(xì)胞術(shù)通過對細(xì)胞表面單克隆抗體進(jìn)行特異性識(shí)別，可以對受感染細(xì)胞進(jìn)行定量檢測[9]。除此之外，流式細(xì)胞術(shù)還可以對病毒、真菌、寄生蟲混合感染情況進(jìn)行有效檢測。在體外抗生素的藥物敏感性試驗(yàn)中，流式細(xì)胞術(shù)基于被熒光標(biāo)記的抗體在于病原體結(jié)合之后會(huì)產(chǎn)生不同強(qiáng)度的熒光，可以對病原體的活性以及功能進(jìn)行有效反映，進(jìn)而有效判斷病原體對抗生素的抗性[10]。

3.流式細(xì)胞術(shù)在腫瘤診斷中的應(yīng)用

通過精確測量DNA含量，流式細(xì)胞術(shù)可以對部分癌前病變的性質(zhì)以及發(fā)展趨勢進(jìn)行有效評(píng)價(jià)，有助于在腫瘤疾病診斷中對惡性腫瘤盡早診斷，進(jìn)而為患者后續(xù)的治療提供指導(dǎo)和依據(jù)[11]。通常情況下，DNA含量的異常增高提示很可能為惡性腫瘤疾病，相關(guān)研究表明骨髓瘤患者中癌細(xì)胞DNA異常增高的占比為76%，淋巴瘤患者中癌細(xì)胞DNA異常增高的占比為53%，白血病患者中癌細(xì)胞DNA異常增高的占比為23%[12]。此外腫瘤細(xì)胞的DNA倍體分析有助于腫瘤疾病患者預(yù)后的評(píng)估，一般來說二倍體腫瘤細(xì)胞患者預(yù)后結(jié)果較好，非整倍體腫瘤細(xì)胞患者預(yù)后較差，容易發(fā)生腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)以及死亡等[13]。除此之外，流式細(xì)胞術(shù)還可以基于化療過程中DNA分布直方圖變化情況有效評(píng)估患者的治療效果，為治療方案的調(diào)整提供依據(jù)。

4.流式細(xì)胞術(shù)在血液疾病診斷中的應(yīng)用

流式細(xì)胞儀可以對懸浮在血液中的血細(xì)胞進(jìn)行篩選分析，而血液采集是臨床疾病診斷的常用輔助手段，這位流式細(xì)胞術(shù)在血液疾病中的診斷以及推廣奠定了基礎(chǔ)。不同的抗血細(xì)胞表面分化抗原的單克隆抗體，因此流式細(xì)胞術(shù)可以采用不同的染料對同一個(gè)血細(xì)胞的不同參數(shù)進(jìn)行檢測，其在白血病分類診斷中的準(zhǔn)確率超過90%[14]。基于白血病細(xì)胞表達(dá)種系抗原的不同可以將白血病分為五種類型，分別為T細(xì)胞系、B細(xì)胞系、紅細(xì)胞系、髓細(xì)胞系以及巨核細(xì)胞系?；诎籽〖?xì)胞的CD34和HLA-DR非特異性標(biāo)志，還可以對白血病進(jìn)行分類和分期。因此通過流式細(xì)胞室對白血病患者細(xì)胞周期以及DNA倍體進(jìn)行測量，可以指導(dǎo)對患者的化學(xué)藥物治療，同時(shí)還可以通過流式細(xì)胞術(shù)對白血病細(xì)胞增殖情況進(jìn)行監(jiān)測，有效指導(dǎo)藥物治療，提高治療效果[15]。除此之外，流式細(xì)胞術(shù)還可以對血小板膜糖蛋白用單抗免疫熒光進(jìn)行標(biāo)記，通過對血小板功能以及活化情況進(jìn)行監(jiān)測來評(píng)價(jià)其活化程度在血栓性疾病進(jìn)展中的作用。

5.結(jié)束語

基于以上分析，流式細(xì)胞術(shù)已經(jīng)在醫(yī)學(xué)監(jiān)測的多個(gè)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，并且取得了較好的效果。但是相對來說流式細(xì)胞術(shù)也存在一定的不足，比如其只能對細(xì)胞懸液中的單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行分析、對紅細(xì)胞的測量誤差較大等。不過相信隨著今后技術(shù)的不斷發(fā)展，流式細(xì)胞術(shù)將會(huì)在醫(yī)學(xué)檢測中發(fā)揮更大的作用。