陳麗萍，韋體生，陳志洪，伍校軍，蔣榮成

（1.廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)有限公司良圻原種豬場(chǎng)，南寧 530317；2.南寧市江南區(qū)江西鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站，南寧530047；3.南寧市新世豐農(nóng)業(yè)科技有限責(zé)任公司，南寧 530047；4.廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，南寧 530004；5.廣西南寧同慶生物科技有限公司，南寧 530047）

0 引言

古典豬瘟（Classicalswinefever，CSF）主要是一種經(jīng)過黃病毒科瘟病毒屬中的豬瘟病毒（Classicalswinefevervirus，CSFV）直接導(dǎo)致的烈性致病性傳染病，這種傳染病也被稱為豬霍亂（Hogcholera）。古典豬瘟有很鮮明的特殊性，它的發(fā)病特別迅速，明顯內(nèi)熱淤積，毛細(xì)血管出現(xiàn)變性，造成發(fā)病豬體皮膚呈現(xiàn)出十分明顯的泛發(fā)性出血點(diǎn)，另外，還會(huì)出現(xiàn)脾臟梗死等生理特征，這是一種在世界范圍內(nèi)被定性為A類動(dòng)物傳染疾病，在中國也把這類疾病劃歸到一類動(dòng)物傳染病范圍。盡管在世界范圍內(nèi)很多國家都針對(duì)豬瘟采取了各種各樣的撲殺、隔離等相關(guān)措施，根據(jù)目前養(yǎng)殖行業(yè)特點(diǎn)分析，其養(yǎng)豬場(chǎng)存在密集度極高的現(xiàn)象，如果出現(xiàn)豬瘟則可能會(huì)出現(xiàn)大規(guī)模傳播，為養(yǎng)殖業(yè)帶來極為嚴(yán)重的影響。因此，必須針對(duì)豬場(chǎng)實(shí)際情況進(jìn)行豬瘟防疫，并根據(jù)豬瘟疫苗的實(shí)際效用進(jìn)行選擇，確保豬瘟防疫工作的開展可以有效提升豬場(chǎng)免疫效果[1]。

豬瘟疫苗的質(zhì)量對(duì)于疫苗的免疫效果有至關(guān)重要的影響，因此，科學(xué)合理地選擇疫苗顯得至關(guān)重要。試驗(yàn)為在最大程度上有效探討同一個(gè)廠家生產(chǎn)的不同批次豬瘟疫苗，對(duì)于仔豬呈現(xiàn)的豬瘟抗體效果的效價(jià)，進(jìn)而通過試驗(yàn)結(jié)果有效明確批次疫苗的免疫效果，為選擇科學(xué)合理的適用豬瘟疫苗提供有效依據(jù)[2]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

（1）時(shí)間與地點(diǎn)。起止時(shí)間：2018年7月15日至9月16日；試驗(yàn)地點(diǎn)：南寧市新世豐農(nóng)業(yè)科技有限責(zé)任公司；試驗(yàn)用豬：55～60日齡未接受豬瘟疫苗免疫的保育豬208頭。

（2）試驗(yàn)疫苗。疫苗為某廠生產(chǎn)的不同批次的豬瘟活疫苗（兔源脾淋苗），A組免疫舊批號(hào)為1605003-2，B組免疫新批號(hào)為1608006-1。

（3）檢測(cè)試劑與器材。豬瘟病毒抗體檢測(cè)試劑盒，購自北京愛德士元亨生物股份有限公司，由美國IDEXX公司生產(chǎn)，批號(hào)：99-43220-H251。根據(jù)豬瘟疫苗的應(yīng)用要求在對(duì)豬瘟病毒抗體檢測(cè)試劑進(jìn)行應(yīng)用前需要將其放置于室溫環(huán)境內(nèi)，使試劑的溫度恢復(fù)到常溫狀態(tài)，并將選用的樣品試劑進(jìn)行混合。檢測(cè)儀器包括不同規(guī)格的微量移液器（SOCOREX、EPPENDORF等）、美國BiotekELX800酶標(biāo)儀，微量振蕩器（IKA）、高速離心機(jī)、離心管、一次性采血器等。

1.2 試驗(yàn)方法

（1）試驗(yàn)分組。隨機(jī)選取未免疫豬瘟疫苗的10欄仔豬，分為2個(gè)組，每組分成5欄，每欄有20～22頭仔豬，即每個(gè)試驗(yàn)組120～130頭仔豬。

（2）免疫方法。試驗(yàn)在55～60日齡進(jìn)行免疫，具體分組如下：A組為按本場(chǎng)的免疫程序，一次免疫舊批號(hào)為1605003-2，免疫劑量為2頭份/頭。用A表示；B組為按本場(chǎng)的免疫程序，一次免疫新批號(hào)為1608006-1，免疫劑量為2頭份/頭。用B表示。

（3）血樣采集方法。試驗(yàn)豬免后6周前腔靜脈采血3～5 mL，分離血清備用。每個(gè)場(chǎng)每組試驗(yàn)分組隨機(jī)采血20頭左右，A組共采血119份，B組共采血123份。

（4）ELISA操作步驟。在此次試驗(yàn)中采用的方法為阻斷ELISA試驗(yàn)，在檢測(cè)的過程中其操作方法、操作步驟需要按照本次選用的豬瘟免疫試劑說明書進(jìn)行。

1.3 結(jié)果判定方法

同時(shí)滿足陰性對(duì)照的平均OD450值大于0.500，陽性對(duì)照的阻斷值＞50，檢測(cè)結(jié)果才有效。如果被檢樣本的阻斷值≥40，該樣本被判定為陽性；如果被檢樣本的阻斷值≤30，該樣本被判定為陰性；如果被檢樣本的阻斷值為30～40，該樣本被判定為可疑；如果被檢樣本的的阻斷值≥50，該樣本則可以被判定為合格。

2 結(jié)果與分析

試驗(yàn)利用阻斷ELISA原理檢測(cè)豬血清中豬瘟病毒抗體的方法，比較不同疫苗及不同免疫劑量的免疫效果。試驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 豬瘟抗體水平檢測(cè)結(jié)果

用舊批號(hào)1605003-2的豬瘟苗免疫的A組豬群產(chǎn)生的抗體陽性率、合格率水平和平均值都略高于新批號(hào)168006-1的豬瘟苗B組。但這2組豬瘟苗的抗體陽性率水平差異不顯著（P＞1.0）。兩組豬瘟苗免疫的豬群產(chǎn)生的抗體平均值和離散系數(shù)相差不大。試驗(yàn)結(jié)果分析，A組（舊批號(hào)1605003-2）的免疫效果與B組（新批號(hào)168006-1）產(chǎn)生的免疫效果都能達(dá)到較為理想的水平，2個(gè)批次的免疫效果差異不顯著。

3 討論

（1）仔豬在55～60日齡免疫1次某廠生產(chǎn)的不同批次的豬瘟活疫苗（兔源脾淋苗）都能使仔豬產(chǎn)生較高水平的豬瘟抗體。

（2）同一廠家不同批次生產(chǎn)的細(xì)胞苗對(duì)仔豬抗體水平差異不明顯。

（3）在豬瘟免疫中需要在養(yǎng)豬場(chǎng)內(nèi)長期開展豬瘟凈化活動(dòng)，確保豬瘟控制及凈化工作的開展可以達(dá)到規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)要求。在本次研究中對(duì)55～60日齡的豬群進(jìn)行免疫，通常只接種1次疫苗，同時(shí)在豬瘟免疫中應(yīng)針對(duì)豬場(chǎng)實(shí)際情況選用疫苗，確保豬瘟疫苗的應(yīng)用符合豬場(chǎng)實(shí)際情況，通過研究探索確認(rèn)豬瘟疫苗的適用性[3]。

4 結(jié)論

某廠生產(chǎn)的不同批次的豬瘟活疫苗（兔源脾淋苗）在此次豬瘟免疫工作中的應(yīng)用效果較為理想，其在實(shí)際中有效提升了豬場(chǎng)的免疫水平。在保育豬免疫中必須要結(jié)合豬場(chǎng)的實(shí)際情況、實(shí)際條件、實(shí)際環(huán)境選用相應(yīng)的豬瘟疫苗，并對(duì)不同批次豬瘟疫苗進(jìn)行試驗(yàn)，確保其免疫效果可以達(dá)到預(yù)期的水平。