許 英,謝明征,梁國剛

許英,謝明征,梁國剛,大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腹部急癥外科/大連醫(yī)科大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合研究院 遼寧省大連市 116000

核心提要：腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(enteric glial cells,EGCs)是腸神經(jīng)系統(tǒng)的重要組成部分,在胃腸道吸收、屏障、運(yùn)動(dòng)、分泌等功能調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用.研究發(fā)現(xiàn)其形態(tài)類似于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的星形膠質(zhì)細(xì)胞,在腸道中與鄰近的腸神經(jīng)元、腸上皮細(xì)胞、腸分泌細(xì)胞等都存在著密切的關(guān)系.胃腸道功能障礙時(shí),EGCs形態(tài)會(huì)發(fā)生改變,研究其解剖位置及形態(tài)學(xué)變化,有助于揭示與其相鄰近細(xì)胞之間作用關(guān)系并且進(jìn)一步提示其發(fā)揮功能作用的機(jī)制.

0 引言

Dogiel在1899年首次觀察并描述了腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(enteric glial cells,EGCs)[1].1972年Gabella[2]確定EGCs是一種獨(dú)特的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,不同于周圍神經(jīng)系統(tǒng)的其它部分,具有獨(dú)立的特征(其胞體比腸神經(jīng)元胞體小,有許多突起,在膠質(zhì)細(xì)胞體和突起中有大量膠質(zhì)絲).

1 腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞生理形態(tài)

Rühl[3]以成年豚鼠回腸為研究對(duì)象,在電子顯微鏡下觀察肌間神經(jīng)叢內(nèi)神經(jīng)節(jié)發(fā)現(xiàn)此處有非常緊湊的結(jié)構(gòu),周圍有基板,與結(jié)締組織和血管分離.所有的間隙由腸神經(jīng)和膠質(zhì)元素占據(jù),形成致密的神經(jīng)纖維網(wǎng),相鄰細(xì)胞膜之間有20 nm的間隙.EGCs在神經(jīng)節(jié)和神經(jīng)從連接處數(shù)量較多,其細(xì)胞核數(shù)量是神經(jīng)元細(xì)胞的2-3倍,膠質(zhì)細(xì)胞比神經(jīng)元細(xì)胞小,細(xì)長(zhǎng)型,胞體界限不清楚,核橢圓形,有深深的凹痕,核外膜上附著大塊致密物質(zhì).其胞質(zhì)中含有豐富的核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細(xì)絲微管.膠質(zhì)細(xì)絲很突出,但其數(shù)量和密度是可變的.中心粒部分突出,有時(shí)會(huì)有纖毛.線粒體呈橢圓形,具有橫嵴和致密的嵴間基質(zhì).細(xì)胞核和線粒體的形態(tài)學(xué)特征為膠質(zhì)細(xì)胞的鑒定提供了良好的標(biāo)準(zhǔn).膠質(zhì)細(xì)胞體大小、形狀不規(guī)則,典型線粒體存在,膠質(zhì)細(xì)胞絲和微管的出現(xiàn)是膠質(zhì)細(xì)胞識(shí)別的主要特征.

Hanani等[4]運(yùn)用膠質(zhì)細(xì)胞穿刺灌注賴根過氧化物酶檢測(cè),研究發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)取決于它們?cè)谀c道中所處的位置和微環(huán)境狀態(tài),并且首次提出根據(jù)EGCs的形態(tài)學(xué)差異對(duì)膠質(zhì)細(xì)胞群體提出分類：神經(jīng)節(jié)內(nèi)的膠質(zhì)細(xì)胞與中樞神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞相似呈星形,擁有非常短的不規(guī)則的突起,這種類型與中樞神經(jīng)系統(tǒng)灰質(zhì)內(nèi)的原生質(zhì)星形膠質(zhì)細(xì)胞非常相似,稱為“原生質(zhì)”或Ⅰ型腸膠質(zhì)細(xì)胞.神經(jīng)節(jié)間纖維束內(nèi)的膠質(zhì)細(xì)胞類似于中樞神經(jīng)纖維性星形膠質(zhì)細(xì)胞,與節(jié)間纖維束相平行性延長(zhǎng),并且很少的分支,稱為“纖維型”或“Ⅱ型腸膠質(zhì)細(xì)胞”.

Bohórquez等[5]用掃描電鏡與共聚焦顯微鏡聯(lián)合觀察并鑒定腸道分泌細(xì)胞,從三維角度研究其超微結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)腸內(nèi)分泌細(xì)胞的神經(jīng)莢膜由EGCs護(hù)衛(wèi).觀察到在固有層內(nèi)有腸膠質(zhì)細(xì)胞,并且所觀察EGCs形態(tài)的特征：長(zhǎng)而薄的足突從細(xì)胞體和神經(jīng)元纖維呈放射狀延伸;在平面細(xì)胞體內(nèi)典型的細(xì)長(zhǎng)核;這些突起在神經(jīng)纖維周圍形成獨(dú)特的神經(jīng)鞘.膠質(zhì)細(xì)胞從固有層由上皮下基層纖維形成的基板的開窗進(jìn)入上皮.膠質(zhì)細(xì)胞突觸內(nèi)含有可見的小的透明的分泌小泡,類似于突觸末端,而神經(jīng)膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子可以促進(jìn)腸內(nèi)分泌細(xì)胞神經(jīng)莢膜的發(fā)育.

相關(guān)研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)EGCs在腸道內(nèi)廣泛分布于腸道的黏膜層、黏膜下神經(jīng)叢、肌間神經(jīng)叢和肌層,腸外也分布于胃黏膜固有層[6,7].EGCs在腸黏膜上皮與黏膜下層的腸神經(jīng)系統(tǒng)之間形成網(wǎng)絡(luò),其一端與腸上皮緊密接觸,另一端則緊密包繞腸神經(jīng),從而將腸上皮細(xì)胞與腸神經(jīng)系統(tǒng)聯(lián)系起來,貫穿整個(gè)腸壁[8].免疫組化也顯示,在小腸絨毛中,膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)陽性的膠質(zhì)細(xì)胞胞體和突觸緊鄰腸上皮,延伸至絨毛頂端[9].EGCs網(wǎng)絡(luò)分為三層：與腸上皮細(xì)胞緊密相連的為第一層,其足突與腸上皮細(xì)胞形成類似神經(jīng)突觸樣的特殊結(jié)構(gòu);EGCs彼此之間形成第二層,其通過足突形成的縫隙鏈接彼此相連;EGCs網(wǎng)絡(luò)延伸至黏膜深層,密切包繞神經(jīng)元及突觸間隙,形成第三層[10].

隨著研究不斷深入,發(fā)現(xiàn)EGCs在腸道微環(huán)境中呈現(xiàn)不同的形態(tài)特征,迄今為止分為四種形態(tài)類型：Ⅰ型或“原漿”和Ⅱ型或“纖維型”如前所述;Ⅲ型或“黏膜型”EGCs是上皮下的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,有幾個(gè)長(zhǎng)分枝;Ⅵ型或“肌肉內(nèi)”的EGCs是細(xì)長(zhǎng)的膠質(zhì)細(xì)胞運(yùn)行在肌肉組織的神經(jīng)纖維中[1,11,12].EGCs形態(tài)結(jié)構(gòu)特征或許與其所處的微環(huán)境有關(guān),根據(jù)所處位置還可以分為黏膜神經(jīng)膠質(zhì)、神經(jīng)節(jié)內(nèi)神經(jīng)膠質(zhì)、肌內(nèi)神經(jīng)膠質(zhì),而不同位置的膠質(zhì)細(xì)胞具有不同的生理功能[1].

2 EGCs病理學(xué)形態(tài)改變

一系列研究發(fā)現(xiàn)EGCs與胃腸道功能密切相關(guān),在不同的胃腸道病理狀態(tài)下其形態(tài)會(huì)發(fā)生不同改變.

Fujikawa等[13]首次在腸易激綜合征(irritable bowel syndrome,IBS)中觀察到EGCs發(fā)生的形態(tài)學(xué)的改變(即從絲狀到葉狀改變),EGCs結(jié)構(gòu)的變化可能反映了其膠質(zhì)活性的改變.在IBS動(dòng)物模型中免疫熒光觀察：大部分EGCs(GFAP免疫陽性)分布于腸道神經(jīng)元(HuCD免疫陽性)周圍,正常組可見少量與神經(jīng)元重疊的EGCs,然而這些EGCs密度增生即與神經(jīng)元重疊的EGCs增生密度在模型組(壓力增加)大鼠中逐漸增加.在不同壓力情況下,膠質(zhì)細(xì)胞根據(jù)其末端結(jié)構(gòu)分為絲狀(沒有明顯頸部或球狀末端腫脹)和葉狀(頸部有球狀末端腫脹區(qū)).實(shí)驗(yàn)組葉狀突起與每個(gè)神經(jīng)節(jié)總突起的比值高于對(duì)照組,在急性應(yīng)激過去4 wk后,上述結(jié)構(gòu)發(fā)生逆轉(zhuǎn).在應(yīng)對(duì)應(yīng)激反應(yīng)中,增生的EGCs(尤其是球狀腫脹)表現(xiàn)與神經(jīng)元顯著重疊[14].

研究者應(yīng)用免疫熒光染色觀察肌間神經(jīng)叢發(fā)現(xiàn),正常條件下EGCs包繞在神經(jīng)節(jié)周圍,扁平外突清晰光滑,連續(xù)延伸,熒光度偏低;失血性休克后出現(xiàn)變形,外突變得模糊,有些出現(xiàn)中斷,熒光度增強(qiáng);電針足三里穴可以減輕失血性休克后EGCs的形態(tài)異常,外突比模型組清晰光滑,熒光度更強(qiáng)[15,16].在應(yīng)用透射電鏡對(duì)IBS患者EGCs進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)的觀察,電鏡結(jié)果顯示IBS患者EGCs異染色質(zhì)明顯減少(此為轉(zhuǎn)錄激活的信號(hào)),線粒體數(shù)目明顯增多,糖原顆粒明顯增多,鏡下粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及多核糖體經(jīng)肉眼觀察也多于對(duì)照組,表明IBS患者存在EGCs功能異?；钴S[17].

應(yīng)用HE染色觀察慢傳輸便秘結(jié)腸黏膜形態(tài)學(xué)改變,發(fā)現(xiàn)對(duì)照組(正常組)EGCs及其突起組成神經(jīng)節(jié),細(xì)胞排列整齊均勻.模型組(慢傳輸便秘)EGCs明顯減少尤其以黏膜下環(huán)肌層表面和環(huán)肌層區(qū)域更加突出,神經(jīng)纖維空泡樣變性且排列紊亂,大部分模型動(dòng)物結(jié)腸壁肌間神經(jīng)叢和黏膜下神經(jīng)叢的腸神經(jīng)元數(shù)量較空白對(duì)照組明顯減少.電鏡觀察對(duì)照組可見EGCs核染色質(zhì)分布均勻,核膜清晰,形態(tài)正常,胞質(zhì)內(nèi)線粒體,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),核糖體等細(xì)胞器結(jié)構(gòu)清晰.模型組可見細(xì)胞核染色質(zhì)聚集,部分核固縮,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)線粒體腫脹,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張[18].

采用消化道全層鋪片(whole mount stretch preparation)的方法研究缺血再灌注損傷時(shí)EGCs變化,發(fā)現(xiàn)正常狀態(tài)下動(dòng)物腸肌間神經(jīng)叢EGCs縱橫交織呈網(wǎng)格狀包繞在腸神經(jīng)節(jié)周圍,與節(jié)間神經(jīng)連接,包繞軸突,延伸出的扁平外突把神經(jīng)元與神經(jīng)節(jié)外細(xì)胞不完全隔離,呈連續(xù)性分布,形成了一個(gè)巨大的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu);而在缺血再灌注后,腸黏膜受到不同程度損傷,肌間神經(jīng)叢EGCs細(xì)胞也受到一定程度的受損,鈣結(jié)合蛋白S100β陽性細(xì)胞數(shù)量明顯減少,連續(xù)性條帶消失,網(wǎng)格變得模糊[19].

觀察EGCs在不同病理狀態(tài)下形態(tài)學(xué)的改變,對(duì)于揭示其在腸道中發(fā)揮的作用具有很重要的意義,提示EGCs在維護(hù)腸道屏障功能,改善腸道炎癥等方面發(fā)揮著重要的作用.

3 EGCs形態(tài)學(xué)研究方法

腸神經(jīng)系統(tǒng)在神經(jīng)胃腸病學(xué)中被稱為“腸腦”,主要由腸神經(jīng)元和EGCs組成,EGCs作為腸神經(jīng)系統(tǒng)的重要組成部分,引起廣泛關(guān)注[20].研究者從不同的角度運(yùn)用不同的研究方法研究EGCs在胃腸道中發(fā)揮的作用.其中對(duì)EGCs形態(tài)學(xué)的研究主要運(yùn)用HE染色、免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IHC)、免疫細(xì)胞技術(shù)、透射電鏡技術(shù)等,從大體觀到微觀結(jié)構(gòu)觀察EGCs在生理和病理情況下的形態(tài)學(xué)改變.揭示了EGCs參與到胃腸道功能調(diào)節(jié),并且發(fā)揮著重要作用.

3.1 IHC技術(shù) IHC是生命科學(xué),尤其是現(xiàn)代病理學(xué)診斷、鑒別診斷、腫瘤特異性分子靶標(biāo)篩選、鑒定的最重要技術(shù)手段之一,IHC技術(shù)于1941年Coons等[21]采用熒光素標(biāo)記抗體檢測(cè)肺炎雙球菌研究時(shí)產(chǎn)生.隨著技術(shù)的不斷更新發(fā)展,產(chǎn)生了酶標(biāo)抗體技術(shù)、賴根過氧化物酶標(biāo)記抗體過氧化物酶技術(shù)、ABC法,快速ABC法、二步ABC法等等,隨著抗原修復(fù)技術(shù)的出現(xiàn),IHC技術(shù)的敏感性、特異性大幅度提高,靶標(biāo)的定位更為準(zhǔn)確、背景愈加清晰.此外,由于單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展,IHC可檢測(cè)分子靶標(biāo)譜和適用樣本范圍大幅度擴(kuò)展,越來越多的指標(biāo)可采用IHC在冷凍切片、細(xì)胞爬片、細(xì)胞滴片和常規(guī)福爾馬林固定、石蠟包埋的組織樣本中檢出[22,23].研究發(fā)現(xiàn),EGCs分泌膠質(zhì)原纖維酸性蛋白GFAP、鈣結(jié)合蛋白S100β、Sox8/9/10等[11,24],因此通常以GFAP或S100β免疫陽性作為EGCs標(biāo)志物,檢測(cè)其在胃腸標(biāo)本中整體表達(dá)和分布情況,并進(jìn)行半定量分析.但研究發(fā)現(xiàn),GFAP、S100β抗體在免疫組化染色模式下不能很好地區(qū)分單個(gè)細(xì)胞,而且其在腸道組織中免疫反應(yīng)不規(guī)則及片狀化,不允許進(jìn)行一定的定量IHC研究.Sox8/9/10免疫陽性完全局限于膠質(zhì)細(xì)胞核,能夠清楚明確地辨別單個(gè)細(xì)胞,從而能夠較容易而可靠地實(shí)現(xiàn)對(duì)EGCs定量[25].在研究神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和腸神經(jīng)元凋亡在難治性慢傳輸型便秘的神經(jīng)病理學(xué)中的作用時(shí),研究者運(yùn)用免疫組化染色發(fā)現(xiàn)與正常組相比,慢傳輸型便秘患者腸內(nèi)神經(jīng)元和ICC細(xì)胞明顯減少,但EGCs(S100標(biāo)記)減少的更加明顯,可能進(jìn)一步削弱本已不穩(wěn)定的神經(jīng)腸內(nèi)平衡[26].為進(jìn)一步了解EGCs在人類胃腸道疾病中的作用,任何腸全層活檢的組織病理學(xué)研究不僅評(píng)估神經(jīng)元,而且應(yīng)該查看腸神經(jīng)膠質(zhì)網(wǎng)絡(luò)的異常變化.

3.2 免疫熒光染色技術(shù) 免疫熒光染色技術(shù)是將抗體或抗原在不影響其免疫學(xué)特性的條件下,以化學(xué)方法同熒光素相結(jié)合,然后將標(biāo)記有熒光素的抗體(或抗原)作為試劑,在特定的條件下與相應(yīng)抗原(或抗體)進(jìn)行反應(yīng),再借助熒光顯微鏡觀察特異性免疫熒光現(xiàn)象的一種免疫標(biāo)記技術(shù)免疫熒光技術(shù)特點(diǎn)：快速性、敏感性、廣泛適應(yīng)性、定位性.缺點(diǎn)：不能對(duì)組織細(xì)胞進(jìn)行細(xì)微結(jié)構(gòu)的觀察,不易鑒別細(xì)胞種類,難以制備永久性標(biāo)本,熒光容易消退.免疫熒光染色特點(diǎn)是可在細(xì)胞水平上對(duì)特異性抗原或抗體 定位的一種通用手段.其中多重免疫熒光染色技術(shù)利用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理,可對(duì)細(xì)胞中多種蛋白進(jìn)行可視化定量、定性及共定位.間接免疫熒光技術(shù),一直以來同種來源的抗體染色會(huì)發(fā)生相互串色,造成結(jié)果誤判,而運(yùn)用間接多重免疫熒光染色可避免這種情況.基于免疫過氧化物-免疫熒光序貫技術(shù)的圖像編輯系統(tǒng),該方法采用數(shù)字圖像編輯技術(shù)將兩個(gè)獨(dú)立采集的圖像合并為一個(gè)合并圖像,采用間接免疫過氧化物酶,然后依次進(jìn)行間接免疫熒光、數(shù)字圖像采集和圖像編輯.可以實(shí)現(xiàn)在不同細(xì)胞中識(shí)別不同抗原以及在同一細(xì)胞中共定位抗原.與雙重免疫熒光相比,能更好觀察組織形態(tài)結(jié)構(gòu),很容易在同一個(gè)細(xì)胞中定位兩個(gè)不同抗原[27].

通過免疫熒光技術(shù)標(biāo)記GFAP來檢測(cè)EGCs,結(jié)果顯示正常EGCs胞體內(nèi)含有大量大小、形狀不同的突觸,其圍繞著細(xì)胞核呈現(xiàn)清晰、連續(xù)、細(xì)長(zhǎng)的形態(tài),分布在細(xì)胞體邊緣[28].在對(duì)功能性消化不良患者十二指腸活檢進(jìn)行免疫熒光染色觀察發(fā)現(xiàn)正常組黏膜下神經(jīng)叢內(nèi)EGCs(S100標(biāo)記)包繞腸神經(jīng)元(HuCD免疫陽性)并在神經(jīng)節(jié)內(nèi)形成清晰的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),為腸神經(jīng)提供網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)和功能支持.而功能性消化不良組黏膜下神經(jīng)叢內(nèi)腸神經(jīng)元周圍膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性增生,體積增大,網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)紊亂,單個(gè)細(xì)胞無法識(shí)別.此觀察結(jié)果是功能性消化不良疾病黏膜下神經(jīng)叢腸神經(jīng)功能和結(jié)構(gòu)異常的直接證據(jù),可能對(duì)功能性消化不良具有預(yù)測(cè)和診斷的價(jià)值[29].

3.3 全層鋪片技術(shù) 消化道全層鋪片即整裝撕片.根據(jù)消化道管壁內(nèi)神經(jīng)叢的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),分縱層肌、環(huán)層肌、黏膜下層等分層撕開鋪片,以暴露不同的壁內(nèi)神經(jīng)叢,是研究腸壁內(nèi)神經(jīng)形態(tài)和分布的有效實(shí)驗(yàn)手段.可以直接暴露肌間神經(jīng)叢,能完整觀察神經(jīng)叢的形體和結(jié)構(gòu),另外,神經(jīng)元和神經(jīng)纖維的數(shù)量較大,可以提高神經(jīng)叢上待測(cè)物質(zhì)的陽性率[30,31].神經(jīng)叢為扁平網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),使用全層鋪片技術(shù)與IHC染色相結(jié)合可以直觀、全面顯示所要觀察細(xì)胞的形態(tài)、整體結(jié)構(gòu)或多細(xì)胞間的相互關(guān)系及位置變化.研究大鼠結(jié)腸肌間神經(jīng)叢內(nèi)EGCs時(shí),在體式顯微鏡下逐層剝離黏膜層、黏膜下層,環(huán)形肌,清楚顯示位于縱、環(huán)肌之間的肌間神經(jīng)叢,將組織撕片附于載玻片上,獲得腸肌間神經(jīng)叢全層鋪片標(biāo)本.再與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異性標(biāo)志物鈣結(jié)合蛋白S100β免疫熒光組織化學(xué)染色相結(jié)合,可清晰顯示肌間神經(jīng)叢EGCs的形態(tài),即從胞體發(fā)出的突起伸展填充在神經(jīng)元胞體及其突起之間[32].全層鋪片技術(shù)可以很好補(bǔ)充冰凍切片或石蠟切片在實(shí)驗(yàn)觀察中的不足.制備全層鋪片后再進(jìn)行細(xì)胞學(xué)或免疫細(xì)胞化學(xué)染色,能較好地顯示胃腸道環(huán)形肌、縱形肌、肌間神經(jīng)叢及其周圍細(xì)胞的形態(tài)與結(jié)構(gòu),便于觀察疾病時(shí)腸神經(jīng)系統(tǒng)及其周圍細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與重塑[33].

3.4 電鏡技術(shù) 透射電子顯微鏡(transmission electron microscopy,TEM)能夠在超微結(jié)構(gòu)水平上觀察生物組織、細(xì)胞及細(xì)胞器的形態(tài)結(jié)構(gòu)[34].透射電鏡技術(shù)在各組織超微結(jié)構(gòu)病理學(xué)觀察中發(fā)揮著無可替代的作用,它是以電子束為“光源”通過電磁透鏡成像的電子光學(xué)儀器,放大倍數(shù)可達(dá)幾十萬倍[35].應(yīng)用透射電鏡觀察EGCs的超微結(jié)構(gòu)染色質(zhì)、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器結(jié)構(gòu),是研究EGCs生理病理情況下超微結(jié)構(gòu)變化最常用的方法.但透射電鏡對(duì)樣本制作及儀器的操作要求極高,其中透射電鏡制樣過程中樣本超微結(jié)構(gòu)的保存受多種因素的影響[36].

另外掃描電子顯微鏡可以將特定細(xì)胞的精細(xì)超微結(jié)構(gòu)在三位空間中被揭示出來,使細(xì)胞和組織的超微結(jié)構(gòu)在三維中以常規(guī)和自動(dòng)化的方式呈現(xiàn).掃描電子顯微鏡在神經(jīng)科學(xué)中已經(jīng)非常流行,它有助于揭示神經(jīng)回路的特定突觸連接.用掃描電鏡觀察到在固有層內(nèi)腸膠質(zhì)細(xì)胞,以三維視角可看到更為清晰的特征：(1)長(zhǎng)而薄的足突從細(xì)胞體和神經(jīng)元纖維呈放射狀延伸;(2)在平面細(xì)胞體內(nèi)典型的細(xì)長(zhǎng)核;(3)這些突起在神經(jīng)纖維周圍形成獨(dú)特的神經(jīng)鞘.膠質(zhì)細(xì)胞從固有層由上皮下基層纖維形成的基板的開窗進(jìn)入上皮.膠質(zhì)細(xì)胞突觸內(nèi)含有可見的小的透明的分泌小泡,類似于突觸末端[5].

4 結(jié)論

EGCs形態(tài)學(xué)的研究是對(duì)其進(jìn)行鑒別以及分子特征和功能特征研究的前提,也是充分了解EGCs在胃腸道功能和疾病中發(fā)揮作用的前提,有效的形態(tài)學(xué)研究方法尤為重要.EGCs的形態(tài)取決于它們?cè)谖改c道中所處的位置和微環(huán)境狀態(tài),在病理狀態(tài)下還可以發(fā)生表型改變和重塑,以應(yīng)對(duì)營養(yǎng)、機(jī)械、疾病相關(guān)的損傷.大量研究已經(jīng)揭示了EGCs在胃腸道中不僅僅局限于營養(yǎng)、支持腸神經(jīng),還參與胃腸道穩(wěn)態(tài)、腸道黏膜屏障、胃腸道運(yùn)動(dòng)、胃腸道免疫等功能的調(diào)節(jié).對(duì)于未來的研究更多傾向于研究EGCs起作用的復(fù)雜的分子信號(hào)機(jī)制.集中于研究EGCs與腸上皮細(xì)胞、腸神經(jīng)元、腸道免疫細(xì)胞、腸道分泌細(xì)胞相互之間作用機(jī)制,影響調(diào)節(jié)腸道的許多功能,如運(yùn)動(dòng)、分泌、屏障功能.采用有效的研究方法,從形態(tài)學(xué)角度揭示EGCs及與鄰近細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化將對(duì)其作用機(jī)制的研究有很大的提示作用.此外,運(yùn)用有效的形態(tài)學(xué)研究方法觀察病理狀態(tài)下EGCs數(shù)量及形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變對(duì)于臨床診斷和評(píng)估胃腸道疾病具有重要的意義.除了傳統(tǒng)的免疫熒光、電鏡等技術(shù)外,較前沿的基因嵌合分析與免疫染色雙標(biāo)相結(jié)合等方法,對(duì)EGCs進(jìn)行高分辨率的形態(tài)學(xué)表征的研究,擴(kuò)展了先前關(guān)于EGCs形態(tài)學(xué)的研究.技術(shù)不斷發(fā)展,那么更精準(zhǔn)的形態(tài)學(xué)研究方法有待于進(jìn)一步探索.