劉璐 陳艷芝

【摘要】目的：探究Hcy的循環(huán)酶法檢測(cè)評(píng)價(jià)與腫瘤診斷的意義。方法：選取一個(gè)階段內(nèi)在本院接受治療的100例腫瘤患者作為觀察組，選取同期在本院體檢的健康人員50例作為對(duì)照組，對(duì)比觀察兩組研究對(duì)象檢查結(jié)果，對(duì)Hcy的循環(huán)酶法檢測(cè)辦法進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果：循環(huán)酶法測(cè)定Hcy高值批內(nèi)CV與日間CV分別為，1.86%、2.79%;低值批內(nèi)CV與日間CV分別為，2.57%、3.34%，均符合試劑廠家的不精密度;新鮮混合血清檢測(cè)Hcy均值與相應(yīng)校準(zhǔn)品濃度及回收率均能夠達(dá)到試驗(yàn)要求標(biāo)準(zhǔn);循環(huán)酶法檢測(cè)血清Hcy所處范圍顯示其現(xiàn)行良好，滿足廠家要求;腦腫瘤患者血清Hcy水平最高，為17.37±2.15μmol/L，此結(jié)果與其他類型腫瘤患者及健康人員進(jìn)行對(duì)比，明顯偏高，對(duì)比結(jié)果（P<0.05）;本組所有類型腫瘤患者與健康人員進(jìn)行對(duì)比其Hcy水平均明顯偏高，且組間對(duì)比差異（P<0.05）。結(jié)論：經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)，Hcy的循環(huán)酶法檢測(cè)法具有便捷性、測(cè)定時(shí)間短、精準(zhǔn)可靠等優(yōu)勢(shì)，且精密度與線性范圍均符合臨床要求，腫瘤患者的H差異水平要明顯高于健康人員，證實(shí)Hcy水平能夠作為腫瘤患者的臨床診斷參考指標(biāo)，適合應(yīng)用在腫瘤早期篩查中。

【關(guān)鍵詞】Hcy的循環(huán)酶法檢測(cè);評(píng)價(jià);腫瘤診斷

【中圖分類號(hào)】

R969.4【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】

A【文章編號(hào)】1005-0019（2019）04-001-01

腫瘤在臨床中被界定為是局部組織細(xì)胞增生所形成的新生物，多會(huì)表現(xiàn)出占位性塊狀突起，為此也常被稱之為贅生物[1]。腫瘤基于其危害程度可分為良性腫瘤與惡性腫瘤，其中惡性腫瘤對(duì)患者的生命安全威脅較大，盡早診斷并給予有效治療對(duì)降低病死率具有重要意義[2]。同型半胱氨酸（Hcy）屬于一種含硫氨基酸，是蛋氨酸代謝過(guò)程中產(chǎn)生的中間產(chǎn)物[3]。有關(guān)研究人員提出，血清Hcy的異常升高是心腦血疾病的主要危險(xiǎn)因素，可引發(fā)神經(jīng)毒性或細(xì)胞毒性等改變，最終引發(fā)癌性病變[4]。高水平Hcy與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展存在重要關(guān)聯(lián)，為此，可作為對(duì)腫瘤進(jìn)行診斷中的主要參考。在本次研究中選取院內(nèi)100例腫瘤患者及50例健康人員展開(kāi)對(duì)比觀察，探究Hcy的循環(huán)酶法檢測(cè)評(píng)價(jià)與腫瘤診斷的意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取我院2017年3月～2018年3月期間在本院接受治療的100例腫瘤患者作為觀察組，選取同期在本院體檢的健康人員50例作為對(duì)照組。觀察組100例患者中：男62例，女38例，年齡49歲～71歲，平均年齡（60.28±10.24）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均明確診斷為腫瘤疾病;本次研究獲取到倫理委員會(huì)及患者同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床病歷資料不全者;伴隨其他重癥疾病者。對(duì)照組50例患者中：男30例，女20例，年齡48歲～71歲，平均年齡（60.14±10.78）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有入選人員均在本院接受體檢;本次研究獲取到研究對(duì)象同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)體檢排除腫瘤病癥;伴隨其他影響到檢查結(jié)果疾病者。分別對(duì)比兩組患者的年齡及性別，結(jié)果顯示差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可進(jìn)行對(duì)比觀察。

1.2方法

1.2.1試劑與儀器

本次研究中應(yīng)用循環(huán)酶法檢測(cè)Hcy試劑盒、校準(zhǔn)物、質(zhì)控物均由來(lái)源于同一個(gè)生產(chǎn)廠家，儀器為西門(mén)子全自動(dòng)生化分析儀，參比系統(tǒng)為西門(mén)子ADVIA Centaur XP分析系統(tǒng)與相應(yīng)Hcy試劑盒[5]。

1.2.2循環(huán)酶法檢測(cè)Hcy分析性能評(píng)估

（1）精密度評(píng)價(jià)：參考美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)EP5-A2規(guī)定的方案進(jìn)行，選擇兩種濃度試驗(yàn)標(biāo)本，分別為低值：12.00μmol/L;高值：30.00μmol/L。在2h之內(nèi)持續(xù)測(cè)定兩種水平標(biāo)本20次，每次測(cè)試同一標(biāo)本分為雙份檢測(cè)，持續(xù)側(cè)20d，分別計(jì)算出均值（x）與標(biāo)準(zhǔn)差（s）及差異系數(shù)（CV）[6]。

（2）方法學(xué)對(duì)比試驗(yàn)：依據(jù)CLSI WP9-A2文件中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，用西門(mén)子ADVIA Centaur XP Hcy檢測(cè)系統(tǒng)作為對(duì)比方法，循環(huán)酶法Hcy檢測(cè)試劑盒作為試驗(yàn)方法，兩種檢測(cè)系統(tǒng)均嚴(yán)格遵循說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，檢測(cè)患者血清標(biāo)本[7]。

（3）回收試驗(yàn)：依據(jù)CLSI EP15-A文件中相關(guān)內(nèi)容，制備新鮮患者混合血清作為基礎(chǔ)標(biāo)本，各樣本均進(jìn)行5次檢測(cè)，取5次檢測(cè)值平均值作為本次研究標(biāo)本的基礎(chǔ)值，向1.5mL混合基礎(chǔ)標(biāo)本中加入0、100、200、300、400、500μL Hcy高值標(biāo)準(zhǔn)品，后分別加入500、400、300、200、100、0μL生理鹽水，所有樣本均進(jìn)行3次檢測(cè)，計(jì)算出均值。

（4）線性試驗(yàn)：依據(jù)CLSI EP15-A文件中相關(guān)內(nèi)容，將生理鹽水作為1好標(biāo)本評(píng)估線性范圍，應(yīng)用Hcy高值標(biāo)準(zhǔn)品作為7號(hào)標(biāo)本，將1號(hào)標(biāo)本與7號(hào)標(biāo)本依據(jù)1：9、1：4、2：3、3：2、4：5比例進(jìn)行混合，對(duì)7個(gè)標(biāo)本重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算出平均值所謂側(cè)得水平（Y），設(shè)定理論水平（X）與實(shí)側(cè)水平應(yīng)用多次回歸進(jìn)行線性評(píng)價(jià)，計(jì)算出回歸方程與相關(guān)系數(shù)[8]。

（5）參考區(qū)間評(píng)價(jià)：依據(jù)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)SC28-A2文件相關(guān)內(nèi)容，選擇20分體檢合格健康人員血清標(biāo)本作為參考人群標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定[9]。

1.2.3臨床試驗(yàn)

經(jīng)性能驗(yàn)證Hcy檢測(cè)系統(tǒng)應(yīng)用在檢測(cè)100例患者血清標(biāo)本Hcy水平中，分別觀察胃癌、宮頸癌、乳腺癌等患者血清Hcy水平，對(duì)照組健康人員為50例。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本次研究當(dāng)中的所有數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，以t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，以卡方檢驗(yàn)，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1Hcy精密度試驗(yàn)結(jié)果

如表1所示，循環(huán)酶法測(cè)定Hcy高值批內(nèi)CV與日間CV分別為，1.86%、2.79%;低值批內(nèi)CV與日間CV分別為，2.57%、3.34%，均符合試劑廠家的精密度標(biāo)準(zhǔn)。

2.2對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果

調(diào)查結(jié)果顯示出，應(yīng)用循環(huán)酶法試劑盒進(jìn)行Hcy測(cè)定結(jié)果相關(guān)性良好，線性回歸方程Y=0.956 3X+1.27，線性回歸系數(shù)r2=0.970 8，n=40，將兩者測(cè)定結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，差異顯示（P>0.05）。詳細(xì)情況見(jiàn)圖1。

2.4線性試驗(yàn)結(jié)果

將Hcy標(biāo)準(zhǔn)品理論值視為橫坐標(biāo)，實(shí)際測(cè)試值視為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸分析，結(jié)果顯示出，循環(huán)酶法檢測(cè)血清Hcy處于2.00-40.00μmol/L之間線性良好，回歸方程Y=951 5X+1.684 6，r2=0.997.3，符合生產(chǎn)廠家要求。詳細(xì)情況見(jiàn)圖2。

2.5參考區(qū)間驗(yàn)證

選取20例健康人員血清標(biāo)本進(jìn)行Hcy水平測(cè)定，驗(yàn)證結(jié)果顯示出，健康人員血清Hcu水平處于參考區(qū)間范圍中，參考范圍通過(guò)驗(yàn)證。

2.6不同腫瘤患者血清Hcy水平

如表3所示，不同類型腫瘤患者中，腦腫瘤患者血清Hcy水平最高，為17.37±2.15μmol/L，將其他各種類型腫瘤患者與健康人員進(jìn)行對(duì)比，差異顯示（P<0.05）;將不同類型腫瘤患者與健康人員血清Hcy水平進(jìn)行對(duì)比，差異顯示（P<0.05）。

3討論

腫瘤被稱之為威脅人類健康的主要疾病之一，其中惡性腫瘤對(duì)患者的生命安全具有較大威脅，可直接導(dǎo)致患者的死亡，而早期治療對(duì)于降低腫瘤患者死亡率具有重要意義[10]。為促使腫瘤患者能夠盡早接受有效治療，需要在診斷水平上不斷做出提升，以往有研究資料顯示血清Hcy水平的異常升高可為提示腫瘤的發(fā)生及發(fā)展，屬于臨床中針對(duì)腫瘤疾病進(jìn)行診斷中的主要參考指標(biāo)。Hcy也被稱之為是同型半胱氨酸，是人體中含硫氨基酸的主要代謝中間產(chǎn)物，現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)界認(rèn)為其可能是心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因子，而血漿中Hcy含量與遺傳因素及年齡因素等存在相關(guān)關(guān)系。

Hcy的正常參考值基于測(cè)定辦法與種族的不同會(huì)呈現(xiàn)出一定差異性，正常情況下空腹血漿總Hcy水平處于5-15μmol/L之間，若超出10μmol/L則可視為異常狀態(tài)。有關(guān)研究結(jié)果顯示，Hcy沒(méi)升高5μmol/L，相應(yīng)的腦卒中發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加50%左右，缺血性心臟病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加32%，即Hcy水平與心血管疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)呈正相關(guān)關(guān)系[11]。導(dǎo)致Hcy水平出現(xiàn)異常變化的因素主要為遺傳因素與環(huán)境營(yíng)養(yǎng)因素，其中遺傳因素所導(dǎo)致的先天性胱硫醚縮合酶缺陷會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)CBS酶嚴(yán)重缺乏臨床表現(xiàn)，此類型患者對(duì)會(huì)在早年發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化，且能夠影響到全身動(dòng)脈的病變，甚至于導(dǎo)致患者早期死亡，有關(guān)研究結(jié)果顯示出，CBS、MS酶的基因出現(xiàn)堿基突變或是缺失，會(huì)引發(fā)相關(guān)酶缺陷或是活性下降?；诃h(huán)境營(yíng)養(yǎng)因素的Hcy水平變化研究中，已經(jīng)證實(shí)冠心病患者血漿Hcy水平會(huì)異常升高，且伴隨血清葉酸水平的異常下降[12]。血清Hcy檢測(cè)技術(shù)當(dāng)前被廣泛的應(yīng)用到臨床診治過(guò)程中，且多會(huì)應(yīng)用循環(huán)酶法借助于全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，后期發(fā)展中可在技術(shù)完善性及所用設(shè)備性能方面進(jìn)一步提升。在本次研究中從循環(huán)酶法檢測(cè)血清Hcy的可靠性、靈敏度等幾個(gè)方向進(jìn)行試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)中性能評(píng)價(jià)結(jié)果為，循環(huán)酶法測(cè)定Hcy高值批內(nèi)CV與日間CV均符合試劑廠家的不精密度。循環(huán)酶法檢測(cè)血清Hcy所處區(qū)間顯示線性良好，符合廠家要求。循環(huán)酶法試劑盒測(cè)定Hcy結(jié)果相關(guān)性良好。此結(jié)果與以往研究資料較為相似，證實(shí)了此種檢測(cè)方法的精密度及準(zhǔn)確性均能夠符合臨床實(shí)驗(yàn)要求。葉酸對(duì)細(xì)胞分化與發(fā)育等具有較大影響作用，屬于維持生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，而葉酸的缺乏會(huì)導(dǎo)致含硫氨基酸循環(huán)代謝受到阻礙，促使人體血液中的Hcy水平逐漸升高，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。

從不同類型腫瘤患者Hcy水平檢測(cè)結(jié)果來(lái)分析，不同類型腫瘤患者中，腦腫瘤患者血清Hcy水平最高，為17.37±2.15μmol/L，各類型腫瘤患者與對(duì)照組健康人員進(jìn)行血清Hcy水平對(duì)比，差異顯示（P<0.05）;各類型腫瘤患者與對(duì)照組健康人員進(jìn)行血清Hcy水平，差異顯示（P<0.05）。以往有研究結(jié)果顯示血清Hcy在肺癌、乳腺癌等類型腫瘤中陽(yáng)性預(yù)測(cè)率較高，為此，此項(xiàng)指標(biāo)可作為肺癌及乳腺癌的腫瘤標(biāo)志物存在。本次結(jié)果所證實(shí)的是，循環(huán)酶法檢測(cè)血清Hcy試劑盒適合全自動(dòng)生化分析檢測(cè)系統(tǒng)，其檢測(cè)過(guò)程精密度與檢測(cè)結(jié)果均能夠滿足臨床檢測(cè)需求。高水平Hcy與婦科腫瘤、肺癌等發(fā)生及發(fā)展具有相關(guān)關(guān)系，此指標(biāo)可能腫瘤病癥發(fā)生及后期發(fā)展的主要影響因素，為此，已經(jīng)診斷為腫瘤患者必須要密切觀察其血清Hcy水平，將此作為依據(jù)加強(qiáng)對(duì)癥治療，對(duì)預(yù)防或是控制腫瘤的發(fā)生及發(fā)展具有重要意義。

綜上所述，經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)，Hcy的循環(huán)酶法檢測(cè)法具有便捷性、測(cè)定時(shí)間短、精準(zhǔn)可靠等優(yōu)勢(shì)，且精密度與線性范圍均符合臨床要求，腫瘤患者的H差異水平要明顯高于健康人員，證實(shí)Hcy水平能夠作為腫瘤患者的臨床診斷參考指標(biāo)，適合應(yīng)用在腫瘤早期篩查中。

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