溫華梅，屈平平，李 濤，姜八一

（山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院，山東濰坊 261061）

仔貂斷奶后，受心理、營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境及其他應(yīng)激的影響，再加上仔貂本身消化道發(fā)育與主動(dòng)免疫功能不完善，斷奶仔貂腹瀉發(fā)病率較高，嚴(yán)重影響仔貂的成活率。研究表明，在飼料中添加一定的微生態(tài)制劑可以有效預(yù)防斷奶仔豬腹瀉病的發(fā)生（王志成等，2018；龐敏，2016）。那么，在仔貂斷奶前后也添加一定劑量的微生態(tài)制劑是否可以緩解斷奶仔貂腹瀉病的發(fā)生呢？本研究旨在仔貂斷奶前后添加一定劑量的自制合生素，觀察合生素在預(yù)防斷奶腹瀉病的臨床應(yīng)用效果。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 濰坊某水貂養(yǎng)殖場(chǎng)準(zhǔn)備斷奶水貂（30日齡）。

1.2 試驗(yàn)材料 枯草芽孢桿菌（活菌含量均為10×1010CFU/g）、地衣芽孢桿菌（活菌含量均為4×1010CFU/g）由昌邑市明興飼料有限責(zé)任公司生產(chǎn)提供；低聚木糖（純度為95%）由山東龍力生物科技股份有限公司生產(chǎn)提供；自制水貂合生素由芽孢桿菌（枯草芽孢桿菌與地衣芽孢桿菌2∶1混合）和低聚木糖按1∶1比例均勻混合制備而成；Vrit-2900Vet Plus全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、全自動(dòng)生化分析儀、微生物培養(yǎng)基和設(shè)備。

1.3 試驗(yàn)分組和試驗(yàn)設(shè)計(jì) 將120只斷奶仔貂（30日齡）隨機(jī)分成對(duì)照組、益生菌組、益生元組、合生素組4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只水貂，公母各半。在仔貂斷乳、前7 d和后7 d，益生菌組水貂飼喂基礎(chǔ)日糧+0.1%芽孢桿菌制劑，益生元組水貂飼喂基礎(chǔ)日糧+0.1%低聚木糖，合生素組水貂飼喂基礎(chǔ)日糧+0.1%自制水貂合生素，對(duì)照組水貂飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)期為14 d。試驗(yàn)動(dòng)物由專人進(jìn)行飼養(yǎng)管理。

1.4 測(cè)定指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)仔貂斷奶應(yīng)激期間對(duì)照組和試驗(yàn)組水貂腹瀉發(fā)病率、死亡率。檢測(cè)仔貂斷奶應(yīng)激期間對(duì)照組和試驗(yàn)組健康水貂的血清生化指標(biāo)，糞便大腸桿菌及乳酸桿菌的數(shù)量。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因素方差分析進(jìn)行比較。

2 結(jié)果

2.1 合生素對(duì)應(yīng)激仔貂腹瀉發(fā)病率和死亡率的影響 由表1可知仔貂在斷奶期間使用合生素后，腹瀉發(fā)生率顯著低于對(duì)照組、益生菌組和益生元組（P＜0.05），對(duì)照組、益生菌組和益生元組水貂腹瀉發(fā)生率差異不顯著（P＞0.05）；益生菌組、益生元組和合生素組水貂死亡率顯著降低（P＜0.05），益生菌組、益生元組和合生素組水貂死亡率差異不顯著（P＞0.05）但以合生素組水貂死亡率最低，以上結(jié)果顯示，合生素可以降低仔貂因斷奶應(yīng)激而引起的腹瀉發(fā)病率和死亡率。

表1 合生素對(duì)應(yīng)激水貂腹瀉發(fā)生率和死亡率的影響%

2.2 合生素對(duì)應(yīng)激仔貂血清生化指標(biāo)的影響由表2可知仔貂斷奶期間（14 d），飼料中分別添加益生菌、益生元和合生素后，三組血清總蛋白（TP）顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），但與益生菌組和益生元組差異不顯著（P＞0.05）；合生素組血清白蛋白（ALB）顯著高于對(duì)照組、益生元組和益生菌組（P＜0.05），但對(duì)照組、益生元組和益生菌組三組間差異不顯著（P＞0.05）；各組間血清尿素氮（BUN）、血液葡萄糖（GLU）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）差異不顯著（P＞0.05）。以上結(jié)果表明，短時(shí)間添加合生素可以明顯提高血液總蛋白、白蛋白和球蛋白水平，但對(duì)血清其他生化指標(biāo)影響不大。

2.3 合生素對(duì)應(yīng)激仔貂糞便微生物數(shù)量的影響由表3可知仔貂斷奶期間（14 d），飼料中分別添加益生菌、益生元和合生素后，糞便大腸桿菌數(shù)量顯著減少（P＜0.05），益生菌組、益生元組和合生素組組間差異不顯著（P＞0.05）；合生素組糞便乳酸桿菌數(shù)量顯著高于對(duì)照組、益生菌組和益生元組（P＜0.05），對(duì)照組、益生菌組和益生元組差異不顯著（P＞0.05），但有上升趨勢(shì)。以上結(jié)果顯示，在仔貂斷奶期間添加合生素可以顯著提高乳酸桿菌的數(shù)量，抑制大腸桿菌增殖。

表2 合生素對(duì)應(yīng)激仔貂血生化指標(biāo)的影響

表3 合生素對(duì)應(yīng)激仔貂糞便微生物的影響 log10 CFU/g

3 討論

3.1 合生素對(duì)應(yīng)激水貂腹瀉發(fā)病率和死亡率的影響 仔貂斷奶經(jīng)歷母仔分離、營(yíng)養(yǎng)從乳轉(zhuǎn)向配合飼料糧、從與同伴群居到單獨(dú)飼養(yǎng)等一系列應(yīng)激。此時(shí)水貂腹瀉發(fā)生率較高，也是影響水貂成活率的關(guān)鍵。在水貂斷奶前7 d和后7 d連續(xù)添加合生素對(duì)斷奶應(yīng)激引起的腹瀉具有很好的預(yù)防效果。王惠英（2009）給60～65日齡的公貂每天添加0.4 g/只棉籽低聚糖，可有效降低水貂腹瀉病的發(fā)生。周韶等（2011）發(fā)現(xiàn)，在仔豬日糧中添加不同水平的低聚木糖可降低仔豬腹瀉率。說(shuō)明低聚糖對(duì)維持動(dòng)物腸道微生物平衡和腸道健康具有重要作用。楊桂連等（2017）也從多方面綜述了益生菌（乳酸菌類制劑、酵母菌類制劑、芽孢桿菌類制劑）在防治斷奶仔豬腹瀉中的作用和應(yīng)用價(jià)值。本研究自制的合生素中含有芽孢桿菌、及低聚木糖，兩者進(jìn)入腸道后能更好的維持腸道微生態(tài)平衡，提高腸道免疫功能。

3.2 合生素對(duì)應(yīng)激水貂血液指標(biāo)的影響 仔貂斷奶期間使用合生素對(duì)血清尿素氮（BUN）、血液葡萄糖（GLU）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）未產(chǎn)生顯著影響，可能是合生素使用時(shí)間比較短，僅14 d。但合生素組血清總蛋白和球蛋白水平顯著升高，表明芽孢桿菌制劑和低聚木糖具有明顯的免疫調(diào)節(jié)功能。方桂友等（2015）在仔豬飼料中添加枯草芽孢桿菌和低聚木糖也可顯著提高血清中IgG和IgM的水平，增強(qiáng)豬體的抵抗力。薛云等（2018）在斷奶仔兔基礎(chǔ)日糧中添加枯草芽孢桿菌制劑，連續(xù)飼喂30 d后，血清Ig A和Ig G水平顯著高于未添加組。

3.3 合生素對(duì)應(yīng)激水貂糞便微生物數(shù)量的影響仔貂哺乳階段腸道微生物區(qū)系保持動(dòng)態(tài)平衡，而在斷奶應(yīng)激條件下極易引起腸道微生物區(qū)系紊亂，導(dǎo)致有害菌大量繁殖，從而引起腹瀉。很多研究證實(shí)，飼糧中添加益生菌后能夠減仔畜腹瀉，降低糞便中大腸桿菌的數(shù)量（韓金鳳和賀建華，2017；周盟等，2014）。本試驗(yàn)使用的合生素含有地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿，地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌為需氧菌，進(jìn)入動(dòng)物腸道內(nèi)可消耗大量的游離氧，為消化道中的乳桿菌、腸球菌和乳球菌等腸道優(yōu)勢(shì)菌提供了更為理想的生長(zhǎng)環(huán)境，可抑制有害菌的生長(zhǎng)。而低聚木糖被雙歧桿菌發(fā)酵后形成的產(chǎn)物為短鏈脂肪酸，能降低腸道pH，促進(jìn)腸道運(yùn)動(dòng)，進(jìn)而改善排便性能。

4 結(jié)論

仔貂斷奶期間添加0.01%由芽孢桿菌（枯草芽孢桿菌與地衣芽孢桿菌2∶1混合）和低聚木糖按1∶1比例均勻混合制備而成合生素，可有效降低水貂腹瀉發(fā)生率，提高水貂成活率。