劉 穎,宋文琪

(國家兒童醫(yī)學(xué)中心暨首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院 檢驗(yàn)中心，北京 100045)

維生素D屬于脂溶性維生素，具抗佝僂病作用，又稱抗佝僂病維生素，維生素D家族成員中最重要的成員是VD2(麥角鈣化醇)和VD3(膽鈣化醇)，它們存在于部分天然食物中；人體皮下儲(chǔ)存有從膽固醇生成的7-脫氫膽固醇，受紫外線的照射后，可轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素D3。維生素D的主要功能是維持人體內(nèi)鈣的代謝平衡以及骨骼形成。此外，維生素D缺乏與人體免疫功能異常、心血管疾病、代謝性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤等密切相關(guān)[1-5]，25-OH-D3是血液循環(huán)中維生素D最主要的儲(chǔ)存和循環(huán)形式，半衰期2～3周，是監(jiān)測(cè)維生素D狀態(tài)的最佳指標(biāo)。

為了解本地區(qū)兒童25-OH-D3缺乏情況，為兒童維生素缺乏癥的防控和合理補(bǔ)充維生素D提供數(shù)據(jù)?，F(xiàn)將2016年1月至12月在首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院保健科就診的常規(guī)體檢兒童，年齡在1月～16歲兒童10 925例用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)全血25-OH-D3水平并計(jì)算不足及缺乏率，分析結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 2016年1月12月在首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院保健科表觀正常的常規(guī)體檢兒童且年齡在1月～16歲兒童10 925例，以25-OH-D3水平<20.0 μg/L判斷為25-羥基維生素D3不足及缺乏[6]。納入標(biāo)準(zhǔn)：表觀正常、骨骼發(fā)育正常，近期無感染，無肝、腎、消化系統(tǒng)、內(nèi)分泌相關(guān)疾病，無遺傳免疫缺陷病及慢性??；體格檢查無佝僂病相關(guān)臨床癥狀。

1.2 檢測(cè)方法 采集患兒末梢血40 μL加入800 μL稀釋液，混勻后2～8 ℃保存，3 d內(nèi)檢測(cè)，按照北京博暉創(chuàng)新光電技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的25-羥基維生素D3檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)說明書進(jìn)行操作，批內(nèi)精密度：CV值≤10%；批間精密度： CV值≤15%，采用EVOLIS全自動(dòng)酶免分析儀(美國BIO RAD)檢測(cè)全血中的25-羥基維生素D3。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以缺乏率表示(%)，比較采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 不同年齡、不同性別間兒童25-OH-D3比較 1月～16歲兒童25-OH-D3水平為(24.27±4.30 μg/L)，其中男童6 552例，女童4 373例，年齡分布為(3.074±3.081歲)，不同年齡、不同性別間兒童其不足及缺乏率的比較見表1。各組間男童與女童比較差異均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，χ2值為：1.363、0.002、2.351、0.579；P>0.05。不同年齡組間除1～3歲與3～6歲比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。

表1不同年齡、不同性別間兒童25-OH-D3不足及缺乏率比較

年齡男童不足及缺乏[例(%)]女童不足及缺乏[例(%)]合計(jì)[例(%)]不同年齡之間比較(χ2)P1月～1歲1167(13.11)920(14.89)2087(13.90)?6.694<0.011～3歲2459(11.59)1793(11.54)4252(11.57)3.2060.073～6歲1557(9.44)859(11.41)2416(10.14)12.457<0.01>6歲1369(13.07)801(14.23)2170(13.50)χ2 12.4989.2120.199P <0.01<0.05<0.01

*：1月～1歲組與3～6歲組比較χ2=15.079 ，P<0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 不同季節(jié)兒童 25-OH-D3不足及缺乏率比較見表3，夏季及冬季不足及缺乏率較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，不足及缺乏率：夏季>冬季>春季>秋季。

表3不同季節(jié)間兒童25-OH-D3不足及缺乏率比較

季節(jié)總例數(shù)正常不足及缺乏[例(%)]不同季節(jié)之間比較(χ2)P春季(3～5月)3 0812 731350(11.36)6.479<0.01夏季(6～8月)3 6283 141487(13.42)秋季(9～11月)2 0991 890209(9.96) 9.262<0.01冬季(1～2、12月)2 1171 843274(12.92)χ218.056P<0.01

3 討論

25-OH-D3是維生素D在血液循環(huán)中的主要形式。25-OH-D3可在腎臟以及其他組織中再次羥化為l,25-(OH)2D3。1,25-(OH)2D3是維生素D的活性形式[7]。目前對(duì)維生素D的大量深入研究顯示，維生素D不再被認(rèn)為是僅僅用于預(yù)防兒童佝僂病的營養(yǎng)必需品，維生素D對(duì)健康的意義被更加廣泛的認(rèn)知，并在大量臨床試驗(yàn)中得到證實(shí)[ 8-10]，喬陽[11 ]等證實(shí)維生素D缺乏可造成兒童體液和細(xì)胞免疫的能力降低，江巍[12]、黃田[13]、汪鴻[14]、宋美潓[15]均闡述了關(guān)于維生素D缺乏對(duì)腫瘤、呼吸系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌疾病、自身免疫性疾病、心血管疾病，精神及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的影響?？偟膩碚f，維生素D缺乏的治療和預(yù)防對(duì)于所有人群，尤其是兒童的整體健康發(fā)展是非常重要的。但是這種依賴陽光合成的營養(yǎng)素在天然食物中含量稀少，因此監(jiān)測(cè)25-OH-D3的水平并通過維生素D制劑的補(bǔ)充來滿足兒童正常需求是非常必要的。監(jiān)測(cè)25-OH-D3的水平有很多不同的檢測(cè)方法，同時(shí)可以選擇不同標(biāo)本類型，其中ELISA法是檢測(cè)血清中25-OH-D3的濃度水平最常用的方法，主要優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，易于基層醫(yī)院大批量開展，非常適合于臨床初篩實(shí)驗(yàn)，主要缺點(diǎn)表現(xiàn)在抗體之間的交叉反應(yīng)導(dǎo)致的方法特異性不足。高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法作為檢測(cè)25-OH-D3的參考方法，可去除上述干擾因素，有非常高的特異性和靈敏度，但樣本前處理非常復(fù)雜，適合于科研及確證實(shí)驗(yàn)。本研究采用的ELISA試劑檢測(cè)25-OH-D3的樣本類型包括血清、血漿和全血，且三種標(biāo)本類型對(duì)25-OH-D3的檢測(cè)無顯著差異。因?yàn)槿獦颖揪哂锌梢阅┥也杉⒉蓸恿可俚葍?yōu)點(diǎn)，非常適合于兒童群體或者定期篩查群體，因此本研究選擇了末梢血樣本進(jìn)行25-OH-D3水平分析。

目前，國內(nèi)的多位學(xué)者均有報(bào)道關(guān)于維生素D水平與季節(jié)之間的關(guān)系，但不同地區(qū)間差異較大：胡華蕓等[16]報(bào)道廣州地區(qū)0～3歲嬰幼兒8月維生素D水平全年最低；蔣新液等[17]報(bào)道無錫地區(qū)0～3歲嬰幼兒夏季維生素D水平低于冬春季和秋季；毛春婷等[18]報(bào)道南京0～14歲兒童維生素D水平冬春季顯著低于夏秋季；高改蘭等[19]報(bào)道寶雞地區(qū)0～7歲兒童維生素D缺乏率春>冬>秋>夏；張萍萍等[20]報(bào)道廣州0～14歲兒童維生素D缺乏率冬>春>秋>夏。本研究結(jié)果顯示健康兒童25-OH-D3不足及缺乏率存在季節(jié)性差異，且北京1月～16歲兒童夏、冬季節(jié)兒童25-OH-D3不足及缺乏率高于春、秋季，維生素D不足及缺乏率呈現(xiàn)夏(13.42%)>冬(12.92%)>春(11.36%)>秋(9.96%)趨勢(shì)；分析原因，可能與北京地區(qū)氣候特點(diǎn)密切相關(guān)，北京春季多風(fēng)，家長大量減少兒童戶外活動(dòng)時(shí)間，而進(jìn)入6月份就非常炎熱，7、8月更是悶熱難耐，整個(gè)夏季兒童戶外活動(dòng)時(shí)間更是減少甚至沒有，另外可能與家長遵從保健醫(yī)生的建議陽光充足的季節(jié)減少維生素D制劑的補(bǔ)充，沒有充分考慮到陽光照射的有效時(shí)間有關(guān)。維生素D制劑正常劑量的補(bǔ)充可能不能滿足需要所致。所以要加強(qiáng)此期間25-OH-D3的監(jiān)測(cè)，為合理補(bǔ)充維生素D制劑提供依據(jù)。

調(diào)查研究結(jié)果顯示不同性別間兒童25-OH-D3不足及缺乏率無差異，這與國內(nèi)大部分相關(guān)報(bào)道一致[16-20]。毛春婷[18]、張萍萍[20]、劉曉敏[21]、胡有瑤[22]的研究提出，不同年齡組間兒童維生素D的不足及缺乏率隨著年齡的增長逐漸上升，高年齡組(學(xué)齡組)不足及缺乏率最高。本研究顯示不同年齡組間兒童25-OH-D3不足及缺乏率有差異，1月～1歲及>6歲組兒童不足及缺乏率高，這可能是由于<1歲兒童戶外活動(dòng)比較少，陽光照射時(shí)間短，雖然補(bǔ)充維生素D制劑，可能家長考慮孩子年齡小，擔(dān)心維生素D中毒，對(duì)補(bǔ)充維生素D有所顧慮，但是近幾年國內(nèi)報(bào)道維生素D中毒極為罕見，維生素D缺乏卻十分常見[21，23-24]。而>6歲兒童隨著年齡的增長生長發(fā)育加快對(duì)維生素D的需求量增大，目前3歲以上兒童從保健的角度基本不補(bǔ)充維生素D制劑，且與學(xué)齡期兒童在學(xué)校及各種培訓(xùn)機(jī)構(gòu)而戶外活動(dòng)時(shí)間通常不能保證有關(guān)。因此，本研究建議應(yīng)加強(qiáng)維生素D的季節(jié)性檢測(cè)，并結(jié)合預(yù)防指南建議[6,25]關(guān)注本地區(qū)<1歲及6歲以上兒童維生素D的合理補(bǔ)充。

綜上所述，雖然在國內(nèi)各地區(qū)兒童25-OH-D3不足及缺乏最嚴(yán)重的季節(jié)有所不同，但不足及缺乏率的現(xiàn)象較為普遍，鑒于25-OH-D3對(duì)兒童生長發(fā)育的重要性，建議應(yīng)增加兒童戶外活動(dòng)的時(shí)間，定期監(jiān)測(cè)兒童25-OH-D3水平，根據(jù)不足及缺乏率情況合理補(bǔ)充維生素D制劑，以滿足兒童生長發(fā)育對(duì)維生素D的需要。