宋智琴， 楊平飛， 劉 海， 羅 鳴， 夏 與， 吳明開*

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 現(xiàn)代中藥材研究所, 貴州 貴陽 550006； 2.安龍縣欣蔓生物科技有限責(zé)任公司, 貴州 安龍 552400)

白及(Bletillastriata)是蘭科白及屬多年生草本植物，以干燥塊莖入藥，為歷版《中國藥典》收載，屬于我國傳統(tǒng)名貴的中藥，具有收斂止血，消腫生肌的功效，臨床上用于咯血、吐血，外傷出血，瘡瘍腫毒，皮膚皸裂等[1]，又因其花色艷麗，也是一種很好的景觀植物。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，白及具有抗菌、抗腫瘤、抗?jié)兊茸饔肹2-6]，除在醫(yī)藥領(lǐng)域具有其他藥物不可替代的作用之外，還廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)、煙草工業(yè)、化工行業(yè)( 包括高檔美容產(chǎn)品)[7-12]等，其用途廣泛。因其無可替代的神奇療效和廣泛的用途導(dǎo)致了白及的市場需求量越來越大，市場主要依靠野生資源進(jìn)行供應(yīng)，導(dǎo)致白及野生資源破壞嚴(yán)重。中國植物物種信息數(shù)據(jù)庫將其列為國家重點(diǎn)野生植物名錄。為滿足龐大的市場需求，利用組織培養(yǎng)種球建設(shè)規(guī)范化白及種植基地是解決白及市場供需矛盾唯一出路。而今，白及經(jīng)過種子無菌萌發(fā)獲得白及組織培養(yǎng)種莖的技術(shù)已經(jīng)成熟，白及組織培養(yǎng)種莖移栽大田技術(shù)也得到突破，白及已經(jīng)步入開展規(guī)?；斯しN植之路。中藥材屬于特殊商品，種植采收后的產(chǎn)地初加工技術(shù)直接關(guān)系到后續(xù)的貯藏和臨床應(yīng)用效果，影響著藥材的質(zhì)量，是藥材發(fā)展產(chǎn)業(yè)鏈中重要環(huán)節(jié)。白及在產(chǎn)地加工中，藥農(nóng)根據(jù)自己的加工習(xí)慣和銷售需求，有的直接烘干或曬干，有的隨意的蒸或煮后干燥，有的去皮，有的不去皮等，導(dǎo)致白及的質(zhì)量參差不齊，從而影響白及的藥用效果。選擇白及適宜的加工貯藏方法對(duì)保證珍稀藥材白及的質(zhì)量具有重要意義。為此，筆者對(duì)白及不同產(chǎn)地的加工貯藏方法進(jìn)行研究，篩選出適宜白及的最佳加工貯藏方法，以期為其產(chǎn)業(yè)化發(fā)展和促進(jìn)貴州藥材資源優(yōu)勢轉(zhuǎn)化為現(xiàn)實(shí)生產(chǎn)力提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

白及塊莖：于2016年11月在貴州省現(xiàn)代中藥材研究所資源圃采收。其原植物經(jīng)貴陽中醫(yī)學(xué)院鑒定為蘭科白及屬植物白及〔Bletillastriata(Thunb.)Reichb. f.〕。

試劑：D-無水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，中國食品藥品檢定研究院購買，批號(hào)：P-012-140730；白及對(duì)照品，購買于中國食品藥品檢定研究院，編號(hào)121262-201405。

儀器：HP8453型紫外可見分光光度計(jì)，101-AB型電熱鼓風(fēng)干燥箱，賽多利斯電子天平，數(shù)顯恒溫水浴鍋(上海梅香儀器有限公司)。

1.2方法

1.2.1樣品處理采收的白及塊莖除去泥土、非藥用部位等雜質(zhì)，用清水洗凈，控干水分，備用。

1.2.2新鮮塊莖蒸/煮的時(shí)間選擇在備用白及中挑選大小均勻者混勻，采用四分法取樣24份，隨機(jī)分為8組，每組3個(gè)平行試驗(yàn)設(shè)計(jì)白及開水沸騰狀態(tài)蒸的時(shí)間分別為6 min、8 min、10 min和12 min；沸騰狀態(tài)煮的時(shí)間分別為3 min、5 min、8 min和10 min，經(jīng)蒸或煮處理后將塊莖最大的白及塊莖沿中心切開，觀察切面情況，判斷蒸透心和煮透心的最佳時(shí)間。

1.2.3干燥方法挑選大小均勻的白及，采用四分法取樣27份，隨機(jī)分為9組，每組3個(gè)平行。隨機(jī)取8組按如下方法處理：處理1～4為新鮮塊莖切片分別于30℃、40℃、50℃和60℃烘干；處理5為新鮮塊莖切片曬干；處理6為新鮮塊莖切片陰干；基于新鮮塊莖蒸或煮的時(shí)間選擇的試驗(yàn)結(jié)果，處理7為新鮮塊莖煮8～10 min切片60℃烘干，處理8為新鮮塊莖蒸10～12 min切片60℃烘干?！吨袊幍洹?015版中白及加工需要搓去外皮，故處理9，取樣1組(3份)，用刀輕刮外皮，取新鮮塊莖皮，60℃烘干[13-14]。

1.2.4包裝貯存方式將鮮莖切片白及60℃烘干至恒重，隨機(jī)取樣12份，每份50 kg，分成4組，分別直接堆放、網(wǎng)袋包裝、塑料袋包裝、編織袋包裝，置于溫度(25±2)℃，濕度(60±5)%條件下，貯存1年。

1.3指標(biāo)測定

1.3.1白及折干率和乙醇提取率 折干率：連續(xù)3次稱定藥材重量不變時(shí)，計(jì)算折干率。提取率：取白及塊莖樣品粉末適量，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，按1∶10的料液比加75%的乙醇，以80℃恒溫水浴回流提取2次，每次提取1 h，過濾，合并濾液并減壓濃縮后，烘干至恒重，計(jì)算白及乙醇提取率。

1.3.2白及多糖的測定

1) 標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液的制備。取D-無水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)物適量，精密稱定到1.0 mg，置于10 mL容量瓶中，加適量蒸餾水溶解并定容至刻度，混勻，配制成0.1 g/mL的D-無水葡萄糖溶液。

2) 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。精密稱取上述D-無水葡萄糖溶液0.1 mL、0.3 mL、0.7 mL和0.9 mL于10 mL容量瓶中，用蒸餾水補(bǔ)至1 mL，精密加入5%苯酚溶液(現(xiàn)配)1 mL，搖勻，精密加入5 mL濃硫酸，立即搖勻，于沸水浴中加熱20 min，冷卻至室溫。以蒸餾水同法制備空白對(duì)照，在488 nm處測定吸光度。以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度C(μg/L)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：y=0.058 9x+0.004 5，R2=0.999 7，表明D-無水葡萄糖在1.574～14.152 mg/L濃度范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。

3) 供試品溶液的制備。取白及塊莖樣品粉末適量，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，加約80 mL水回流2 h，冷卻至室溫，過濾，濾渣經(jīng)水少量多次洗滌，洗滌液與濾液合并定容至100 mL，搖勻，從中精密吸取0. 2 mL，加無水乙醇0.8 mL，放入冰箱，次日取出，10 000 r/min離心5 min，沉淀再分別加1 mL 80%的乙醇洗滌2次，同法離心，棄去上清液，低溫干燥，精密加入1 mL水將沉淀轉(zhuǎn)移至15 mL具塞玻璃試管中，精密加入臨配的5%苯酚水溶液1 mL，搖勻，再精密加入5 mL硫酸，搖勻，于沸水浴中加熱20 min，冷至室溫作為供試品溶液。[15]

4) 樣品含量測定。精密稱取白及塊莖粉末，按1.3.2第3項(xiàng)制備供試品溶液，在488 nm處測定吸光度，每個(gè)溶液進(jìn)樣3次，計(jì)算白及多糖含量。

2結(jié)果與分析

2.1新鮮塊莖蒸/煮不同時(shí)間的切面情況

新鮮塊莖蒸6 min和8 min的白及切面中心有白點(diǎn)和明顯的環(huán)，未透心，而蒸10 min和12 min的已透心；新鮮塊莖煮3 min的白及切面也可見有白點(diǎn)和明顯的環(huán)，未透心，而煮5 min及以上的均已透心。白及塊莖采用蒸制時(shí)開水鍋沸騰蒸10～12 min，或沸騰狀態(tài)煮制5～8 min即可。

2.2新鮮塊莖不同處理方法白及的質(zhì)量

2.2.1不同干燥處理白及的質(zhì)量從表1可知，不同干燥處理方法對(duì)折干率、提取率和白及多糖含量都有影響。折干率以新鮮塊莖切片60℃烘干最高，為30.63%，鮮莖切片曬干和和鮮莖切片40℃烘干次之，分別為24.82%和24.61%；提取率以新鮮塊莖切片60℃烘干最高，為25.33%，煮透切片60℃烘干最低，為17.27%。新鮮塊莖切片后烘干的乙醇提取率普遍高于曬干、陰干和蒸煮后干燥；白及多糖含量從高到低依次為蒸后切片60℃烘干>新鮮塊莖皮60℃烘干>煮后切片60℃烘干>鮮莖切片60℃烘干>鮮莖切片50℃烘干>鮮莖切片曬干>鮮莖切片30℃烘干>鮮莖切片陰干>鮮莖切片40℃烘干，其中不同溫度烘干時(shí)提取率和多糖含量均以60℃最高，綜合白及多糖含量及折干率看，蒸透切片60℃烘干的多糖含量最高，折干率也較高，故白及的干燥處理以蒸透切片60℃烘干最佳。

表1 不同處理方法的白及質(zhì)量

注：表中同列不同小寫字母表示差異顯著，P<0.05，下同。

Note:Different lowercase letters in the same column indicate significant difference at 5% level.The same below.

2.2.2不同包裝貯存白及的質(zhì)量從表2可知，相同條件下，不同包裝貯存的白及提取率差異顯著，直接堆放的多糖含量最高，為21.44%;編織袋包裝的多糖含量最低，為14.03%。綜合評(píng)定以提取率和多糖含量的乘積計(jì)，不同包裝貯存的白及質(zhì)量依次為直接堆放>塑料袋包裝>網(wǎng)袋包裝>編織袋包裝。

3結(jié)論與討論

中藥材產(chǎn)地初加工是藥材生產(chǎn)與品質(zhì)形成的重要環(huán)節(jié)，加工的目的是保證藥材質(zhì)量、利于包裝、貯藏和運(yùn)輸，防止藥材變色、變質(zhì)、霉?fàn)€腐敗等影響療效。試驗(yàn)以白及折干率、提取率和白及多糖含量為指標(biāo)，考察在不同溫度條件下烘干、多種處理方法之間的差異。結(jié)果表明，白及產(chǎn)地加工以蒸10～12 min后切片60℃烘干為最佳，此時(shí)折干率為24.65%，提取率為18.40%，多糖含量為37.43%；塊莖皮折干率也較高，且提取率和白及多糖含量表現(xiàn)較好，因此在產(chǎn)地加工時(shí)可考慮不必特意除掉。貯存時(shí)以干燥塊莖直接堆放最佳。

白及塊莖皮折干率最高可能與其本身細(xì)胞排列較緊密的顯微結(jié)構(gòu)有關(guān)，塊莖皮中也有較高的多糖分布，是否與多糖在塊莖中貯存的位置有關(guān)，靠近表皮位置的細(xì)胞貯存多糖量需要進(jìn)一步試驗(yàn)探討。不同溫度烘干造成多糖含量差異顯著，導(dǎo)致此結(jié)果的原因可能與白及多糖本身屬于大分子鏈柔性大易變性有關(guān)；且在干燥過程中自身仍維持著一定的呼吸作用，需消耗糖分以維持機(jī)體的生理活動(dòng)，因此溫度可能成為影響藥材多糖含量的重要因素之一[15]。烘干法、曬干法和陰干法對(duì)白及多糖的影響也較大，蒸后切片60℃烘干處理下白及多糖含量最高，該結(jié)果與邢麗花等[13]研究結(jié)果有差異，可能是曬干過程中曬的時(shí)間長短和光強(qiáng)度有差異導(dǎo)致，其原因需要進(jìn)一步證實(shí)。曬干、陰干過程中和蒸煮處理時(shí)某些成分被損耗或溶出，導(dǎo)致了切片后直接烘干的提取率普遍高于其他處理。無論哪種方法都能使藥材干燥，但筆者認(rèn)為烘干法會(huì)使藥材中的水分迅速蒸發(fā)而達(dá)到干燥效果；曬干及陰干的加工過程緩慢、受氣候影響較大、溫度較低且不易控制、耗時(shí)長、水分不易排出，藥材中的酶不能迅速滅活導(dǎo)致多糖含量下降。尤其是新鮮塊莖不適合直接陰干，一般放置2周以后容易發(fā)生變質(zhì)現(xiàn)象，白及塊莖芽部和損傷部位發(fā)紅、霉變而影響質(zhì)量。切片后干燥時(shí)間短，產(chǎn)地大規(guī)模加工時(shí)可視天氣情況和本身?xiàng)l件采用曬干或烘干的干燥方式。

中藥材的貯存，也是影響中藥材質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在貯存過程中，貯存方式是控制水氣對(duì)中藥材影響的關(guān)鍵一環(huán)。多數(shù)中藥材貯存時(shí)需要陰涼、通風(fēng)、干燥的條件，其中通風(fēng)不僅是要求倉庫通風(fēng)性，也對(duì)包裝通氣性有關(guān)。白及塊莖本身呈不規(guī)則形狀，堆放時(shí)每個(gè)塊莖之間的空隙是相互連通透氣的，具有較好的透氣性；而網(wǎng)袋和編織袋，也具有一定的透氣性，但跟堆放相比稍差；塑料袋的透水透氣性最差，但能有效保持內(nèi)部的干燥性。