李 靜，何時(shí)雨，劉世偉，林希昊，鄭永清，劉 青

（1.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院廣州實(shí)驗(yàn)站，廣東 廣州 510140；2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)資源環(huán)境學(xué)院，廣東 廣州 510642）

【研究意義】 土壤是植物生長的基本基質(zhì)，也是植物種間關(guān)系的介質(zhì)，土壤的分解活動(dòng)能夠改變養(yǎng)分礦化速率，影響內(nèi)部養(yǎng)分含量及酶活性，進(jìn)而影響整個(gè)植物群落[1]。雜草會(huì)造成生態(tài)系統(tǒng)破壞，降低作物產(chǎn)量，造成經(jīng)濟(jì)損失，土壤環(huán)境影響農(nóng)田雜草的種類和數(shù)量[2]。植物分泌化感物質(zhì)會(huì)改變土壤理化性質(zhì)、酶活性和微生物群落結(jié)構(gòu)，進(jìn)而影響周邊其他植物的吸收和生長[3-5]，研究化感作用對土壤養(yǎng)分、酶活性的影響對于揭示植物之間的相互作用及利用作為雜草控制具有重要意義。【前人研究進(jìn)展】 研究發(fā)現(xiàn)，酚酸類化感物質(zhì)會(huì)直接影響土壤生態(tài)系統(tǒng)營養(yǎng)元素的循環(huán)[6-7]，土壤中化感物質(zhì)阿魏酸濃度增加，會(huì)降低土壤微生物數(shù)量，土壤酶活性以及土壤養(yǎng)分包括有機(jī)質(zhì)、銨態(tài)氮、有效磷和速效鉀含量[8]。香草醛和對羥基苯甲酸能夠降低土壤有效氮和速效鉀的含量，萜類化感物質(zhì)也能改變營養(yǎng)循環(huán)速率，特別是氮和碳源物質(zhì)的循環(huán)速率[9-10]。邰鳳嬌等[11]發(fā)現(xiàn)，外來入侵植物蒼耳水提液處理能夠顯著提高土壤速效氮和速效鉀的含量，并且增加土壤脲酶和蔗糖酶的活性；呂可等[12]研究發(fā)現(xiàn)，花椒葉水浸液會(huì)使根際土蛋白酶、蔗糖酶和酸性磷酸酶活性明顯低于非根際土相應(yīng)的酶活性，而過氧化氫酶和多酚氧化酶活性則顯著升高。香樟凋落物分解能夠明顯改變土壤氮營養(yǎng)狀況，對受體植物辣椒的生長、生殖光合生理和活性氧代謝起到明顯的干擾作用[13]。廣藿香連作化感作用對土壤產(chǎn)生的影響會(huì)進(jìn)一步影響其本身扦插苗不定根的形成和發(fā)展[14]；地黃的連作障礙是一個(gè)涉及植物、土壤、微生物等多種生物及環(huán)境因素共同作用的過程[15]。化感作用可以改變土壤微生物群落結(jié)構(gòu)，影響土壤酶的種類、活性以及土壤養(yǎng)分的有效性，從而進(jìn)一步影響植物的吸收利用[16]。

【本研究切入點(diǎn)】 木薯葉具有化感作用[17]，而化感作用是植物通過向環(huán)境釋放化學(xué)物質(zhì)而對其他植物產(chǎn)生影響，利用化感作用能夠進(jìn)行自然雜草控制[18]。木薯種植過程中會(huì)產(chǎn)生大量的木薯葉，而這些木薯葉大部分以凋落物形式進(jìn)入土壤，為此，本研究就木薯化感作用對土壤養(yǎng)分、酶活性的影響進(jìn)行研究?！緮M解決的關(guān)鍵問題】 本研究設(shè)計(jì)不同的木薯葉浸提液濃度處理木薯園土壤，在不同的處理期采集土壤，選擇土壤養(yǎng)分（pH、有機(jī)質(zhì)、堿解氮、有效磷、速效鉀）和酶活性（脲酶、磷酸酶、過氧化氫酶）評價(jià)木薯葉化感對土壤的影響，旨在揭示化感作用通過影響土壤指標(biāo)在雜草控制上起作用的可能性。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)?zāi)臼韴@種植品種為可食用木薯品種華南9號，由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所培育，于2018年4月底開始種植于避雨大棚，試驗(yàn)地點(diǎn)設(shè)在廣州市花都區(qū)花東鎮(zhèn)四聯(lián)村中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院廣州實(shí)驗(yàn)站基地，種植前土壤打碎混勻，保證種植起始條件均勻一致。

1.2 試驗(yàn)方法

選取植株中部生長無蟲癭的成熟葉片，將收獲的木薯葉片于陰涼處放置，隨時(shí)翻動(dòng)，直至陰干。設(shè)置3種不同濃度的水提液（0.025、0.05、0.1 g/mL）（以干重計(jì)）處理，以不澆浸提液為對照。3次重復(fù)，小區(qū)面積9 m2（ 3 m×3 m），種植株行距（1 m×1 m）每個(gè)小區(qū)均為4株（3 m）×4株（3 m）。小區(qū)土壤上層20 cm打碎混勻，太陽能高溫暴曬2周消毒。每個(gè)地塊底層于40 cm處埋入防雨布用于防止各地塊間水提液滲透。將木薯葉片用剪刀剪成2 cm×2 cm以下大小，于蒸餾水中浸提24 h，然后用紗布過濾，制作0.025、0.05、0.1 g/mL 3種濃度浸提液。在木薯生長期7月中旬開始進(jìn)行水提液處理，整個(gè)處理期為4個(gè)月，每周澆灌浸提液1次，每株澆灌500 mL。處理1個(gè)月（8月17日）、2個(gè)月（9月17日）、4個(gè)月（11月20日）分別采集3次土壤樣品進(jìn)行測定。

土壤采集采用傳統(tǒng)挖掘法，采集小區(qū)中央4株木薯根圍附近土壤（0～20 cm）五點(diǎn)混合，避開邊際株，每個(gè)小區(qū)土壤混合作為一個(gè)樣品。參照《土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法》[19]土壤pH值用pH計(jì)測定；有機(jī)質(zhì)用重鉻酸鉀容量法-外加熱法測定；堿解氮含量采用堿解擴(kuò)散法測定；有效磷采用鹽酸-氟化銨提取-鉬銻抗比色法；速效鉀采用乙酸銨提取-火焰原子吸收分光光度法；土壤脲酶采用比色法；土壤磷酸酶采用磷酸苯二鈉比色法；過氧化氫酶活性采用容量法測定。

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS11.5一元方差分析（LSD法），采用Microsoft Excel 2000軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 木薯葉化感對木薯根際土壤養(yǎng)分的影響

2.1.1 土壤pH和有機(jī)質(zhì)含量 土壤pH能影響植物對其他養(yǎng)分的吸收，進(jìn)而影響其他植物生長及整個(gè)群落組成。整體來看，施用木薯葉浸提液pH稍微有所增高，但差異不顯著?？梢?，木薯葉化感作用對土壤pH影響不大（表1）。

表1 木薯葉化感作用對土壤pH的影響Table 1 Effects of cassava leaf allelopathy on soil pH

木薯根際土壤在施用木薯葉浸提液處理后，有機(jī)質(zhì)含量隨木薯葉浸提液濃度的增加產(chǎn)生變化，有機(jī)質(zhì)含量隨濃度的升高整體呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢（表2）。土壤有機(jī)質(zhì)是評價(jià)土壤質(zhì)量的重要指標(biāo)，從測定結(jié)果可以看到，適當(dāng)濃度（0.05 mg/mL）的木薯葉浸提液化感作用有助于土壤有機(jī)質(zhì)的釋放，有機(jī)質(zhì)含量要顯著高于對照，處理1、2、4個(gè)月分別比對照高223%、165%和145%。而高濃度（0.1 mg/mL）的化感浸提液處理則會(huì)對有機(jī)質(zhì)的釋放起到阻礙作用。

表2 木薯葉化感作用對土壤有機(jī)質(zhì)含量的影響Table 2 Effects of cassava leaf allelopathy on soil organic content（g/kg）

2.1.2 土壤堿解氮、有效磷和速效鉀含量 土壤堿解氮表現(xiàn)出與有機(jī)質(zhì)含量相似的結(jié)果（表3），適當(dāng)濃度（0.05 mg/mL）的木薯葉浸提液化感作用能夠增加土壤堿解氮含量，高濃度（0.1 mg/mL）的浸提液則會(huì)降低土壤堿解氮含量。處理1個(gè)月0.025、0.05、0.1 mg/mL濃度浸提液處理土壤堿解氮含量分別比對照高28.99%、135.09%和129.87%。處理2個(gè)月低濃度（0.025 mg/mL）處理堿解氮含量有所降低，但0.05、0.1 mg/mL處理比對照分別高70.77%和23.76%。處理4個(gè)月表現(xiàn)與處理2個(gè)月相似的趨勢，0.025 mg/mL處理堿解氮含量稍微有所下降，但與對照差異不顯著。0.05、0.1 mg/mL處理比對照分別高65.41%和39.09%。

表3 木薯葉化感作用對土壤堿解氮含量的影響Table 3 Effects of cassava leaf allelopathy on soil alkaline nitrogen content（mg/kg）

土壤有效磷能夠反映土壤的供磷水平，整體來看，木薯浸提液化感作用能夠顯著提高土壤的供磷水平（表4），在浸提液濃度為0.05 mg/mL時(shí)，處理1個(gè)月和2個(gè)月有效磷含量分別比對照高307.52%和47.85%。處理4個(gè)月各處理與對照之間差異不顯著，有效磷含量基本處于穩(wěn)定。因此，在木薯的特定生長期，木薯葉化感作用能夠影響土壤的有效磷含量。

表4 木薯葉化感作用對土壤有效磷含量的影響Table 4 Effects of cassava leaf allelopathy on soil effective phosphorus content（mg/kg）

木薯葉化感作用整體上提高土壤速效鉀含量，無論是處理1個(gè)月、2個(gè)月還是4個(gè)月，化感作用對土壤速效鉀含量影響顯著（表5）。處理1個(gè)月土壤速效鉀含量隨木薯葉浸提液濃度的升高而升高，且達(dá)到顯著差異，0.025、0.05、0.1 mg/mL濃度浸提液處理分別比對照高147.25%、206.81%和264.88%。處理2個(gè)月土壤速效鉀含量隨浸提液濃度呈先升高后下降的趨勢，各濃度處理分別比對照高41.28%、71.69%和34.73%。處理4個(gè)月各濃度處理之間土壤速效鉀含量差異顯著，但比處理2個(gè)月速效鉀含量要低，可能是由于木薯生長吸收土壤養(yǎng)分導(dǎo)致土壤速效鉀含量降低。

表5 木薯葉化感作用對土壤有效鉀含量的影響Table 5 Effects of cassava leaf allelopathy on soil effective potassium content（mg/kg）

2.2 木薯葉化感對土壤酶活性的影響

2.2.1 土壤脲酶活性 土壤脲酶能夠促進(jìn)肽鍵的水解，脲酶活性與土壤微生物數(shù)量，有機(jī)質(zhì)含量和速效氮呈正相關(guān)關(guān)系，參與土壤含氮有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化，活性強(qiáng)度常用來表示土壤氮素供應(yīng)強(qiáng)度和氮素的有效化水平。因此，測定土壤脲酶活性具有重要的意義。由表6可知，脲酶活性在用木薯葉浸提液處理1個(gè)月、2個(gè)月、4個(gè)月表現(xiàn)出來的趨勢不同，但整體看來，化感作用提高土壤脲酶活性。低濃度（0.025 mg/mL）浸提液對土壤脲酶活性影響不大，隨浸提液濃度升高脲酶活性增強(qiáng)。0.05和0.1 mg/mL濃度下脲酶活性在處理1個(gè)月時(shí)分別比對照高74.49%和155.56%；處理2個(gè)月時(shí)比對照高82.13%和243.69%；處理4個(gè)月時(shí)分別比對照高163.08%和235.82%。

表6 木薯葉化感作用對土壤脲酶NH4+-N活性的影響Table 6 Effects of cassava leaf allelopathy on soil urease NH+-N activity（mg/kg）

2.2.2 土壤酸性磷酸酶活性 酸性磷酸酶活性與土壤有效磷含量呈正相關(guān)關(guān)系，能夠酶促分解土壤含磷化合物。從表7可以看出，木薯葉浸提液處理1個(gè)月對土壤酸性磷酸酶活性影響不大，各處理之間差異不顯著。處理2個(gè)月和4個(gè)月其化感作用整體促進(jìn)土壤酸性磷酸酶活性，并且處理結(jié)果顯著高于對照。中濃度（0.05 mg/mL）和高濃度（0.1 mg/mL）浸提液處理能夠顯著提高土壤酸性磷酸酶活性。

表7 木薯葉化感作用對土壤酸性磷酸酶P2O5活性的影響Table 7 Effects of cassava leaf allelopathy on soil acid phosphatase P2O5 activity（mg/kg）

2.2.3 土壤過氧化氫酶活性 土壤過氧化氫酶能夠促進(jìn)土壤多種化合物的氧化，有利于防止過氧化氫積累對生物體的毒害。整體來講，隨著化感作用增強(qiáng)，土壤過氧化氫酶活性增強(qiáng)（表8）。處理1個(gè)月3種濃度木薯葉浸提液能顯著提高土壤過氧化氫酶活性，且濃度越大，活性越強(qiáng)，3種濃度處理后過氧化氫酶活性分別比對照高74.56%、244.55%和242.33%。處理2個(gè)月低濃度（0.025 mg/mL） 處理過氧化氫酶活性與對照差異不大，中高濃度（0.05、0.1 mg/mL）處理顯著增強(qiáng)土壤過氧化氫酶活性，分別比對照高468.89%、327.32%。處理4個(gè)月后，浸提液澆灌土壤的過氧化氫酶活性中高濃度（0.05、0.1 mg/mL）分別比對照高142.58%、135.97%。

表8 木薯葉化感作用對土壤過氧化氫酶活性的影響Table 8 Effects of cassava leaf allelopathy on catalase activity（mL/g）

3 討論

植物所生長的環(huán)境因素與土壤化感作用密切相關(guān)，化感作用能夠影響土壤養(yǎng)分和其他因素的的有效性[20]。本研究中木薯葉片浸提液處理土壤能夠?qū)ν寥鲤B(yǎng)分、酶活性產(chǎn)生影響，浸提液濃度變化對土壤指標(biāo)也起到較大作用，因而木薯葉化感作用對土壤養(yǎng)分及酶活性的影響有可能被利用成為木薯園生態(tài)系統(tǒng)雜草控制的潛力因素。植物分泌化感物質(zhì)能夠進(jìn)行著各種生物化學(xué)過程，改變土壤微生物區(qū)系，影響土壤微生物酶活性[21]，整體改變土壤環(huán)境因素，進(jìn)而影響與其共生的其他植物生長乃至整個(gè)生態(tài)系統(tǒng)的組成。已有大量的研究結(jié)果證實(shí)，如花椒凋落物釋放的酚酸類化感物質(zhì)會(huì)改變土壤微生態(tài)環(huán)境和化學(xué)性質(zhì)，降低土壤銨態(tài)氮的含量，加速土壤有機(jī)磷和碳素的循環(huán)[22]。豆科植物也能被土壤化感作用影響，根系微生物種類的共生和結(jié)瘤，對豆科植物氮固定具有很大的影響。木薯生長過程中產(chǎn)生大量木薯葉，所含的化感物質(zhì)屬于一種天然的除草劑，來自于植物體，是環(huán)境長期選擇的結(jié)果，通過植物化感作用影響土壤環(huán)境對雜草的控制效果是進(jìn)行農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)管理的重要方法，不會(huì)對環(huán)境造成不利影響，是農(nóng)業(yè)中極具開發(fā)價(jià)值的環(huán)保型農(nóng)藥[23-24]。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，木薯浸提液化感作用對土壤養(yǎng)分指標(biāo)除pH外，對其他指標(biāo)均有不同程度影響。其中有機(jī)質(zhì)和堿解氮含量隨著浸提液濃度的大小先升高后降低，中高濃度浸提液能顯著提高土壤有效磷和速效鉀含量。木薯葉浸提液化感作用會(huì)提高土壤酶活性，中高濃度整體上能顯著提高土壤脲酶，酸性磷酸酶和過氧化氫酶活性。因此，木薯葉化感作用能夠?qū)ν寥拉h(huán)境產(chǎn)生影響，有可能進(jìn)一步在農(nóng)田雜草控制上具有一定的應(yīng)用潛能。